Rechtsventrikulär ist resistenter gegen Ischämie als der linke. Wir haben eine Technik zur Generierung eines rechtsventrikulären Infektionsmodells eingeführt, das den pathophysiologischen Mechanismus während der Entwicklung eines rechtsventrikulären Infarkts klären kann. Wir lokalisierten die richtige Koronararterie durch vaskuläre Kostenrechnung und definierten den Ligationsbereich, der für die erfolgreiche Generierung eines rechtsventrikulären Infarktmodells der Maus entscheidend ist.
Linhai Ruo, ein Posterdoktor aus meinem Labor, wird das Verfahren demonstrieren. Legen Sie die Maus in Rückenlage auf ein Pad und stellen Sie die Tiefe der Anästhesie sicher, indem Sie keine Zehenentzugsreaktion haben. Befestigen Sie die Schneidezähne mit einer Naht und immobilisieren Sie die Gliedmaßen mit Klebeband.
Entfernen Sie die Haare vom Hals bis xiphoid mit einer Enthaarungscreme. Ziehen Sie die Zunge leicht mit einer Pinzette heraus, heben Sie den Unterkiefer mit einem Zungendrücker an, um die Glottis freizulegen. Und führen Sie eine intratracheale Intubation durch, indem Sie eine 22-Gauge-Kanüle in die Glottis einführen.
Schließen Sie die Elektrokardiographie-Elektroden korrekt an die Gliedmaßen der Maus an und zeichnen Sie das EKG auf. Um die Brust zu öffnen, machen Sie einen einen Zentimeter langen Schnitt in der Haut, parallel zur dritten rechten Rippe mit Augenschere. Bestimmen Sie den dritten Interkostalraum erneut und sorgen Sie für ausreichend Platz entsprechend dem Brustbeinwinkel.
Trennen und schneiden Sie die Muskeln pectoralis major und pectoralis minor mit einer Schere und einer Mikrozange über dem dritten Interkostalraum ab. Danach trennen Sie den Interkostalmuskel stumpf mit einer Ellenbogenzange, um das Operationsfeld freizulegen, und schneiden Sie dann das Perikard ein. Heben Sie das richtige Atrium mit steriler Baumwolle an und ligrieren Sie die richtige Koronararterie mit einem sterilen 8-0 Nylonfaden mit einem Ligaturbereich von drei bis fünf Millimetern.
Beachten Sie nach dem Ligatieren der rechten Koronararterie den Überwachungs-EKG-Vorsprung 3, der die ST-Segment-Elevation anzeigt. Entfernen Sie die Baumwoll- und Nahtmuskeln und die Haut mit einem sterilen 5-0 Nylonfaden. Legen Sie dann die Maus auf das Heizkissen, um die Erholung zu fördern.
Stellen Sie die Maus in Rückenlage auf einer Ultraschallplattform für Tierfixierung und Ultraschalloperation. Kleben Sie seine Krallen an die Elektrode, um eine EKG-Aufzeichnung über ein an die Ultraschallmaschine angeschlossenes System zu erhalten. Entfernen Sie die Haare von der Brust der Maus mit einer Enthaarungscreme und tragen Sie Ultraschallgel auf die Haut der Brust auf.
Stellen Sie die Plattform auf die horizontale Position ein. Richten Sie den Wandler parallel zum linken Bein aus und erhalten Sie das Bild der linken ventrikulären langen Achse. Drehen Sie die Sonde um 90 Grad im Uhrzeigersinn, um die kurze Zugangsansicht des linken Ventrikels zu erhalten.
Drücken Sie die Cine-Store-Taste, um die Bilder zu speichern. Neigen Sie die obere linke Seite der Plattform am tiefsten Punkt. Bewegen Sie den Wandler vertikal nach unten und behalten Sie seine Position über dem Oberbauch und unterhalb des Zwerchfells der Maus im B-Modus bei.
Passen Sie die Plattformposition leicht an, indem Sie die X- und Y-Achse drehen, bis der rechte Ventrikel, der rechte Vorhof, der linke Vorhof und der linke Ventrikel auf dem Bildschirm zu sehen sind. Und speichern Sie das Bild, indem Sie den Cine-Store oder die Rahmentaste drücken. Drücken Sie M-Mode.
Nachdem die beiden X-Indikatorlinien angezeigt wurden, finden Sie die Indikatorlinie an der Trikuspidalklappenöffnung, um die Bewegung der Trikuspidalebene zu erhalten. Drücken Sie erneut den M-Modus. Drücken Sie die Taste cine store oder frame store, um Daten und Bilder zu speichern.
Neigen Sie die linke Seite der Plattform am tiefsten Punkt. Platzieren Sie die Sonde in einem Winkel von 30 Grad zur horizontalen Achse entlang der rechten vorderen Achsellinie. Drehen Sie die X- und Y-Achse der Plattform, um den rechten Ventrikel anzuzeigen.
Drücken Sie die M-Mode-Taste und positionieren Sie die Anzeigelinie am Hyperechopunkt des Septums, um das M-Mode-Bild der rechten Ventrikelschnittstelle zu erhalten. Drücken Sie erneut die M-Mode-Taste. Drücken Sie die Cine-Store-Taste, um das Bild zu speichern.
Führen Sie eine Trachealintubation durch und stellen Sie den Parameter des tierischen Beatmungsgeräts ein. Machen Sie einen einen Zentimeter bilateralen Schnitt auf der Haut oberhalb des Xiphoidprozesses und transektieren Sie das Zwerchfell und die Rippe mit einer Augenschere, um das Herz freizulegen. Durchstechen Sie die rechte ventrikuläre freie Wand mit einer 32-Gauge-Nadel.
Entfernen Sie die Nadel und drücken Sie die Wunde mit Baumwolle, um Blutungen zu stillen. Führen Sie die Spitze des Katheters durch die Durchstichstelle in den rechten Ventrikel ein und drücken Sie den Katheter langsam nach vorne. Stellen Sie die Position der Spitze ein, um eine typische RV-Druckwellenform zu erhalten, die auf einem Monitor und einem Aufzeichnungssystem angezeigt wird.
Zeichnen Sie nach 10 Minuten Stabilisierung die Daten des systolischen RV-Blutdrucks, des RV- und diastolischen Drucks sowie des maximalen Rechtsventrikeldrucks des RV auf, der abnimmt. Klicken Sie auf die Schaltfläche Auswählen, um Herzzyklen für die Berechnung auszuwählen. Klicken Sie dann auf die analysierte Schaltfläche, um die Mittelwerte der ausgewählten Zyklen zu berechnen.
Legen Sie das Tier in Rückenlage auf das Pad und intubieren Sie es zur künstlichen Belüftung. Öffnen Sie die Brust mit einer chirurgischen Schere und legen Sie das Herz frei. Machen Sie eine Drei-Millimeter-Kerbe mit einer Augenschere an den rechten Vorhöfen und durchbluten Sie das Herz mit 5 ml normaler Kochsalzlösung durch die Herzspitze mit einem Injektor.
Blockieren Sie das Blut aus der Aorta mit einer Aortenklemme. Und perfusionieren Sie 0,1 ml 1 mg / ml Nitroglycerin durch die Herzspitze mit einem Injektor, um die Koronararterie zu erweitern. Durchbluten Sie das Herz mit einem 1 ml gegossenen Reagenz durch die Herzspitze und warten Sie zwei bis drei Stunden.
Erodieren Sie das Herz mit 50% Natriumhydroxid für zwei bis drei Tage. Und entfernen Sie das Muskelgewebe oder Bindegewebe, indem Sie es mit normaler Kochsalzlösung spülen. Nach der RCA-Ligatur wurde eine ST-Segment-Erhöhung in Blei 3 des EKG beobachtet.
2, 3, 5-Triphenyltetrazoliumchlorid-Färbungen zeigten, dass der Infarktbereich 24 Stunden postoperativ 45% der RV-freien Wand ausmacht. Die Echokardiographie zeigte, dass die innere Dimension des RV am Ende der Diastole im RV1 zunahm. Und es war mehr als zwei Mal in der Sham-Gruppe.
RV-Fraktionsverkürzung, RV-Ejektionsfraktion und trikuspidale ringförmige systolische Exkursion waren im RVI signifikant geringer. Das Verhältnis von RV zu LV-Fläche stieg um etwa 50%Die hämodynamische Messung zeigte, dass in der RVI-Gruppe der rechtsventrikuläre systolische Blutdruck, die maximale und minimale Anstiegsrate des RV-Drucks, die RV-Kontraktilität, signifikant geringer waren. Der rechtsventrikuläre und diastolische Druck und die exponentielle Zeitkonstante des RV-Relaxationsindex waren wesentlich signifikanter als die in der Sham-Gruppe.
Ein RV-Aneurysma war im Infarktbereich sichtbar. Das Verhältnis von Herzgewicht zu Körpergewicht und Herzgewicht zu Tibialänge in der RVI-Gruppe war etwas größer. Masson-Färbungen deuteten auf eine signifikante Fibrose in der RV-freien Wand hin.
Und selten trat Fibrose im Septum der RVI-Gruppe auf. Im Gegensatz dazu befanden sich einige überlebende Kardiomyozyten im Infarktbereich. Es ist wichtig, den Ligaturbereich freizulegen und die Tiefe der eingeführten Nadel und die Reichweite zu erfassen, um den Erfolg und die Überlebensraten zu erhöhen.
