쥐 간 이식 모델에서 혈역학적 변화를 시뮬레이션하 여 장기 허혈-재관류 손상. 허혈 -재관 류 손상은 간 이식 후 일반적인 응용 프로그램입니다. 간 장기 에 관여하는 환자는 병원에서 더 오래 머물고, 더 많은 지출을하며, 더 나쁜 예후를 가지고 있습니다.
합병증의 발달은 간 이식의 간 단계의 길이와 밀접한 관련이 있습니다. 그러나 간 이식 후 허혈-재관류 손상에 대한 기본 연구는 간 이식 후 생존율이 외래 기관에 대한 부상 정도와 반비례한다는 것을 보여주었습니다. anhaptic 단계의 정의에 따라, 우리는 외합 기관의 허혈 재관전 손상의 결과로 간 이식에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션했습니다.
이 논문은 쥐의 anhaptic 단계의 동물 모델을 구축하는 방법에 대한 자세한 설명을 제공하는 것입니다, 간 이식 후 허혈 - 재관류 부상에 대한 기본 연구. 위안 박사는 모든 비디오 동물 작전을 담당합니다. 두 개의 안과 집게, 직선 및 굽힘, 그리고 인터큘러 렌즈, IOL 집게, 안과 가위, 1 ~ 2 개의 re트랙터, 면봉, 3-0 수술 봉합사, 요오도폼 거즈, 봉합 바늘, 생물 시스템, 필요한 경우 생물 시스템, 및 간관 렌즈, IOL 포스프는 둥근 때문에 혈관을 분리하는 데 사용됩니다.
동물 마취 기계, 물을 해제 기계, 임베드 머신, 병리학 슬라이서, 냉동 기계, 티슈 슬라이서, 공기 건조 오븐, 신경 광학 현미경, 스캐너, 일반 마취를위한 엔플루란, 4 % 파라 포름 알데히드 용액, 어떤 하이드로 우스 에탄올, 자일렌, 고효율 파라핀 왁스, 헤마톡시린 - 에오신 염료 용액, 헤마톡시린 - 에신 염료 용액, 헤마톡시린 - 에신 염료 액용, 암염, 암혈, 암석, 미천성, 미천성, 검소, 검소성, 검소한, 검소성, 검소한 재검, 검소한 재검 파이펫, 원심분리기, 자동 생화학 분석기, 알라닌 아미노 트랜스포마이징, ALT 키트, 아스파르타트, 아미노 트랜스포마이저, AST 키트, 크레아티닌 키트. 계량 후, 쥐는 동물 마취 기계에 의해 이소플루란으로 마취됩니다.
복부 소독에 따라, 집게와 가위를 사용하여 xiphoid 프로세스 의 3 센티미터 의 중앙 분리를 합니다. 복강을 열고, 리트랙터를 사용하여 간을 노출하고 간위 인대를 동원합니다. 면 봉면을 사용하여 간 의 중간 엽을 부드럽게 뒤집고 위로 돌려 포르타 습관을 노출시하십시오.
담관, 포탈 정맥 및 간 동맥을 식별합니다. 작은 내장을 면 교환을 사용하여 왼쪽 하복선쪽으로 밀어 오른쪽 신장 정맥으로 열등한 베나 카바를 이동하고, 포탈 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥 위에 오른쪽 신장 정맥 위에 열등한 정맥을 분리하고, 3-0 실크 실로 표시된 포스프가 각각 미끄럼 틀로 표시되어 있습니다. 왼쪽과 오른쪽 하반신의 피부를 잘라 안과 포셉을 사용하여 대퇴 정맥을 노출.
대퇴 정맥을 통해 저분자 헤파린 625 IU/kg을 천천히 주입하여 전신을 헤패린시합니다. 포탈 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥 위에 3-0 봉합사가 있는 열등한 정맥을 45분 동안 지속합니다. 복강내의 소장을 교체하고 거즈로 덮습니다.
흡입 마취는 이 기간 도중 감소됩니다. 45분 후, 오른쪽 신장 정맥 위에 포문 정맥, 간 동맥 및 열등한 정맥을 방출한다. 근육과 피부 층을 층별로 봉합하고 흡입 마취를 종료합니다.
수술 후 항생증을 제공 5 mg/kg 4 시간 마다 깨어 때까지 쥐를 관찰 하 고 25 플러스 또는 영하 2도의 온도에서 공급 유지 하 고 습도 50 플러스 또는 영하 10% 동물 가열 램프필요 하다. 이 동물 모델에서, 쥐는 15분 동안 허혈에 따라 무작위로 5개의 그룹으로 나뉘었고, 나는 15군, 30분, 30분, 45분, 나는 45그룹, 60분, I 60, 그리고 각 군에서 10마리의 쥐를 가진 샴그룹으로 나뉘었다. 각 집단의 생존율은 수술 후 14일 후에 관찰되었다.
모든 쥐는 I 15, I 30 및 가짜 그룹에서 살아남았습니다. I 45 그룹에서 14일 동안 8명이 살아남았고 I 60 그룹에서 단 2명만이 살아남았습니다. 결과는 쥐가 45 분 동안 ancc 단계를 용인 할 수 있음을 제안했다.
실험 도중, Biosystems는 심박수 및 혈압의 변경을 기록하기 위하여 이용되었습니다, anc 단계 전후에 오른쪽 내부 경동맥 삽관. 우리는 심박수와 평균 동맥 압력, 쥐의 MAP, 혈관 결찰 후에 극적으로 변경된다는 것을 것을을 발견했습니다. 결찰 후, 대장 내의 간 허혈, 혼잡 및 부종, 위 변이 및 비장이 분명했습니다.
80마리의 쥐는 각각 45분 동안 허혈, T0, 재관전, T6, 12시간, T12, 24시간, T24, 48시간, T48, 72시간, T72, 7일, T7, T7, T7을 포함한 8개의 그룹으로 무작위로 분할되었다. 신장, 췌장, 소장, 심장 및 폐 조직은 쥐를 희생 한 후 HE와 함께 촬영및 얼룩졌다. 심장을 제외하고, 병리학 점수는 각각 참조에 따라 주어졌다.
결과는 엑스트라 간 기관의 최대 상해의 시간이 다양했다는 것을 보여주었습니다. 췌장에 대한 수술 후 6~24시간, 폐는 24~48시간이었다. 장과 신장은 허혈의 45 분 후에 가장 심각하게 부상했습니다.
장 점막의 명백한 이상이 없었다 24 수술 후 시간 신장은 48 시간 후에 회복. 심장은, 재혈 후 시간의 경과와 함께, 국소 심근 세포 나르코시스, 세포 단편화 및 용해, 염증 세포 침투 및 국소 혈관 확장 및 혼잡은 수술 후 24~48시간 까지 조직에서 발견되었다. 혈청을 수집하고 ALT, AST, 크레아티닌 및 아밀라제의 수준은 자동 생화학 분석기에 의해 검출되었다.
모든 지표는 병리학적 변화와 달리 24~48시간 으로 정점을 찍었습니다. 수준은 기본적으로 정상48 수술 후 시간, 병리학적 손상은 여전히 계속되었다. 요약하면, 쥐의 모델은 미세 수술없이 간단하고 사용하기 쉽고 간 허혈 후 엑스트라 간 기관의 허혈 - 재관류 손상의 근본적인 연구에 기초를 제공합니다.