全世界超过一半的心力衰竭病例被归类为射血分数保留的心力衰竭或HFpEF。该视频介绍了对 HFpEF 迷你猪进行建模的分步统计程序以及用于评估心脏功能的超声心动图技术。该模型具有单个诱发过滤器。
有主动脉收缩,诱发压力超负荷。因此,该模型有助于研究某种类型的HFpEF。除了手术计划的手术技术外,动物质量控制和术后动物护理也是关键步骤。
生化测试和心电图有助于监测动物的健康状况以及其结构和功能的变化。李晓晖,临床心脏外科医生。谭伟江,训练有素的动物外科医生。
Xiang Li,一名训练有素的麻醉师。陈爽,训练有素的手术室护士。训练有素的手术室护士陈宏华(Honghua Chen)将演示该程序。
在手术前 14 天开始使动物适应设施。准备手术室和设备。约束并将迷你猪置于手术台上的右侧侧卧位置。
打开加热系统以保持动物的体温。进行超声心动图检查并采集两毫升血样。以每公斤潮气量 8 毫升和每分钟 30 次呼吸开始通气。
使用来自耳静脉的外周静脉导管建立静脉插管。然后将动物连接到兽医监视器。剃掉左胸区域。
使用0.7%碘和75%酒精对从肩胛骨到横膈膜的皮肤进行无菌准备。将无菌窗帘放在手术区域。沿第四肋间隙标记一个约 15 厘米长的切口。
然后用电烙术做皮肤切口。使用烧灼术和肌肉和结缔组织的钝性解剖相结合打开胸部。使用肋骨牵开器展开肋骨。
定位胸降主动脉段并确定收缩部位,并使用两个三 OTT 手术缝合线绕该段两次。设置压力测量单位。为了确定收缩程度,逐渐收紧降主动脉段周围的手术缝合线,以达到所需的收缩程度。
让压力读数稳定 20 分钟并永久收紧手术结。使用胸腔引流管排出胸腔内的空气和多余的液体。监测动物是否存在眨眼和肢体运动。
断开呼吸机,但离开气管插管并监测是否存在自主呼吸。将动物放在带有帆布盖的移动约束装置中。剃掉动物的左胸。
将手指放在胸部的左中央,感受脉搏。将超声波凝胶涂抹在周围区域。将超声系统的相控阵换能器放在第三肋间隙。
将换能器向前或向后移动并调整缺口角度。识别心房、心室和主动脉,并记录 B 模式和 M 模式胸骨周长轴图像。接下来,在胸骨旁短轴视图中,识别室间隔、左心室后壁和肌,并记录 B 模式和 M 模式图像。
使用超声系统制造商提供的工作站来评估心脏结构和功能。心脏结构和功能评估显示经胸骨短轴的B模式和M模式记录。观察期间,降主动脉收缩心脏室间隔厚度增大,后壁厚度先增大后减小,提示降主动脉收缩小猪左心室肥厚重塑。
舒张末期左心室内尺寸在第 4 周和第 6 周下降,然后在第 8 周后逐渐增加,提示心室在扩张前经历了同心性肥大。模型心脏的左心室射血分数在12周内保持在50%以上。与假心脏相比,观察到降主动脉收缩心脏扩大。
在相应时间点,降主动脉收缩组在第 4、8 和 12 周的心力衰竭标志物心肌肌钙蛋白 I 显著高于假手术组。心房、室间隔和心室的心肌细胞表现为肥大伴偏墩。子宫内膜瓣膜肌肉层减少,主动脉内皮增生。
此外,降主动脉收缩诱导迷你猪心肌广泛纤维化,伴有左心室、右心房和主动脉壁炎症细胞浸润。该模型是研究压力过载诱导的 HFpEF 中的组织损伤、纤维化、炎症和同心功能障碍的有力工具。