意识大鼠锁骨下静脉的重复血液采样

在药代动力学和毒代动力学研究中，我们需要在大鼠的特定时间点收集一定量的血液来检测药物暴露。本研究描述了一种从该协议中大鼠锁骨下静脉收集血液的简单有效的方法。该技术无需麻醉即可重复、及时且易于识别的采样，并通过重复样本采集获得高质量的血液。

您应该了解锁骨下静脉的解剖结构，有能力的大鼠约束和针尖。这种方法是有风险的，它需要一个合格的专业人员。首先，找到大鼠颈部和前肢之间的锁骨下三角窝的最低点。

向头部移动约两到三毫米，到达采血部位的针尖。使用电动剃须刀去除头发。为了保持大鼠的头部、颈部和乳房直立，用一只手抓住颈部后部的皮肤并暴露注射部位。

拉直注射部位一侧的前肢以保持其水平。用另一只手保持注射器与大鼠头部平行，并将注射器向外倾斜5至10度，使尖端向腹侧方向倾斜。将针头完全插入前腔。

拉回注射器以保持管子的负压。慢慢地将针从深移动到浅，然后沿着相同的路径返回。当血液进入注射器针头时，固定针头的位置。

根据大鼠的体重和健康状况，根据该机构的动物护理和使用委员会制定的标准监测要抽取的最大血量。在没有其他要求的情况下，不要在24小时内去除超过动物总血量的20%。收集到足够的血液样本后，立即取出注射器，并准备血液治疗。

对大鼠的注射部位加压一到两分钟以止血。由于收集部位位于颈部下部，因此请捏住锁骨下静脉的皮肤以通过按压来止血。从注射器中取出针头，然后将其丢弃在锋利的工具容器中。

慢慢地将血液从注射器转移到1.5毫升的管子中。将注射器按在墙上以避免形成气泡。合上微量离心管的盖子并轻轻轻弹。

将血液与抗凝剂彻底混合，将其倒置至少五次。在收集血浆后120分钟内，在室温下以2， 000 RCF离心全血样品10至15分钟。使用移液器枪将上部血浆转移到新鲜的微量离心管中。

不要用下部全血触摸移液器头。处理或重新离心被红细胞污染的血浆。从锁骨下静脉准确收集的血浆样本呈半透明淡黄色。

采血不当或操作不当导致溶血。在第一次采样期间，雄性动物的体重在268至297克之间，雌性约为214至239克。在最后一次采样期间，雄性动物的体重在376至462克之间，雌性约为254至300克。

毒代动力学采血之间有28天的间隔。动物体重每周稳步增加，临床观察正常。精确的针头插入方式和角度，可以保证采血顺畅，规避风险。

这个操作需要反复练习。