筑巢行为是评估野生型和转基因小鼠日常生活活动的有用方法。它特别有用,用于记录整个生命周期神经退化的认知衰退。这种技术是一个经济简单和优雅的评估,在小鼠的日常生活活动。
也可以在短时间内完成,培训最少。在我们的实验室中,我们建议用碎纸,因为纸张会产生更一致的结果。但是,可以进行试点研究,以确定哪些材料最适合您的目标和预算。
在单独的测试室中,设置环境条件,使它们在试验中保持一致,与住房室相同,并提供食物和水到笼子加水器。为每个鼠标分配一个随机标识号或字母。并在菌落记录中记录原始动物证和其他必要身份,以确保助理和畜牧工作人员对条件视而不见。
随机在试验室放置笼子,使野生型小鼠和转基因小鼠不会不当分离。并覆盖每个笼子的底部与100克干重的玉米棒床上用品的方形,扭曲,和切碎的纸试验。和 100 克软鳕子床上用品的软 cob 试验。
然后,在将鼠标引入笼子之前,将单个压棉方形、单纸扭曲、没有额外材料添加到软胶袋床上用品,或将 2.5 克干净切碎的白色打印机纸切成五到七厘米的条。在一天中,在光循环的开始,把装有老鼠的家笼带进测试室。将每只鼠标转移到其分配的嵌套笼中,将材料放入笼中。
当所有老鼠都放置后,将家里的笼子回到住房室,让老鼠在不受干扰地完成24小时的试验。在试验结束时,小心地取下每个笼子的盖子。当每只鼠标移离巢时,拍摄每个巢捕捉照片中分配的 ID,并最大限度地减少笼子外任何材料的外观。
当每个巢被拍摄时,轻轻地将每只老鼠转移到单独的临时保持架中。并护送床上用品和任何筑巢材料从每个笼子。然后,更换床上用品,按顺序提供下一个嵌套材料。
将鼠标返回到筑巢笼。当所有的试验都完成,把老鼠回到他们的家笼,观察老鼠是否有潜在的攻击行为。为了保持关联器之间的可靠性,为至少两个对研究视而不见的个人提供每个嵌套材料的基线图像。
并提供一系列样品巢,使记分员熟悉每种材料类型。给巢打分时,当碎纸或小方块仍然散落在笼子上,或者棉质方块或扭曲保持不变时,应分配一个分数。当某些材料构造成巢时,将分配 2 的分数,但超过 50% 的材料尚未用于嵌套构造。
在构造一个明显嵌套时分配分数为 3,但仍分散了几块。当几乎所有材料都用于嵌套,但几件材料仍然散开或位于嵌套附近时,将分配四分。当几乎所有材料都用于创建无法识别的嵌套时,将分配 5 的分数。
让得分手休息一下,重新访问基线照片,以避免疲劳和偏见在评分过程中,必要时。当所有保持架都得分后,输入分数并格式化为长格式的数据文件,以便动物分数在单独的列中。在这项对所有四种材料进行代表性分析时,野生型小鼠的巢质量得分高于APOE e4小鼠。
碎纸的质量比方形、床上用品或扭曲材料的等级要高得多。广场、床上用品和扭曲材料之间没有差异。此外,在Htau小鼠的实验中,5.5个月大的突变动物用碎纸筑巢,这些巢比那些按年龄建造的老鼠要差得多。
分数应该对实验条件保持盲目,并审查评分标准。由于结论是健全和有效的,还应评估评价者之间的信赖性。挖洞和循环轮运行是评估日常生活活动的另外两种常见方法。
它们可能有助于赞美筑巢行为。筑巢可以作为辅助评估,预测认知的可能下降,扩大行为评估的气息与莫里斯水迷宫和昼夜轮运行。