DNA损伤反应是生命不可或缺的。由于DNA不断暴露于各种破坏性引擎中,缺乏修复会导致基因组的不稳定和疾病。我们开发了一种基于 RPA2 生物学特性的方法,用于可视化不同细胞周期阶段 DNA 修复过程中的单链 DNA 束。
传统的单链DNA检测方法使用BrdU抗体。这种方法可用于主动复制细胞。此外,这种抗体往往会与其他核苷酸类似物发生交叉反应,从而限制其使用。
与BRDU不同,我们的方法具有更高的信噪比,使其可用于每个循环阶段。了解不同DNA修复途径在不同细胞周期阶段和潜在的非复制细胞中的作用至关重要。我们的协议提供了一种新的方法和工具来可视化单链DNA病灶,其中利用BrdU的经典方法受到限制。
对DNA修复过程的全面了解可以作为治疗癌症、衰老和神经系统疾病的治疗靶点。我们的大多数细胞都是终末分化的,因此不会复制和分裂。更好地了解这些细胞如何修复各种DNA损伤至关重要。
因此,我们的实验室将主要关注复制后DNA修复过程,并开发新的工具来研究它们。