该协议意义重大，因为我们的冷冻解冻方法是一个合适的过程，用于准备生物相容水凝胶，用于生物医学、制药或化妆品应用。这种方法的主要优点是不使用化学交联剂，这可能会导致出生缺陷。此外，该方法采用的冻结条件控制水凝胶的最终属性，如度。
该方法可应用于水凝胶和其他应用。这确实用于治疗水污染。事实上，它可以用来生产聚合物珠子，用作水容器，用于新的培养。
完全均匀化其测量的聚合物溶液非常重要。否则，水凝胶将呈现开裂点。此外，您必须小心每个周期的冻结时间。
开始此程序，在室温下溶解0.2克甲酸和10毫升0.1摩尔醋酸，并连续机械搅拌过夜，以准备2%的甲酸溶液。第二天，溶解一克PVA和10毫升蒸馏水，在80摄氏度下搅拌一小时。使用磁力搅拌器在室温下混合等量的两种溶液，直到它们均匀。
将混合物倒在培养皿上。将样品留在大气压下两小时以脱气。将水凝胶冻结在零下4摄氏度、零下20摄氏度或零下80摄氏度，20小时和4个周期。
使用5个或6个冷冻周期，在零下80摄氏度下冷冻另一个水凝胶20小时。第三个冷冻周期后，用去维水清洗水凝胶。在上一个冻结周期结束时，在零下50摄氏度下将水凝胶冷冻干燥48小时，搅拌以进行进一步定性。
当准备好执行 FT-IR 表征时，在 ATR 模式下将一小块水凝胶放在 FT-IR 分光光度计中。以 FT-IR 光谱从 4000 波长到 600 波长。首先，从直径为 13 毫米、高度为 10 毫米的水凝胶中切出圆盘。
称重它们。在25摄氏度的消热中孵育盘中50毫升的去层水。每 30 分钟从介质中取出样品。
将样品中去除，以消除多余的水并称重。然后计算肿胀程度，并执行电子显微镜和孔隙不对称，如文本协议中概述。装货前，以每升15毫克的速度准备四升的迪氟尼酸溶液，并搅拌过夜。
通过UV-Vis光谱确认溶液的浓度。然后膨胀400毫克冷冻干水凝胶样品和6毫升蒸馏水24小时。对于装料，将烧瓶中装满 50 毫升的二氟化溶液，并保持在 25 摄氏度，并不断搅拌。
将每个膨胀的水凝胶淹没在烧瓶中。接下来，在不同时间对剩余的二氟化物溶液进行2毫升等分，以确定曲线的高原区域。24 小时后，用新鲜溶液更换溶液。
测量252纳米时每个等分物的吸光度，并使用二氟化物的校准曲线确定溶液中存在的二氟化物浓度。确定水凝胶中保留的二氟化物量和文本协议中概述的封装效率。然后在零下80摄氏度时将装载水凝胶冷冻，并在零下50摄氏度时冻干。
对于药物释放，在 pH 7.4 和 25 摄氏度下，将 300 毫克冷冻干燥的双氟尼萨尔装水凝胶和 50 毫升磷酸盐缓冲液淹没。保持不断搅拌。在不同的时间提取两毫升等分，并更换新鲜介质以保持恒定的体积。
根据校准曲线，在 252 纳米时以 252 纳米的光度确定二氟化物释放的分光度。在此之后，推导出文本协议中概述的水凝胶中的主要药物释放机制。在这里，CSPVA 水凝胶无需使用冷冻解冻方法进行交联剂的检测。
FT-IR 光谱显示两种聚合物的七个特征信号。所有 CSPVA 水凝胶都表现出高度多孔的表面，并且根据制备条件观察到显著的变化。在零下4摄氏度下准备的水凝胶是最大的毛孔。
在零下80摄氏度下制备的水凝胶似乎有一个多孔的网络，冻结周期的数量似乎促进更明确和圆形的孔隙。然而，在零下80摄氏度下用6个冷冻周期准备的水凝胶比在零下80摄氏度下准备的4个冷冻周期的水凝胶的渗透性要低，可能是由于其高侵权性，这反映在总入侵量较低。在肿胀行为中，水凝胶会迅速吸收大量的水，在20小时后保持10倍的重量，20小时后保持15倍的重量。
在观察温度效应时，可以看到在零下80摄氏度下用四个冷冻周期准备的水凝胶在头五个小时内的膨胀能力较小。冻结周期的数量不会在任何时间产生任何差异。在所有情况下，水凝胶的Diflunisal释放动力学保持约30小时，水凝胶在零下80摄氏度下准备了四个冷冻周期，释放量最高。
在零下80摄氏度下用四个冷冻周期准备的氢凝胶和在零下80摄氏度下用六个冷冻周期准备水凝胶的释放之间没有区别。尝试此过程时，要记住的最重要的事情是冻结条件。您必须从几乎三个冻结周期开始，才能获得一个已完成的、成形的水凝胶。
该方法可与细胞培养相结合，评价体外生物相容性。它也可以与降解研究相结合。在开发这些程序后，我们意识到，我们可以探索将其他聚合物加入混合物甚至天然化合物（如芦荟）的可能性。
这样做将允许我们将新的属性纳入这些材料。
