生物控制剂的长期研究和使用取决于有效和经济的饲养技术的可用性,并且该协议已被证明是有效的饲养这种寄生虫。目前,人们对饲养这种寄生虫进行研究或现场释放有着巨大的兴趣,该协议将有利于未来长期研究和使用这种有前途的生物控制剂。首先,用户可能需要通过阅读文章中提供的相关参考文献和方法的一些实践来了解所涉及的昆虫的一些基本生物学。
为了制作宿主饮食,首先,按照手稿中所述准备饮食的液体部分。接下来,将25至30克捣碎的蓝莓加入空的250毫升烧瓶中。然后,将液体倒入烧瓶中,液体刚好覆盖在捣碎的蓝莓的顶部。
接下来,为了饲养宿主铃木果蝇,首先切一块吸水性纸巾,并在中心扭曲它。然后,将纸巾的扭曲中间部分放入饮食瓶中。为了保持水分,使用蒸馏水弄湿纸巾和饮食。
然后,为了转移性成熟的成年苍蝇,小心地取出苍蝇菌落瓶的塞子并将其倒置到饮食瓶中。在这种暴露一周后,将苍蝇放在环境室中三周,以便苍蝇出现。为了使宿主幼虫暴露于寄生虫,首先从烧瓶中取出成蝇和纸巾,留下苍蝇卵和幼虫。
为了作为幼虫的化蛹基质,折叠一张新的吸水纸巾并将其插入烧瓶中。然后将六对雌性和雄性对的寄生体G3巴西甘纳斯皮斯吸入烧瓶中,并在泡沫塞的底部划出一层薄薄的蜂蜜。为了收集和储存寄生虫,请在五天后取出成虫。
然后在前面提到的条件下将烧瓶存放在环境室中35天。随着成年黄蜂的出现,每周吸三次。为了容纳黄蜂,首先将一张湿润但未饱和蒸馏水的纸巾放在2.5×9.5平方厘米果蝇小瓶的底部。
然后,将大约60只黄蜂转移到小瓶中并标记出苗日期。将小瓶存放在环境室中。每周两次,在小瓶的泡沫塞底部划出一层薄薄的蜂蜜。
首先,安排对果蝇的大规模饲养,将1, 500至2, 000只性成熟的成年苍蝇以50:50的性别比例放在一个大的,编织的,网状的笼子里。然后,将装有水浸棉的盘子和四到六个带有标准果蝇培养基的培养皿放在笼子中。每周两次,用新鲜的培养皿更换暴露的培养皿。
将每个没有盖子的受感染培养皿放入800毫升的塑料杯中,并用细网覆盖杯子。然后,将杯子在23摄氏度和75%相对湿度下孵育12至15天。孵化后,将新孵化的成年果蝇铃木转移到饲养笼中。
接下来,通过在冷水中冲洗蓝莓一分钟开始准备宿主幼虫,并将水果浸泡在装有漂白剂溶液的盆中,稀释至5%三分钟。然后,用洗过的蓝莓填充九厘米的培养皿。在傍晚时分,将培养皿放入饲养笼中,并放置过夜。
第二天早上,轻轻敲击培养皿,将苍蝇从水果中移出,并将水果从饲养笼中取出。同时,为寄生G1巴西加纳斯皮斯准备寄生虫笼和黄蜂出苗笼。两个笼子在天花板下面都应该有一根细绳子,用于悬挂一个或多个喂料器。
在每个笼子中,悬挂一个装有水的果蝇小瓶,并根据相对湿度,每五到七天用醋酸纤维素塞从天花板上倒置密封。从铃木果蝇笼中取出受感染的蓝莓后,立即将它们与1, 500至2, 000只巴西加纳斯皮黄蜂一起放入寄生笼中两到三天。接下来,将水果收集在800毫升的塑料杯中,底部有吸水纸。
将打开的杯子在21摄氏度和65%相对湿度下在出苗笼或外爆笼中孵育至少28天。在孵化的第二周和第三周,每周检查笼子是否有早期宿主外闭。为了便于连续的寄生虫收集,切除成蝇。
在孵化的第四周结束时,为笼子提供喂食器和水源。收集约10%至15%的成年黄蜂,并将其转移到寄生笼中,以取代旧的和无生产力的黄蜂。从外阴笼的剩余黄蜂中,以50:50的性别比例储存多达700只成虫,其中800毫升塑料杯包含一个装满水的两毫升管,并在杯子底部用牙科棉卷密封。
将具有明显出苗状态的杯子存放在环境室中长达一个月。对于运输寄生虫,将约200个成年人放在50毫升的锥形管中。然后,将所有管子与冰袋一起放入绝缘运输容器中。
该协议导致在实验室中成功地小规模饲养了G3巴西加纳斯皮斯,一种寄生虫剂,针对农业害虫铃木果蝇。后代生产不受寄生虫密度和暴露时间差异的影响。G1巴西猪笼草的大规模生成也可以实现,在最初暴露于宿主铃木果蝇后五周开始生产。
从第8周到第22周,寄生虫的产生与暴露于它们的水果量成正比。保持合适的饲养温度,控制湿度并始终为成年昆虫提供食物至关重要。通过优化寄主和寄生体的饲养密度以最大限度地提高黄蜂的繁殖,并探索在替代寄主上饲养这种寄生虫的可能性,可以进一步改进这些方法。