将γ-氨基丁酸 (GABA) 电泳到癫痫焦点中进行, 防止小鼠癫痫发作

我们的协议利用当地管理自然发生的抑制性神经递质GABA使用一个非常新颖的设备，它可以提出一个新的解决方案，在治疗癫痫发作。微嗜血离子泵使我们能够非常精确地控制我们运送药物的准确何时何地。精确的螺纹电泳输送可以修改，以针对其他神经系统疾病。

这种药物输送技术的另一个好处是，在药物输送出口有一个非常微不足道的压力增加，因为没有液体实际交付。相反，这只是药物分子本身。由于探头的近距离定位将构成最大的问题，因此在立体轴帧中使用虚拟探头测试其对齐角度和定位是非常可取的。

首先将麻醉小鼠的头部固定在立体轴框架中，并使用 30 量针在计划切口部位注射局部镇痛皮。五分钟后，用手术刀在头骨中切上一个中线切口。并使用细钳轻轻缩回皮肤。

用斗牛犬塞洛芬夹子夹住皮肤。并清洁外露的筋膜表面。使用带精细圆形 0.4 毫米钻头的牙科钻头，在小脑上方的头骨上钻一个洞，直到可以看到 dura。

将地面螺钉放入孔中，并使用精密螺丝刀转动螺钉，直到其到达小脑顶部。使用立体轴框，测量所需大脑区域的立体轴坐标，并使用钻头快速将头骨直径约一到两毫米的区域细化到目标区域，直到一个薄的、抛光良好的透明骨膜仍然存在。然后，使用定制的钩尖针去除杜拉，并将一滴盐水添加到生成的孔中。

对于多通道硅探头插入，将探头放在连接到磁性支架上的立体轴上，然后将臂放在立体轴框架旁边。将立体武器设置为轻微的 20 度前后角，为其他两个植入物的定位留下充足的空间。将探头连接到头台和接地螺钉。

使用微米精确的立体轴缓慢地将硅探针降入海马体，并启动记录软件记录电子神经元信号，同时将多通道硅探针从皮层顶部移动，直到达到目标多通道位置。然后，同时记录来自皮层和海马层的局部场位信号，在计算机屏幕上渗透，并使用记录局部场电位中海马形成的金字塔层的纹波活动作为目标区域的标记。对于微流体离子泵的加注，请将管连接到泵的入口，然后用 0.05 摩尔 GABA 溶液填充探头。

拆下管子，用石蜡膜包装关闭入口，确保微流体离子泵牢固地连接到支架上。将支架安装到微操纵臂上时，请小心，然后再将电气引线连接到源测量单元。使用立体轴以 20 度中侧角，在尽可能靠近探头的情况下，以轴向运动缓慢降低泵，直到泵从皮质表面到达多维通坐标负 1200 微米。

在准备癫痫发作诱导时，拆下 10 微升注射器的金属针轮毂，并在注射器尖端上固定硅酸盐微管。将轮毂放在微管尖端上，将注射器以 20 度横向中带角度放置。使用自动微注射泵将人工脑脊液中500至1000纳米的50毫摩尔全氨基丙氨酸装入注射器，将玻璃微管下到多索文体坐标位置。

将溶液的250纳米光注入大脑，并在软件中启动记录。然后，观看屏幕，等待第一个间向尖峰出现，然后在源和目标之间应用一个伏特 100 秒，在 30 个周期中关闭一秒，以提供 GABA 解决方案。植入物的精确定位有助于记录海马局部场位，诱导小海马癫痫发作，并在癫痫发作开始时提供GABA。

此外，植入物的定位可以通过后期组织学在每次实验后进行验证。在这里，一个例子，当癫痫发作样事件可以停止与GABA的交付由新的神经元探针，结合微流体探针。当四个氨基肽被注射到更大的区域或皮层的顶部时，癫痫发作变得普遍化，因此交付的GABA无法改变癫痫发作的程度。

值得注意的是，钠离子的输送对四种氨基苯丙胺诱导活性没有显著影响。因此，此协议可用于任何涉及植入多个易碎探头的立体税手术。在微流体离子泵的帮助下，可以引入带电分子中的其他物种，不仅用于治疗癫痫，而且治疗其他神经系统疾病。

组织连接中的电泳传递提供了一种将物种传递到任何软组织中的新方法。应用 4AP 时要特别小心，因为 4AP 是毒素，诱发癫痫。