右心室比左心室对缺血的抵抗力更强。我们引入了一种生成右心室感染模型的技术,该模型可以阐明右心室梗死发展过程中的病理生理机制。我们通过血管成本计算定位右冠状动脉,并定义了结扎区域,这对于成功生成小鼠右心室梗死模型至关重要。
演示该程序的将是来自我实验室的典型医生Linhai Ruo。将鼠标仰卧在垫子上,并通过没有脚趾退缩反应来确保麻醉深度。用缝合线固定其门牙,并用胶带固定四肢。
用脱毛膏从脖子到xiphoid去除毛发。用镊子轻轻拉出舌头,用压舌器抬起下颌骨以露出声门。通过将22号套管插入声门进行气管插管。
将心电图电极正确连接到小鼠四肢,并记录心电图。要打开胸部,在皮肤上做一个一厘米长的切口,用眼科剪刀与第三根右肋平行。再次确定第三肋间隙,并根据胸骨角度确保足够的空间。
在第三肋间隙上方用剪刀和微镊子分离并切割胸大肌和胸小肌。之后,用肘部镊子钝地分离肋间肌肉以暴露手术场,然后切开心包。用无菌棉抬起右心房,用无菌8-0连接右冠状动脉尼龙线,连接范围为三至五毫米。
锁住右冠状动脉后,注意监测心电图导联 3,显示 ST 段抬高。用无菌的5-0尼龙线去除棉花并缝合肌肉和皮肤。然后将鼠标放在加热垫上以促进恢复。
将小鼠置于超声平台上的仰卧位,以进行动物固定和超声操作。将其爪子用胶带粘在电极上,通过连接到超声波机器的系统获得ECG记录。用脱毛膏从小鼠胸部取下毛发,并将超声波凝胶涂抹在胸部皮肤上。
将平台设置为水平位置。将换能器平行于左腿定向,并获得左心室长轴图像。顺时针旋转探针90度,以获得左心室短通视图。
按电影商店按钮保存图像。在最低点倾斜平台的左上角。垂直向下移动探头,在B模式下保持其上腹部和鼠标隔膜下方的位置。
通过旋转其 X 轴和 Y 轴来稍微调整平台位置,直到屏幕上看到右心室、右心房、左心房和左心室。并通过按电影商店或帧按钮保存图像。按 M 模式。
两条X指示线出现后,将指示线定位在三尖瓣孔口处,得到三尖瓣年平面的运动。再次按 M 模式。按电影商店或帧商店按钮保存数据和图像。
在最低点倾斜平台的左侧。将探头沿右前腋窝线以与水平轴成 30 度角放置。旋转平台的 X 轴和 Y 轴以显示右心室。
按下M模式按钮并将指示线定位在室间隔高回声点,以获得右心室界面的M模式图像。再次按下 M 模式按钮。按电影商店按钮保存图片。
进行气管插管并设置动物呼吸机的参数。在剑突上方的皮肤上做一个一厘米的双侧切口,并用眼科剪刀横切隔隔膜和肋骨,露出心脏。用 32 号针刺穿右心室游离壁。
取出针头,用棉花按压伤口以止血。通过穿刺部位将导管的尖端插入右心室,然后缓慢地向前推导管。调整尖端的位置以获得典型的RV压力波形,显示在监视器和记录系统上。
稳定10分钟后,记录房车收缩压、右心室舒张压和右心室最大压下降率的数据。单击选择按钮以选择要计算的心脏周期。然后单击分析按钮以计算所选周期的平均值。
将动物仰卧在垫子上并插管以进行人工通气。用手术剪刀打开胸部,露出心脏。在右心房用眼科剪刀做一个三毫米的缺口,并用注射器通过心脏顶点向心脏注入5mL生理盐水。
用主动脉夹阻断主动脉的血液。并灌注0.1mL 1mg / mL硝酸甘油,用注射器通过心脏顶点扩张冠状动脉。用1mL投射试剂通过心脏顶点灌注心脏,等待两到三个小时。
用50%氢氧化钠侵蚀心脏两到三天。并通过用生理盐水冲洗来去除肌肉组织或结缔组织。RCA 结扎术后,心电图导联 3 可见 ST 段抬高。
2, 3, 5-三苯基四唑盐染色显示,术后24 h,梗死面积占房室游离壁的45%。超声心动图显示,舒张末期的RV内维增加,在RV1中增加。在Sham组中,这是两次以上的。
RVI中RV分数缩短,RV射血分数和三尖环平面收缩偏移显着较小。左心室面积比增加约50%RV血流动力学测量表明,在RVI组中,右心室收缩压、右心室压力的最大和最小上升速率、右心室收缩力均显著较小。右心室和舒张压以及RV松弛指数的指数时间常数比Sham组显着得多。
在梗死区域可见房车动脉瘤。RVI组的心重与体重比和心重与胫骨长度比略大。Masson染色表明RV游离壁有明显的纤维化。
很少,纤维化发生在RVI组的隔膜中。相比之下,少数幸存的心肌细胞位于梗死区域。至关重要的是,要暴露结扎区域并掌握插入针的深度和范围,以提高成功率和存活率。