开发Wistar白化大鼠股骨截骨模型的协议

这种股骨截骨模型可以帮助研究人员研究骨折愈合的过程，并评估药物如何影响骨折愈合。这是一种简单易行的啮齿动物模型，可以帮助研究人员确定药物是否具有骨愈合特性并了解其作用机制。尽管它主要侧重于观察和分析骨折愈合，但它也可以深入了解疾病的发病机制。

这种方法可以指导未来在健康和疾病中骨骼愈合的研究。它可用于评估潜在的骨合成代谢药物的效果。用K线诱导适当的骨折线和骨折固定具有挑战性。

几次练习应该会有所帮助。这种方法的简单性和可重复性在其视觉演示中显而易见，我实验室的初级居民Pawan Pagaku将有助于演示该程序。首先，将含有蜡的蜡块放在手术台上，深度可达2.5厘米，并用无菌窗帘覆盖。

在右大腿外侧做一个一厘米的垂直皮肤切口后，用梅岑鲍姆剪刀分离深筋膜，露出股外侧肌。将股外侧肌与肌纤维分开，直到到达股骨干。然后，使用骨膜升降机将骨骼从附着在其上的肌肉中解放出来。

在骨膜内和周围注射局部麻醉后，使用 15 号手术刀片在股骨干的中间三分之一处形成一个凹痕。将凿子放在凹痕上，用锤子轻轻敲击凿子，使轴中间三分之一的骨头完全断裂。在电池供电的电钻的帮助下，使用一毫米的无菌 K 线固定在内部固定骨折。

将 K 线通过骨折部位进入远端碎片的髓管。然后，通过股骨远端钻出K线。复位骨折后，将 K 线从远端推进到近端碎片的管中，直到在转子区域获得购买。

使用线切割器切断穿过皮肤的 K 线的远端部分。使用钳子将K线的尖端弯曲至约90度，并使用浸有Betadine的纱布绷带进行针脚部位敷料。K线充当髓内夹板，使骨折保持在缩小的位置。

使用无菌纱布或动脉钳对出血区域施加压力以止血。在使用4-0尼龙缝合线闭合皮肤之前确保完全止血。用Betadine清洁伤口，并用无菌纱布和微孔胶带覆盖。

对于术后护理，将大鼠放回笼子中，并在手术后五天内继续给予标准的半合成饮食以及腹膜内抗生素和镇痛药。最后，每周一次通过骨折部位的 X 线检查评估骨愈合情况。这里显示了诱导骨折前和手术后一天用K线NC2对大鼠股骨的X射线。

通过每周连续拍摄手术部位的 X 线检查来评估愈伤组织形成，从而对骨折愈合进行放射学监测。骨折保持复位并用髓内K线固定。在预定时间点处死后，将股骨小心地保存在福尔马林中，然后进行骨脱钙。

最佳脱钙后获得骨伴愈伤组织。这里显示了完整的愈伤组织和愈伤组织的矢状部分。在使用其他技术评估之前，间歇性地评估愈伤组织以确保最佳脱钙。

此处显示了骨折部位苏木精和伊红染色切片的低放大倍率和高放大倍率图像。骨折部位的染色切片显示硬骨组织，形成软骨和新骨。在这里可以看到骨折端和第二皮质区域。

骨膜对伤口最疼痛敏感的部分，在截骨术前必须用局部麻醉剂浸润骨折部位的骨膜。随后可以对老茧进行免疫组织化学和放射学分析，显微CT进行定量组织形态测定，分析血清愈伤组织的生物力学强度。该技术有助于确定有前途的骨合成代谢药物的成骨潜力、作用机制和比较分析。