亚克拉维安静脉穿刺作为大鼠血液样本采集的替代方法。全身麻醉后,将大鼠放在苏平位置,用75%乙醇对下层空间进行消毒。在穿刺前识别优越的尾骨。
找到穿刺点,在同一侧的锁骨外三分之一区域。针的方向被定位到优越的胸骨,应该几乎平行的锁骨,只是后到它。采集血液后,按穿刺位点一到两分钟,止血。
在动物实验中,总是需要收集足够量的血液。从大鼠尾静脉采集血液比一些攻击性方法(如复古轨道丛样本采集)更受欢迎,压力也更小。但是,此方法受成功率限制。
在这里,我们介绍我们的血液收集方法与所需的血液量从亚克拉维安静脉。结果表明,该方法安全实用,在尾静脉血液采样失败的情况下可考虑。首先,准备胶带、脱毛剂、75%乙醇、血液收集管、二点五毫升注射器、剃毛剂、电子秤、肝素和生理盐水。
家鼠在标准条件下,可免费获得食物和饮用水,被关在530平方厘米的笼子里,有木屑床上用品。穿刺前通过内刺注射诱导所有动物的全身麻醉。将大鼠放在超级位置,将后肢固定在舒适的位置,并固定与身体的上肢平行,就在树干旁边。
清洁隔光空间的两侧,以去除毛皮和任何可见的污垢。用 75% 乙醇擦拭颈部和胸皮,用纱布保持区域清洁干燥。亚克拉维安静脉的两侧都适合穿刺,在这里,我们选择右侧进行穿刺。
用操作员的左拇指确定右锁骨的位置和方向,用食指轻轻定位上司的胸骨。使用每毫升 10 个单位肝素溶液冲洗我们的注射器。找到穿刺点,指向右锁骨外三分之一区域五毫米的考达尔。
轻轻地将注射器移入穿刺点的皮肤。一旦针头进入下层皮肤,通过操作员的右手施加主动压力。针的方向定位在上司胸叶,应该几乎平行的锁骨,只是后背。
通常,通过在此方向插入针头约两毫米,可以到达亚克拉维安静脉。一旦针头进入静脉,血液就会在活动压力下进入注射器。然后保持活动压力,直到抽出适当的血液量。
采集血液后,取出穿刺针,然后按穿刺位点一到两分钟以止血。注意:压力必须非常温和,以防止窒息。将血液样本与EDTA一起转移到抗凝真空管中,并在1600G下离心10分钟收集血浆。
吸气的超级支架重新清洁管和储存在零下18摄氏度。为了比较熟练操作者与初学者的成功率,随机将20只SD大鼠分成两组。结果表明,通过右亚克拉维脉,技术组的9只大鼠和初学者组的8只大鼠分别成功。
然后从剩下的三只老鼠身上采集血液,成功地通过左侧。这两个群体的成功率没有显著差异。这两组的时间路线略有不同。
手术期间或手术后无严重并发症,如肺炎、血红素和出血。所有动物在血液取样后都幸存了下来。为了证明学习穿刺程序的困难,我们进一步比较了熟练组和初学者组之间的取款数量。
如表二所示,熟练群体的平均取款数量略低于初学者,但没有统计学意义。结果表明,亚克拉维安静脉穿刺在大鼠身上采集血液是安全可行的。这种方法是有价值的,特别是在需要大量血液的时候。
如果常规血液采样失败,此方法可能是最佳替代方案。