直接注射内管理,改善小鼠肺内的选择性代理沉积

为了模拟小鼠的肺病，实验药剂通常通过腹内注射进行。然而，这种方法不能有选择地瞄准一个肺，而且肺之间的分布可能是不对称的。通过麻醉小鼠单个肺，我们可以单方面管理实验剂。

通过修改，这种方法可以双边使用，改善两个肺沉积的对称性。导管制备，包括抛光、轻微扬格和标记是成功的关键要素。当然，练习这种技术也是必要的。

演示这个程序的将是我实验室的专业研究助理廖素梅。在确认对手趾捏没有反应后，从悬覆缝合线上的切口上悬挂麻醉剂，8到10周大，C57-Black/6 鼠标以上挂缝合线。用两到三块挂钩将鼠标松散地固定起来，并环住磁带，避免通风限制，并打开发光二极管光纤照明器。

将操作员放在平台后面，将鼠标对台。将照明器的鹅颈定向到距离鼠标两到三厘米的距离，以便它通过皮肤照亮喉部区域。使用主导手的无菌钳子，将舌头从口腔中抽出。

使用非主要手和无菌抑制剂压平舌头根部，广泛暴露口咽。释放钳子后，使用主导手通过口腔将延长的导管插入气管。通过观察注射器中的气泡是否随每次呼吸上下移动来确认放置位置。

对于右肺的选择性侧杆，在切内插管后，旋转塑料板30度，并引导导管轮毂平行于小鼠中线到适当的重量深度，如表中所示。使用凝胶加载尖端，将 20 微升 0.3% Evans 蓝色染料送入导管，然后由玻璃滴管将 1 到 2 个 100 微升的空气等分。然后，取回导管，将鼠标保持30秒的位置，然后将动物放在加热毯上，进行监测，直到完全恢复。

对于左肺的选择性腰椎，在切内插管后，旋转塑料板零下74度，轻轻推进导管到左主管，同时将适度的压力向下90度向下，朝向书本。在左下肺段进行干燥后，旋转塑料板零下30度，并交付40微升0.3%的Evas蓝色染料与凝胶加载尖端。然后，通过玻璃滴管提供一到两个100至300微升的空气等等，并提取导管，让鼠标恢复，如证明。

对于右整个肺给药，在内切内插管后，旋转塑料板30度，并引导导管平行于小鼠中线，达到右侧近端腰椎间管的深。确认 tachypnea 标志的外观，并旋转鼠标零下 74 度，以便为代理交付提供重力辅助。将导管撤回到与右主管支气管起飞相对应的位置，并确保导管的斜面朝下。

将 30 微升 0.3% 的 Evans 蓝色染料送到右肺，然后向右肺提供 1 到 2 个 100 到 300 微升的空气等分。然后，收回导管，让鼠标恢复。对于左整个肺给氏，在血管内弯曲后，旋转塑料板减去74度，并轻轻地将导管推进到左主管支气管，同时向下和向书本施加适度的压力为90度。

确认无 tachypnea 符号，并旋转鼠标 86 度，以允许重力辅助代理管理。将导管提取到左侧主干支气管，然后旋转导管的斜面朝下。在左肺提供 30 微升 0.3% Evans 蓝色染料，并带凝胶加载尖端，然后提供 1 到 2 个 100 到 300 微升的空气等同。

然后，收回导管，让鼠标恢复，如证明。通过双边交付的菲特克-德斯特兰通过中腹内和对称的支气管内给方导致不对称的肺腹质 FITC 荧光与更大的相对浓度注意到在左肺。这表明，在切内给舍后，实验剂的不对称肺传递不是这些制剂不对称地呈现给每个主茎支气管的结果，而是由肺重量和质量的差异稀释了同等主茎的输送。

剂量调整的支气管内给药改善了肺腹体剂输送的对称性。然而，尽管这种修正，在右肺的不同叶内仍然观察到持续的异质性。在腹腔内出血霉素引起的纤维性肺损伤21天后，炎症主要观察在左肺，在右肺损伤较少。

相反，剂量调整的支气管内布洛霉素给药导致左肺损伤略有减少，右肺损伤增加，其中叶和上叶损伤明显。在整个肺内给普过程中，不要忘记提取导管，将导管的斜面朝下。