模式触发的氧化爆裂和幼苗生长抑制测定在阿拉伯拉多普西斯塔利亚纳

这些测定可用于评估和比较不同植物基因型的免疫输出。这些技术的主要优点是，它们快速、可靠，并且使用通用的实验室设备。对于生长抑制测定，相同大小和年龄的幼苗应在称重前进行移植并完全擦干，以限制变异。

在发芽后四到五周，使用锋利的四毫米活检冲孔去除每阿拉伯植物的一片叶盘，避免中叶，并小心限制伤害。将圆盘收集到未使用的 96 孔发光计板的单个孔中，该孔每孔包含 100 微升双蒸馏水，一侧向上，以防止干燥。如果评估多个引出器，则从同一叶中取出第二个叶盘进行每个引出器处理，并盖上盖子，使叶盘在室温下过夜恢复。

第二天早上，将微孔板读取器参数设置为 1000 毫秒的集成时间，在 40 到 60 分钟的间隔内以捕获动态氧化爆发。接下来，使用多通道移液器，用100微升新鲜准备的反应溶液代替每井中的水，包括控制，每个基因型无引出反应，在没有引出的情况下评估基础反应氧种水平。然后，立即测量微孔板读卡器上可见光谱中所有波长的光发射。

在发芽后四天，用500微升MS介质装载48井板的每个井，并辅以引出肽的稀释。接下来，使用无菌钳子仔细移植六至八株大小、年龄和基因型的幼苗，以每株肽稀释，注意对幼苗没有损伤或根部破裂，且根部浸入中等中。当所有幼苗都镀上时，用微孔胶带密封板材，并在标准短日条件下放置植物8至12天。

要确定生长抑制百分比，请拍摄一张照片，直观地记录生长抑制，然后小心地从每一个井中去除幼苗。然后，在纸巾上擦根晾干，并在分析尺度上称量每个幼苗。在这个具有代表性的实验中，具有过度活跃免疫信号的突变植物表现出比野生型阿拉伯植物更高的累积和平均氧化爆发，而具有免疫信号受损的突变植物在浓度在10至1，000纳米摩尔时表现出减少氧化爆发。

在生长在100到1000纳米摩尔引出肽浓度的所有基因型之间，还可以发现幼苗生长抑制的预期差异。当生长在1000纳米摩尔肽稀释中时，具有过度活跃免疫信号的突变体明显小于在相同条件下生长的野生植物，而免疫信号受损的突变体相对于野生型植物表现出微弱的生长抑制作用。这些方法为早期和晚期免疫反应提供了证据。

其他几个技术，包括 MAP 激酶测定、病原体诱导基因表达和感染检测，可用于描述这些通路。这些技术已被修改用于大型屏幕，已成功识别病原体受体蛋白和其他几个信号成分。