중첩 행동은 야생형 및 형질전환생쥐에 사는 일상생활의 활동을 평가하는 유용한 방법입니다. 그것은 수명 에 걸쳐 신경 변성에서 인지 감소를 문서화에 특히 유용. 이 기술분야는 쥐의 일상생활 활동의 경제적인 단순하고 우아한 평가이다.
또한 최소한의 훈련으로 짧은 기간에 수행 할 수 있습니다. 우리의 실험실에서 우리는 종이가 더 일관된 결과를 생성하기 때문에 파쇄 된 종이를 권장합니다. 그러나, 파일럿 연구는 목표와 예산을 가장 좋은 제품군을 결정하기 위해 수행 할 수 있습니다.
별도의 시험실에서 환경 조건을 설정하여 시험 전반에 걸쳐 일관성을 갖추고 하우징 룸과 동일하며 케이지 에 음식과 물을 제공합니다. 각 마우스에 임의 식별 번호 또는 문자를 할당합니다. 그리고 원래 동물 ID 및 기타 필요한 신분증을 식민지 기록에 기록하여 조수및 축산 직원이 조건에 눈이 멀게 되도록 하십시오.
야생형 및 형질전환마우스가 부적절하게 분리되지 않도록 시험실에서 케이지 배치를 임의로 주문한다. 그리고 각 케이지의 바닥을 사각형, 트위스트 및 파쇄 된 종이 시험을 위해 옥수수 침구의 100 그램의 마른 무게로 덮습니다. 그리고 부드러운 코브 시험을위한 부드러운 침대 침구 100 그램.
그런 다음 마우스를 케이지에 도입하기 직전에, 하나의 누른 면 사각형, 단일 종이 트위스트, 부드러운 침대 침구에 추가 재료 추가 없음 또는 2.5 그램의 깨끗한 파쇄 된 흰색 프린터 용지를 5 ~ 7 센티미터 스트립으로 자른다. 하루 중 동시에, 빛 주기의 시작에, 시험실에 마우스를 포함하는 홈 케이지를 가지고. 그리고 각 마우스를 케이지에 이미 있는 재질로 할당된 중첩 케이지로 옮킨다.
모든 마우스가 배치되면 홈 케이지를 하우징 룸으로 돌려 보내 쥐가 방해받지 않고 24 시간 동안 시험을 완료 할 수 있습니다. 시험이 끝나면 각 케이지의 뚜껑을 조심스럽게 제거합니다. 그리고 각 마우스가 둥지에서 이동했을 때 사진에 할당 된 ID를 캡처하고 케이지 외부의 모든 재료의 모양을 최소화하는 각 둥지를 촬영합니다.
각 둥지를 촬영하면 각 마우스를 개별 임시 케이지로 부드럽게 옮기십시오. 그리고 각 케이지에서 침구와 중첩 재료를 호위합니다. 그런 다음 침구를 교체하고 시퀀스에서 다음 중첩 재질을 제공합니다.
그리고 중첩 케이지에 마우스를 반환합니다. 모든 시험이 완료되면 마우스를 홈 케이지로 돌려 보내 잠재적인 공격적인 행동을 위해 마우스를 관찰하십시오. 재계 간 신뢰성을 유지하기 위해 각 중첩 물질에 대한 기준선 이미지를 연구에 블라인드로 두 명 이상 에게 제공합니다.
그리고 각 유형의 재료로 득점자를 익숙해지기 위해 일련의 샘플 둥지를 제공합니다. 둥지를 채점할 때, 파쇄된 종이나 작은 사각형이 케이지 전체에 흩어져 있거나 면 사각형이나 트위스트가 그대로 남아 있을 때 1점을 할당해야 합니다. 일부 재질이 둥지로 구성될 때 2개의 점수가 할당되지만 재료의 50% 이상이 둥지 구조에 사용되지 않습니다.
눈에 띄는 둥지가 생성될 때 3개의 점수가 할당되지만 여러 조각은 여전히 흩어져 있습니다. 거의 모든 재질이 둥지에 사용될 때 4개의 점수가 할당되지만 몇 조각의 재료가 흩어져 있거나 둥지 근처에 있습니다. 거의 모든 재질을 사용하여 식별할 수 없는 둥지를 만들 때 5개의 점수가 할당됩니다.
득점선수가 휴식을 취하고 필요에 따라 득점 절차 중 피로와 편견을 피하기 위해 기준사진을 다시 방문하십시오. 모든 케이지가 점수가 매겨지면 점수를 입력하고 데이터 파일을 긴 형식으로 포맷하여 동물 점수가 별도의 열에 있습니다. 이 대표적인 분석에서 제공된 4개의 물질에 걸쳐, 야생형 마우스는 APOE e4 마우스에 비해 둥지 품질에 더 높은 점수를 매겨.
파쇄 된 종이가 품질이 현저히 높은 다음 사각형, 침구 또는 비틀기 재료로 평가됩니다. 사각형, 침구 및 비틀림 재료 사이에 차이가 관찰되지 않습니다. 또한, htau 마우스를 가진 이 실험에서, 5.5 달 된 돌연변이 동물은 그들의 나이에 의해 생성된 그 다음 그들의 나이에 의해 생성된 그 때 야생형 대조를 현저하게 최악이었다 파쇄된 종이에서 둥지를 만듭니다.
점수는 실험 조건에 장님을 유지하고 점수 기준을 검토해야 합니다. 건전하고 타당한 결론으로 인터 및 내 평가자 리플러도 평가되어야 합니다. 잠복과 Circadian 휠 실행은 일상 생활의 활동을 평가하는 두 가지 다른 일반적인 방법입니다.
그리고 그들은 중첩 행동을 칭찬하는 역할을 할 수 있습니다. 중첩은 인식의 가능한 감소를 예측하는 보조 평가로 사용할 수 있습니다, 모리스 물 미로및 circadian 휠 실행과 함께 행동 평가의 호흡을 확대.
