在小鼠小腿上应用一致的按摩样扰动，并监测由此产生的肌肉压力变化

我们的协议在系统和机制中非常有用。正确的信息显示了身体压力和按摩的效果。我们当地的循环完成系统要简单得多。

本地插入不需要常规方法。在膝关节延长且脚踝关节弯曲时，将手术胶带涂抹在支撑位置的双边后肢上。将一根铝线放在 L4-5 脊柱水平的后备箱上，将钢丝绕在后肢周围，螺旋的每个转弯之间有五毫米的间隙。

为了尽量减少从线路中逃逸的可能性，请手动调整导线配置，以在 90 度诱拐位置固定臀部关节。然后将鼠标返回到其家庭笼子与监控，直到完全恢复。测量肌肉内肌肉压力，将麻醉小鼠放在容易的位置，并剃须、脱毛和半消毒后小腿的皮肤。

使用手术刀在消毒的皮肤中做两毫米切口。在皮肤表面以 150 到 170 度的角度将 20 量表的内井针插入胃部肌肉。接下来，使用针头的塑料护套作为指导，在胃肌的中腹放置一个血压遥测传感器。

用 4-O 尼龙缝合线封闭皮肤。然后，使用几个不同的圆柱形单位重量对小腿肌肉应用局部圆柱形压缩一分钟。并使用适当的生物信号分析软件监测肌肉内压力。

对于局部周期性压缩治疗，麻醉小鼠脱离后肢接线。将动物放在容易的位置。调整后肢，使膝盖关节延长，脚踝关节与小腿朝上弯曲。

垂直移动一个圆柱形的重量单位，覆盖着一个缓冲垫，在小腿肌肉上以一赫兹，每天30分钟，每天7天。每次压缩后，在将动物返回到家笼之前，将鼠标后肢重新布线。在实验结束时，将后小腿表面脱皮，并做一个皮肤切口，使胃部肌肉与骨质肉骨分离。

在最佳的切割温度复合溶液中快速冻结收获的肌肉组织。并使用低温恒温器在玻璃滑梯上获取胃部肌肉的部分。用于免疫组织标记解冻和脱水部分在室温下空气干燥，然后使用疏水笔在每张幻灯片上的组织部分周围绘制一个环。

接下来，将幻灯片放在湿度室中。并在每侧添加 100 微升阻塞缓冲区。室温下30分钟后，用两次5分钟的PBS-T洗涤，然后用100微升的原抗体在室温下过夜地标记这些部分。

第二天早上，在PBS-T中清洗幻灯片3次，每次洗涤5分钟。并在室温下用适当的二次抗体标记样品1小时，防止光线。在孵化结束时，用新鲜的PBS-T清洗幻灯片3次，如所证明的。

在黑暗中用100微升DAPI染色3分钟。然后，再洗三次幻灯片。使用兼容的安装介质和盖板将样品安装。

对于组织形态分析，将幻灯片放在荧光显微镜的舞台上，并在适当的过滤器中以 20-X 的主观性查看样品。然后，在图像分析软件中测量每个真菌的横截面面积，并计算表示实验标记的细胞数。胃骨质纤维的横截面面积因后肢固定而显著减少。

此外，免疫荧光染色分析显示，在固定后肢的胃部肌肉组织中，表达MCP-1和TNF-alpha的细胞显著增加。同时，随着积极染色的F4/80细胞的增加，后肢固定似乎引发小腿肌肉萎缩，包括局部炎症反应，包括巨噬细胞积累。在通过改变圆柱形单位重量而测试的几种不同的局部周期性压缩幅度中，对应于50毫升汞肌肉间压力波的压缩，似乎最有效地缓解了肌纤维横截面面积的固定性诱发的减少，增加了胃细胞肌肉中的巨噬素积累。

66克局部周期性压缩，每天以1赫兹30分钟，为期7天，显著缓解观察到的胃细胞肌肉横截面面积的固定性减少。更多，局部周期性压缩部分缓和固定诱导三头肌肌肉收缩力下降。此外，局部周期性压缩可抑制F4/80阳性、TNF-alpha阳性和MCP-1一个阳性细胞在固定后肢的胃细胞肌肉组织中增加。

我们的方法将为患者肌肉增加和我们潜在的预防程序策略提供科学依据。老鼠发现缺乏身体活动是有限的。使用我们的系统，我们已经开始评估大多数患者缺乏机械师的病人在病人。

适度的本地工业方式做到这一点，使一个完美的固定诱导肌肉萎缩。