表面增强共振拉曼散射纳米探针比比法检测微卵巢癌的意义上

该方法利用纳米粒子对显微肿瘤进行局部应用，特别是在尚未获得血管瘤的恶性肿瘤中，如卵巢癌的转移。该技术是比率，成像靶向和非靶向纳米粒子在一次扫描，以减少假信号，并揭示肿瘤的真实程度。这些纳米粒子可以通过内丙酮或静脉注射进行，用于卵巢癌和许多其他肿瘤类型的高精度成像。

对于金纳米星芯合成，在4摄氏度的磁搅拌板上放置含有800毫升新鲜准备的抗坏血酸溶液的圆锥形烧瓶，并产生稳定的涡流。快速添加八毫升新鲜准备的四氯酸溶液到漩涡。在几秒钟内，纳米星将形成，溶液将采用深蓝色。

将纳米星悬浮液倒入 50 毫升锥形管中进行离心，并在旋转结束时从每个管中吸出除了最后 200 微升的上经剂。在将所有纳米粒子汇集到单个透析盒中之前，使用微管将纳米粒子重新插入每个管中的纳米粒子。然后将纳米颗粒解洗至少三天，对两升去水每天改变水。

对于二氧化硅壳的形成，首先在50毫升锥形管中加入10毫升异丙醇、500微升TEOS、200微升的去维水和60微升染料。在15毫升管中加入3毫升乙醇和200微升氢氧化铵。接下来，对拨号纳米星进行声波化，以分散任何星团，并在管中加入1.2毫升的纳米星。

将50毫升管放在涡流混合器上，并诱导稳定的涡流。在室温下以 300 RPM 的速度快速将管转移到摇床 15 分钟之前，只需再混合约 5 秒，即可将纳米星溶液快速添加到 50 毫升管中。两个管必须快速结合，并不断的尼兴下，以确保在纳米星上发生硅反应，并尽量减少自由二氧化硅生产。

在孵化结束时，用乙醇填充管子，以淬火反应，通过离心收集纳米星。吸气所有，但关于最后500微升的上超，注意不要打扰颗粒和重新暂停纳米粒子在一毫升新鲜乙醇。然后将溶液转移到1.5毫升离心管中，通过离心洗涤四个一毫升乙醇，每次洗涤之间通过超声波循环重新产生颗粒约一秒钟。

将硫醇引入颗粒表面，在上次洗涤后，将颗粒重新用一毫升的85%乙醇、10%3-3-甲基苯丙胺和5%的脱硫水溶液中重新暂停，在室温下孵育一到两小时。在孵化结束时，如所示，通过离心洗硫醇功能化纳米粒子，在洗涤之间通过超声波重新产生颗粒。对于抗体功能化抗叶酸受体纳米程序，在500微升的海信缓冲液中，用10倍PEG交联剂的PEG交叉链接反应200微克抗叶酸结合蛋白抗体。

30分钟后，通过将离心过滤器离心浓缩抗体，通过将过滤器倒置到新管中进行额外离心，恢复抗体。然后将硫醇功能化纳米颗粒与浓缩抗体混合，在室温下孵育混合物至少30分钟。为了形成非靶向纳米程序，将溶解在DMSO中的5毫克甲氧氧终止PEG 5000雄性添加到500微升的 HEPES 缓冲液中的硫醇功能化纳米颗粒中，在室温下至少孵育 30 分钟。

用于纳米喷头注射，可同时旋转两种纳米蛋白，并在 600 个皮摩尔浓度下将颗粒重新注入新鲜 MES 缓冲液中。混合纳米颗粒，将产生的溶液的一毫升装入一个一毫升注射器中，每只小鼠装有26粒针，内向每只小鼠的腹部注射整个体积。然后轻轻按摩腹部，将纳米粒子分布到腹腔中。

至少25分钟后，将安乐死注射动物的四肢固定到手术平台上，并使用锯齿状钳子和解剖器去除皮肤以暴露胸膜。将佩里托内姆化为一体。将腹膜瓣连接到平台，用至少 60 毫升 PBS 清洗腹腔内部。

然后将平台传输到具有直立光学配置和电动舞台的拉曼分光光度计，并在适当的成像参数下对腹部进行成像。这一点至关重要，拉曼扫描的焦平面位于大多数内脏的表面。如果器官出平面，获得的信号将没有用处。

出于质量控制目的，纳米粒子可以在合成过程中使用各种方法进行特性，包括透射电子显微镜、动态光散射、纳米粒子跟踪分析和超远可见吸收光谱。拉曼测量揭示了纳米粒子在合成过程中存在的独特光谱。典型的反应产量和浓度在很大程度上取决于洗涤步骤中的移液技术。

拉曼光谱可以处理以去除荧光，并规范化为单位区域，以补偿信号强度，然后再应用经典最少的正方形。虽然每个纳米诊断参考光谱上的经典最不平方分数不能单独提供肿瘤的特定位置，但点对点比率揭示了传播的微小扩散的存在。在尝试此过程时，重要的是要记住在合成的每个步骤中验证纳米粒子，因为纳米粒子的质量会强烈地影响最终结果。

这项技术展示了研究人员使用SERRS纳米蛋白检测动物模型中与肿瘤相关的标记物的潜力，并具有高度的微观精度切除患者组织。