通过所描述的方案，我们可以比较供体心脏左心室和保存后的心室功能，并且我们可以检查这些保存过程中两个心室的保存生物学差异。该技术使用离体灌注系统来检查保存后的心脏功能。它提供了一种强大而可靠的工具来筛选新的治疗方法，以改善供体保存后的心脏功能。
按照文中的描述，从面团的准备开始，将一小块面团塑造成椭圆形以获得头部。将其连接到干意大利面条的末端。将头部浸入已经准备好的糖溶液中，并在充分涂上溶液薄膜后慢慢将其取出。
然后，将意大利面条悬挂在聚苯乙烯泡沫块或其他支架上，以便在头部形成均匀而有光泽的覆盖物并干燥过夜。第二天，将模具浸入分散在二甲苯中的硅橡胶中，然后将意大利面条放回 37 摄氏度的聚苯乙烯泡沫块中两个小时或直到干燥。再重复此步骤一次。
然后，将模具放入水中分离并收集气球。将球囊储存在0.02%叠氮化钠中。现在，从 22 号针头上切下两个钝端尖端，并将一个钝端安装到硅胶球囊上，而将另一个钝端安装到 PE 管上。
使用 4-0 丝线将球囊绑在针上。取C57Black / 6小鼠，腹膜内注射200单位肝素到动物腹部进行抗凝。用脚趾捏住确认适当的麻醉后，在胸骨正下方做一个切口。
并使用剪刀，通过剪断肋骨中的横膈膜来打开胸部。然后，折叠前胸壁以完全暴露胸部，然后在靠近主动脉弓的降主动脉处切开。现在，将小鼠的心脏、肺和胸腺转移到冰冷的组氨酸-色氨酸-酮戊二酸或HTK缓冲液中，以分离器官。
通过切除任何结缔组织来暴露主动脉。将主动脉的末端连接到 22 号针头上，并用 6-0 丝线缝合。确保插管位于主动脉根部上方，以免干扰主动脉瓣。
用 10 毫升 HTK 缓冲液灌注主动脉约 10 分钟，预冷至 4 摄氏度。根据实验的类型，要么将心脏储存在装有冰冷HTK的50毫升管中8小时，要么立即进行大量注射。要进行大量注射，请将针头安装的心脏连接到Langendorff装置中的套管上，并用丝线将其绑扎。
以每分钟 3 毫升的恒定流量模式开始灌注，然后在 70 至 80 毫米汞柱下更改为恒压模式后，将灌注速率调整到每分钟约 6 毫升。接下来，使用三向水龙头将放气的充水硅胶气球连接到压力传感器和充水注射器。在上次灌注后 15 至 20 分钟的平衡期后，切开右心房或 RA，并通过 RA 将球囊插入右心室或 RV。使用胶带将球囊固定在房室内，并尽量减少 RA 的开放区域，以帮助限制球囊在心室中。
在对 RV 进行 20 分钟的功能数据收集后，切开左心房或 LA，并通过 LA 将放气的充满水的球囊插入左心室或 LV。用胶带将球囊固定在 LV.To 内，校准压力传感器，首先用温盐水填充 10 毫升注射器，然后通过三向水龙头将注射器连接到圆顶。打开水龙头，在关闭所有水龙头并取出注射器之前，慢慢地用盐水填充圆顶。然后，通过将压力表连接到三向水龙头的第三端，将填充的圆顶连接到传感器。
在录音软件中，从连接到换能器的通道的下拉菜单中，选择电桥放大器选项。 在开始录音之前单击 0 将换能器读数设置为零毫米汞柱。记录几秒钟后，慢慢推动注射器并将压力增加到100。
单击“停止”以结束录制。在“单位转换”对话框中，选择零毫米汞柱的记录区域，然后单击箭头到 1，然后键入零毫米汞柱。同样，选择 100 毫米汞柱的记录区域。
单击箭头到 2 并键入 100 毫米汞柱。现在，单击“确定”以校准换能器。校准完成后，将球囊与压力传感器对应的通道重命名为心室压力或左心室压力，并在心脏连接到系统时开始记录。
将球囊插入心室后，使用千分尺注射器通过三向水龙头调节球囊中的水量，以将舒张末期压力保持在 5 至 10 毫米汞柱。接下来，将一个空通道重命名为 dP/dt，并将导数源通道保留为心室压力。该通道记录收缩过程中心室腔内的压力变化比。
在血压模块中进行设置之前，选择稳定的测量周期。然后，选择 LV Pressure 作为输入通道，然后单击选择，然后按 OK。现在，单击“分类器视图”以删除任何异常的心动周期，单击“表视图”以生成所选时间段内最大 dP/dt 和最小 dP/dt 的平均值的表格。当小鼠心脏在灌注前在HTK缓冲液中储存0小时时，与RV相比，LV的收缩压更高。此外，与 RV 相比，LV 还显示出明显的肌肉收缩和放松。
然而，当在对心脏进行冷藏 8 小时后对心脏进行灌注时，与零小时阶段相比，LV 和 RV 都显示出显着的功能降低。与 RV 相比，LV 的下降更为严重。与零小时基线相比，8 h储存后LV的收缩和松弛分别为零小时储存对应功能的25.1%和30.7%，而RV显示32.5%和29.1%的功能。长期贮藏后左心室原发性移植物功能障碍的显著性高于右心室。保存质量很大程度上取决于HTK的灌注。
重要的是要确保灌注一致，以精确比较不同的治疗方法。通过精确测量供体心脏功能的保存，该方法可以很容易地适应筛选可以改善供体心脏功能的药物，然后使用异位移植模型进一步验证。
