通过模拟大鼠肝脏移植模型的血动力学变化,器官缺血-输液损伤。缺血性输液损伤是肝移植后常见的应用。肝外器官介入的患者往往在医院停留的时间更长,花费更多,预后更差。
并发症的发展与肝移植的肝移植阶段的长度密切相关。然而,对肝移植后缺血性输液损伤的基础研究表明,肝移植后的存活率与触觉外器官的损伤程度成反比。基于触觉相的定义,我们模拟了肝移植的造血性变化,导致触觉外器官缺血-再输液损伤。
本文详细介绍了如何构建大鼠触觉阶段动物模型,对肝移植后缺血-输液损伤进行基础研究。袁博士负责所有视频动物操作。两个眼钳,直和弯曲,和眼间透镜,IOL钳子,眼科剪刀,一到两个缩回器,棉签,3-0手术缝合,iodoform纱布,缝合针,生物系统,必要时,和眼间透镜,IOL钳子用于分离血管,因为圆头。
动物麻醉机、除水机、嵌入机、病理切片机、 冷冻机、组织切片机、空气干燥炉、神经光学显微镜、扫描仪、一般麻醉的苯丙胺、4%甲醛溶液、任何水性乙醇、二甲苯、高效石蜡、羟基苯丙胺染料溶液、盐酸、氨、滑动、盖玻璃、中性胶和垂死试剂以及消耗材料。移液器,离心机,自动生化分析仪,阿兰氨基转移酶,ALT套件,阿斯巴酸盐,氨基转移酶,AST套件,肌氨酸套件。称量后,大鼠被动物麻醉机用异氟化物麻醉。
腹部消毒后,使用钳子和剪刀在xiphoid工艺下方三厘米处切口中位数。打开腹腔,使用缩管暴露肝脏,并调动肝胃韧带。使用棉签轻轻翻转肝脏的中叶,并向上转动以暴露端口习惯。
识别胆管、入口静脉和肝动脉。使用棉交换将小肠向左下腹腔推,将劣质静脉卡瓦移到右肾静脉,用眼内透镜(IOL)将入口静脉、肝动脉和右肾静脉上方的劣质静脉卡瓦隔离,用3-0丝线标记,每个带滑结。切开左下肢的皮肤,用眼钳露出股骨静脉。
慢慢地通过股骨静脉注射低分子量肝素625 IU/kg,使整个身体肝素化。用 3 - 0 号缝合的右肾静脉上方的入口静脉、肝动脉和劣质静脉卡瓦, 持续 45 分钟。更换腹腔中的小肠,用纱布盖住。
在此期间,吸入麻醉减少。45分钟后,释放入口静脉、肝动脉和右肾静脉上方的劣质静脉卡瓦。一层一层地缝合肌肉和皮肤,终止吸入麻醉。
每四小时使用5毫克/千克的皮下吗啡提供术后镇痛观察大鼠直到清醒,并在25加零下2摄氏度的温度下保持喂养,需要50加或负10%的湿度动物加热灯。在这个动物模型中,大鼠根据缺血随机分为五组15分钟,I 15组,30分钟,I 30组,45分钟,I 45组,60分钟,I 60,和假组,每组10只老鼠。手术后14天观察了每组的存活率。
所有的老鼠都活在I15,我30和假组。在I 45组中,有8人存活了14天,在I 60组中只有两人幸存下来。结果表明,大鼠最多能承受45分钟的肝相。
在实验中,生物系统用于记录心率和血压的变化,右内胡萝卜动脉在肝相前后。我们发现,心率和平均动脉压力,大鼠的MAP,在血管结结后发生了巨大的变化。韧带后,肠道的肝缺血、充血和水肿、胃变和脾脏明显。
80只大鼠被随机分成8组,包括缺血45分钟、T0、输液6小时、T6、12小时、T12、24小时、T24、48小时、T48、72小时、T72、7天、T7、14天、T14。在老鼠被牺牲后,肾脏、胰腺、小肠、心脏和肺组织被取走并沾染了 HE。除了心脏,病理学分数分别根据参考给出。
结果表明,肝外器官最大损伤的时间各不相同。胰腺手术后6至24小时,肺部手术24至48小时。肠道和肾脏在缺血45分钟后受了重伤。
手术后24小时肠道粘膜没有明显异常,肾脏在48小时后恢复。至于心脏,随着输液后时间的流逝,局部心肌细胞嗜睡、细胞分裂和溶解、炎症细胞渗透、局部血管增生和充血在手术后24至48小时内被发现在组织内。血清被收集,通过自动生化分析仪检测到ALT、AST、肌氨酸和淀粉酶的水平。
所有指标在24至48小时内达到峰值,与病理变化不同。虽然手术后48小时水平基本正常,但病理损伤仍在继续。综上所述,大鼠的模型简单易用,无需显微外科,为肝缺血后肝外器官缺血-输液损伤的基础研究提供了依据。