A Novel Light Damage Paradigm for Use in Retinal Regeneration Studies in Adult Zebrafish

Light-induced retinal degeneration (LIRD) is commonly used in both rodents and zebrafish to damage rod and cone photoreceptors. In adult zebrafish, ...

Wayne State University School of Medicine

Since 1995, raw vegetable sprouts have been implicated as the vehicle of infection in 15 foodborne outbreaks involving Salmonella and 2 foodborne outbreaks involving Escherichia coli O157:H7. To reduce the numbers of sprout-related outbreaks, the U.S. Food and Drug Administration (FDA) published Guidance for Industry: Reducing Microbial Food Safety Hazards for Sprouting Seeds in 1999. Between October 2000 and April 2001, 61.5% (16 of 26) of the known commercial sprout firms in California were enrolled in a survey to evaluate the industry practices of California sprouting operations and to determine compliance with FDA guidelines. A standardized questionnaire was used to collect data on firm demographics and seed disinfection practices. Additionally, free chlorine levels in seed disinfection solutions were measured, and 48-h spent irrigation water samples were collected from each firm. The irrigation water was screened for Salmonella and E. coli O157:H7 with FDA-recommended test kits. Free chlorine levels in the treatment solutions ranged from 50 to 35,000 mg/liter (ppm), with a median of 14,000 mg/liter (ppm). Free chlorine levels were higher for firms producing alfalfa sprouts than for those producing only mung bean or soybean sprouts (P=0.03). Levels of free chlorine tended to be higher for firms using a calcium hypochlorite treatment solution than for firms using a sodium hypochlorite treatment solution (P=0.067). All 32 irrigation water samples screened for Salmonella tested negative. Of the irrigation water samples tested for E. coil O157:H7, 75% (24 of 32) tested negative, and 25% (8 of 32) tested presumptive positive. The eight presumptive positive samples were found to be negative after further testing. These results indicate that producers of alfalfa sprouts are generally achieving the FDA-recommended calcium hypochlorite level of 20,000 mg/liter (ppm), whereas mung bean sprout producers are not.

Industry practices and compliance with U.S. Food and Drug Administration guidelines among California sprout firms.

The purpose of this study was to analyze the effect of various degrees of axial midline angulation on the attractiveness of a smile. We explored the influence of age, race, sex, direction of midline deviation, education, occupation, and dominant hand on each evaluator's perception of dental esthetics. Photographs of smiling subjects--one man and one woman--were altered to produce both left and right axial midline angulations in 5 degree increments. Fifty orthodontists and 50 laypeople evaluated these altered photographs by assigning both a numerical attractiveness rating and an acceptable or unacceptable rating to each. The results showed that attractiveness scores and acceptability ratings declined consistently as axial midline angulation increased. Statistical analysis showed that both sex of the subject and occupation of the judge were significant variables (P < .05) in the evaluation of the subjects. Age, race, sex of the judge, education level, direction of midline deviation, and dominant hand were not statistically significant. The mean acceptable midline angulation for the male subject was 6.6 +/- 4.5 degrees for orthodontists and 10.7 +/- 6.2 degrees for laypeople. For the female subject, the mean acceptable threshold was 6.4 +/- 4.0 degrees for orthodontists and 10.0 +/- 6.1 degrees for laypeople (P < .001). Discrepancies of 10 degrees were unacceptable by 68% of orthodontists and 41% of laypeople.

The effect of axial midline angulation on dental esthetics.

Filter metrics are used as a quick assessment of sequence trace files in order to sort data into different categories (i.e. high quality, review, and low quality) without human intervention. The filter metrics consist of two numerical parameters for sequence quality assessment: trace score (TS) and contiguous read length (CRL). Primer-specific settings for the TS and CRL were established using a calibration dataset of 2817 traces and validated using a concordance dataset of 5617 traces. Prior to optimization, 57% of the traces required manual review before import into a sequence analysis program, whereas after optimization only 28% of the traces required manual review. After optimization of primer-specific filter metrics for mitochondrial DNA sequence data, an overall reduction of review of trace files translates into increased throughput of data analysis and decreased time required for manual review.

Optimization of primer-specific filter metrics for the assessment of mitochondrial DNA sequence data.

&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF; - &#x6771;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3001;Griscelli&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3001;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DE;&#x30F3;&#xB7;Pudlak&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;HPS&#xFF09;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x75C7;&#x5019;&#x6027;&#x767D;&#x76AE;&#x75C7;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8996;&#x529B;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6DB2;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9078;&#x5225;11&#xFF08;vps11&#xFF09;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x75C7;&#x5019;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30CE;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x7DB2;&#x819C;&#x75C5;&#x614B;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;

Chediak-&#xD788;&#xAC00;&#xC2DC; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;, Griscelli &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;, Hermansky-Pudlak &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (HPS) &#xB4F1; syndromic albinism &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xBE44;&#xC804; &#xACB0;&#xD568; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; zebrafish &#xD50C;&#xB798;&#xD2F0;&#xB118; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC124;&#xC815;.

11 (Vps11)&#xC744; &#xC815;&#xB82C; &#xD558;&#xB294; vacuolar &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; syndromic albinism&#xC758; &#xCC99;&#xCD94; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBCD1;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Para establecer el platino pez cebra mutante como un modelo para el estudio de los defectos de la visi&#xF3;n causados &#x200B;&#x200B;por enfermedades tales como albinismo s&#xED;ndromes de Chediak-Higashi, s&#xED;ndrome de Griscelli, y el s&#xED;ndrome de Hermansky-Pudlak (HPS).

La p&#xE9;rdida de la clasificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas vacuolar 11 (vps11) Causas Patogenia de retina en un modelo de Vertebrados del albinismo sindr&#xF3;mico

&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x767D;&#x91D1;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x7814;&#x7A76;&#x89C6;&#x89C9;&#x7F3A;&#x9677;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x75C7;&#x72B6;&#x767D;&#x5316;&#x75C5;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5982; Chediak &#x4E1C;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3001; &#x683C;&#x91CC;&#x585E;&#x5229;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x548C;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; (HPS)&#x3002;

&#x6DB2;&#x6CE1;&#x6392;&#x5E8F; 11 &#xFF08;vps11&#xFF09; &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5BFC;&#x81F4;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x7684;&#x75C7;&#x72B6;&#x767D;&#x5316;&#x75C5;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

To establish the zebrafish platinum mutant as a model for studying vision defects caused by syndromic albinism diseases such as Chediak-Higashi syndrome, Griscelli syndrome, and Hermansky-Pudlak syndrome (HPS).

The loss of vacuolar protein sorting 11 (vps11) causes retinal pathogenesis in a vertebrate model of syndromic albinism.

Pour &#xE9;tablir le platine poisson z&#xE8;bre mutant comme un mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;&#xE9;tude des d&#xE9;fauts de la vision caus&#xE9;s par des maladies telles que albinisme syndromiques de Chediak-Higashi, le syndrome de Griscelli, et Hermansky-Pudlak syndrome (HPS).

La perte de tri des prot&#xE9;ines vacuolaire 11 (vps11) Causes Pathogen&#xE8;se r&#xE9;tinienne dans un mod&#xE8;le vert&#xE9;br&#xE9; de l&#x26;#39;albinisme syndromique

Der Zebrab&auml;rbling Platin-Mutant als Modell f&uuml;r die Untersuchung von Vision-M&auml;ngel, die durch syndromale Albinismus Krankheiten wie Chediak-Higashi-Syndrom, Griscelli-Syndrom und Hermansky-Pudlak-Syndrom (HPS) zu schaffen.

Der Verlust von Protein, welches 11 (vps11) verursacht retinale Pathogenese in vertebrate Modell f&uuml;r syndromale Albinismus.

Per stabilire il mutante di zebrafish platino come un modello per studiare i difetti di visione causati da malattie sindromiche albinismo come la sindrome di Chediak-Higashi, sindrome di Griscelli e sindrome Hermansky-Pudlak (HPS).

La perdita della Proteina vacuolar 11 (vps11) provoca la patogenesi della retina in un modello di vertebrati di albinismo sindromico.

&#x76EE;&#x7684;&#xFF1A; &#x5EFA;&#x7ACB;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x767D;&#x91D1;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x7814;&#x7A76;&#x89C6;&#x89C9;&#x7F3A;&#x9677;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x75C7;&#x72B6;&#x767D;&#x5316;&#x75C5;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5982; Chediak &#x4E1C;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81;&#x3001; &#x683C;&#x91CC;&#x585E;&#x5229;&#x7EFC;&#x5408;&#x75C7;&#x548C;&#x7EFC;&#x5408;&#x5F81; (HPS)&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x81A8;&#x5316;&#x5206;&#x79BB;&#x4E0E;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x5019;&#x9009;&#x57FA;&#x56E0;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x63ED;&#x793A;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x767D;&#x91D1;&#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x5728; vps11 &#xFF08;&#x6392;&#x5E8F; 11 &#x6DB2;&#x6CE1;&#x86CB;&#x767D;&#xFF09; &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63D2;&#x5165;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; vps11 RT-PCR &#x548C;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7740;&#x8272;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x75C5;&#x7406;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x548C;&#x4F20;&#x8F93;&#x7535;&#x955C;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF1A; Phenocopy &#x548C;&#x6551;&#x63F4;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x786E;&#x5B9A;&#x635F;&#x5931;&#x7684; Vps11 &#x7ED3;&#x679C;&#x767D;&#x91D1;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE; (RPE) &#x5F3A;&#x8868;&#x8FBE; vps11 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x3002;&#x767D;&#x91D1;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5C55;&#x793A;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x51CF;&#x5C11;&#x8272;&#x7D20;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE; (RPE)&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;melanophore &#x53D1;&#x5C55;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x8272;&#x6563;&#x901A;&#x5E38;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3001; &#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5185;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x6210;&#x901A;&#x5E38;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x767D;&#x91D1;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x9010;&#x6E10;&#x4E27;&#x5931;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;/&#x611F;&#x5149;&#x5668; interdigitation &#x6307;&#x51FA;&#x3002;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A; Vps11 &#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x6B63;&#x5E38;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x6216;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5F00;&#x59CB;&#x8FDB;&#x884C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C0F;&#x4F53;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x3002;

Purpose: To establish the zebrafish platinum mutant as a model for studying vision defects caused by syndromic albinism diseases such as Chediak-Higashi syndrome, Griscelli syndrome, and Hermansky-Pudlak syndrome (HPS). Methods: Bulked segregant analysis and candidate gene sequencing revealed that the zebrafish platinum mutation is a single nucleotide insertion in the vps11 (vacuolar protein sorting 11) gene. Expression of vps11 was determined by RT-PCR and in situ hybridization. Mutants were analyzed for pigmentation defects and retinal pathology by histology, immunohistochemistry, and transmission electron microscopy. Results: Phenocopy and rescue experiments determined that a loss of Vps11 results in the platinum phenotype. Expression of vps11 appeared ubiquitous during zebrafish development, with stronger expression in the developing retina and retinal pigmented epithelium (RPE). Zebrafish platinum mutants exhibited reduced pigmentation in the body and retinal pigmented epithelium (RPE), however, melanophore development, migration, and dispersion occurred normally. RPE, photoreceptors, and inner retinal neurons formed normally in zebrafish platinum mutants. However, a gradual loss of RPE, an absence of mature melanosomes and the subsequent degradation of RPE/photoreceptor interdigitation was observed. Conclusions: These data show that Vps11 is not required for normal retinal development or initiation of melanin biosynthesis, but is required for melanosome maturation and healthy maintenance of the RPE and photoreceptors.

Objectif: Mettre en place le platine poisson z&#xE8;bre mutant comme un mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;&#xE9;tude des d&#xE9;fauts de la vision caus&#xE9;s par des maladies telles que albinisme syndromiques de Chediak-Higashi, le syndrome de Griscelli, et Hermansky-Pudlak syndrome (HPS). M&#xE9;thodes: analyse de s&#xE9;gr&#xE9;gants regroup&#xE9;s et le s&#xE9;quen&#xE7;age du g&#xE8;ne candidat a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la mutation de platine poisson z&#xE8;bre est une insertion de nucl&#xE9;otide simple dans le vps11 (prot&#xE9;ine vacuolaire de tri 11) du g&#xE8;ne. Expression de vps11 a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9;e par RT-PCR et hybridation in situ. Les mutants ont &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s pour des d&#xE9;fauts de pigmentation et pathologie r&#xE9;tinienne par l&#x26;#39;histologie, l&#x26;#39;immunohistochimie et la microscopie &#xE9;lectronique &#xE0; transmission. R&#xE9;sultats: des exp&#xE9;riences ph&#xE9;nocopie et de sauvetage a d&#xE9;termin&#xE9; que la perte de Vps11 r&#xE9;sultats dans le ph&#xE9;notype de platine. Expression de vps11 apparu omnipr&#xE9;sent au cours du d&#xE9;veloppement du poisson z&#xE8;bre, &#xE0; plus forte expression dans la r&#xE9;tine en d&#xE9;veloppement et l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire r&#xE9;tinien (EPR). Mutants platine de poisson-z&#xE8;bre expos&#xE9; pigmentation r&#xE9;duite dans le corps et l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pigmentaire r&#xE9;tinien (EPR), cependant, le d&#xE9;veloppement des m&#xE9;lanophores, la migration et la dispersion a eu lieu normalement. RPE, photor&#xE9;cepteurs et neurones de la r&#xE9;tine interne form&#xE9; normalement dans des mutants de platine de poisson z&#xE8;bre. Toutefois, une perte progressive de l&#x26;#39;EPR, une absence de m&#xE9;lanosomes matures et la d&#xE9;gradation subs&#xE9;quente de l&#x26;#39;EPR / photor&#xE9;cepteur interdigitation a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e. Conclusions: Ces donn&#xE9;es montrent que Vps11 n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire pour d&#xE9;veloppement de la r&#xE9;tine normale ou &#xE0; l&#x26;#39;initiation de la biosynth&#xE8;se de la m&#xE9;lanine, mais est n&#xE9;cessaire &#xE0; la maturation des m&#xE9;lanosomes et de l&#x26;#39;entretien sain de l&#x26;#39;EPR et des photor&#xE9;cepteurs.

Gegenstand: Festlegung der Zebrafisch Platin-Mutant als Modell f&uuml;r die Untersuchung von Vision Defekte durch syndromale Albinismus Krankheiten wie Chediak-Higashi-Syndrom, Griscelli-Syndrom und Hermansky-Pudlak-Syndrom (HPS). Methoden: Einf&uuml;llg&uuml;ter segregant Analyse und Kandidaten-Gen-Sequenzierung ergab, dass die Zebrafish Platin-Mutation eine Einzel-Nukleotid-Einf&uuml;gung in das vps11 (Protein, welches 11) Gen ist. Ausdruck der vps11 wurde durch RT-PCR und in situ Hybridisierung bestimmt. Mutanten wurden durch Histologie, Immunhistochemie und &Uuml;bertragung Elektronenmikroskopie Pigmentierung M&auml;ngelhaftung und retinale Pathologie analysiert. Ergebnisse: Ph&auml;nokopie und Rettung Experimente festgestellt, dass ein Verlust von Vps11 in der Platin Ph&auml;notyp f&uuml;hrt. Ausdruck der vps11 erschien w&auml;hrend der Zebrafisch Entwicklung mit st&auml;rkeren Ausdruck in den Entwicklungsl&auml;ndern Netzhaut und retinale pigmentierte Pigmentepithels (RPE) allgegenw&auml;rtig. Zebrab&auml;rbling Platin Mutanten ausgestellt reduziert Pigmentierung in den K&ouml;rper und die Netzhaut pigmentiert Pigmentepithels (RPE), jedoch Melanophore Entwicklung, Migration und Dispersion ist normalerweise aufgetreten. RPE, Photorezeptoren und innere Netzhaut Neuronen gebildet normalerweise im Zebrafisch Platin-Mutanten. Allerdings wurde einem allm&auml;hlichen Verlust der RPE, fehlende Reife Melanosomes und der anschlie&szlig;enden Verschlechterung der RPE/Photorezeptor Interdigitation beobachtet. Schlussfolgerungen: Diese Daten zeigen, dass Vps11 nicht f&uuml;r normale Netzhaut Entwicklung oder Einleitung von Melanin Biosynthese erforderlich ist, aber f&uuml;r Melanosome Reifung und gesunde Pflege der RPE und Photorezeptoren erforderlich ist.

Scopo: Per stabilire il mutante di zebrafish platino come un modello per lo studio della visione difetti causati da malattie sindromiche albinismo come la sindrome di Chediak-Higashi, sindrome di Griscelli e sindrome Hermansky-Pudlak (HPS). Metodi: Sfusi segregant analysis e candidato sequenziamento gene ha rivelato che la mutazione di zebrafish platinum &egrave; un inserimento singolo nucleotide nel gene vps11 (Proteina vacuolar 11). Espressione di vps11 &egrave; stato determinato da RT-PCR e l&#39;ibridazione in situ. Mutanti sono stati analizzati per patologia della retina e difetti di pigmentazione da istologia, immunoistochimica e trasmissione microscopia elettronica. Risultati: Esperimenti fenocopia e salvataggio determinato che una perdita di Vps11 determina il fenotipo di platino. Espressione di vps11 apparso onnipresente durante lo sviluppo dello zebrafish, con espressione pi&ugrave; forte in sviluppo della retina e dell&#39;epitelio pigmentato retinico (RPE). Zebrafish mutanti platino esposto ridotta pigmentazione nel corpo e l&#39;epitelio pigmentato retinico (RPE), tuttavia, dispersione, migrazione e sviluppo melanophore si &egrave; verificato normalmente. RPE, fotorecettori e i neuroni della retina interni formano normalmente in platino zebrafish mutanti. Tuttavia, una perdita graduale della RPE, un&#39;assenza di melanosomi maturi e il conseguente degrado della interdigitation EPR/fotorecettori &egrave; state osservate. Conclusioni: Questi dati mostrano che il Vps11 non &egrave; necessaria per il normale sviluppo della retina o iniziazione della biosintesi di melanina, ma &egrave; necessaria per la maturazione melanosoma e sana manutenzione della RPE e fotorecettori.

&#x76EE;&#x7684;&#xFF1A;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x30C3;&#x30AF; - &#x6771;&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3001;Griscelli&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#x3001;&#x30D8;&#x30EB;&#x30DE;&#x30F3;&#xB7;Pudlak&#x75C7;&#x5019;&#x7FA4;&#xFF08;HPS&#xFF09;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x75C7;&#x5019;&#x6027;&#x767D;&#x76AE;&#x75C7;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8996;&#x529B;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x5909;&#x7570;&#x304C;vps11&#xFF08;11&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6DB2;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E00;&#x5869;&#x57FA;&#x633F;&#x5165;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30AF;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D0;&#x30EB;&#x30AF;&#xB7;&#x504F;&#x6790;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3002; vps11&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;RT-PCR&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x900F;&#x904E;&#x578B;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8272;&#x7D20;&#x6C88;&#x7740;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3084;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#xFF1A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;Vps11&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x55AA;&#x5931;&#x3068;&#x5224;&#x65AD;&#x6A21;&#x5199;&#x3068;&#x30EC;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002; vps11&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x7DB2;&#x819C;&#x3068;&#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF08;RPE&#xFF09;&#x306B;&#x5F37;&#x304F;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x767B;&#x5834;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x3068;&#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#xFF08;RPE&#xFF09;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x8272;&#x7D20;&#x6C88;&#x7740;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x6563;&#x304C;&#x901A;&#x5E38;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; RPE&#x3001;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;RPE&#x306E;&#x6F38;&#x9032;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x3001;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x53CA;&#x3073;RPE /&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x5D4C;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#xFF1A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;Vps11&#x304C;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CB;&#x30F3;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3084;&#x958B;&#x59CB;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3068;RPE&#x3068;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#xBAA9;&#xC801;: &#xBE44;&#xC804; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; zebrafish &#xD50C;&#xB798;&#xD2F0;&#xB118; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC124;&#xC815;&#xD560; Chediak-&#xD788;&#xAC00;&#xC2DC; &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;, Griscelli &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70;, Hermansky-Pudlak &#xC99D;&#xD6C4;&#xAD70; (HPS) &#xB4F1; syndromic albinism &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xACB0;&#xD568;. &#xBC29;&#xBC95;: Bulked segregant &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; zebrafish &#xD50C;&#xB798;&#xD2F0;&#xB118; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; vps11 (11 &#xC815;&#xB82C; vacuolar &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC5FC;&#xAE30; &#xC0BD;&#xC785;&#xC740; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. Vps11&#xC758; &#xC2DD; RT-PCR &#xBC0F; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCC29; &#xC0C9; &#xACB0;&#xD568; &#xBC0F; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBCD1; &#xB9AC; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559;, &#xAE30;&#xC220;, &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C;: Phenocopy &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870; &#xC2E4;&#xD5D8; vps11&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC31; &#xAE08; &#xD615;&#xC5D0; &#xACB0;&#xACFC; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Vps11&#xC758; &#xC2DD; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xACFC; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; (RPE)&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xC2DD; zebrafish &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; Zebrafish &#xD50C;&#xB798;&#xD2F0;&#xB118; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC804;&#xC2DC; &#xAC10;&#xC18C; &#xBAB8;&#xACFC; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; (RPE)&#xC5D0; &#xCC29; &#xC0C9;, melanophore &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC0B0;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RPE, &#xB300;&#xB1CC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; zebrafish &#xD50C;&#xB798;&#xD2F0;&#xB118; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD615;&#xC131;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, RPE&#xC758; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801; &#xC0C1;&#xC2E4;, &#xC131;&#xC219;&#xD55C; melanosomes&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xBC0F; RPE/&#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; interdigitation&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC800;&#xD558;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;:&#xC774; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; Vps11 &#xC815;&#xC0C1; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB610;&#xB294; &#xBA5C; &#xB77C; &#xB2CC; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; melanosome &#xC131;&#xC219;&#xACFC; RPE &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15; &#xC720;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xC774;&#xB2E4;.

Objetivo: Establecer el platino pez cebra mutante como un modelo para el estudio de los defectos de la visi&#xF3;n causados &#x200B;&#x200B;por enfermedades tales como albinismo s&#xED;ndromes de Chediak-Higashi, s&#xED;ndrome de Griscelli, y el s&#xED;ndrome de Hermansky-Pudlak (HPS). M&#xE9;todos: An&#xE1;lisis abultado segregante y la secuenciaci&#xF3;n de genes candidatos revel&#xF3; que la mutaci&#xF3;n de platino pez cebra es la inserci&#xF3;n de un solo nucle&#xF3;tido en el vps11 (prote&#xED;na vacuolar clasificaci&#xF3;n de 11) de genes. Expresi&#xF3;n de vps11 se determin&#xF3; por RT-PCR e hibridaci&#xF3;n in situ. Los mutantes se analizaron para detectar defectos de pigmentaci&#xF3;n y la patolog&#xED;a retiniana por la histolog&#xED;a, inmunohistoqu&#xED;mica y microscop&#xED;a electr&#xF3;nica de transmisi&#xF3;n. Resultados: experimentos fenocopia y rescate determinado que una p&#xE9;rdida de Vps11 resultados en el fenotipo de platino. Expresi&#xF3;n de vps11 apareci&#xF3; en todas partes durante el desarrollo del pez cebra, con mayor expresi&#xF3;n en la retina en desarrollo y el epitelio pigmentado retiniano (EPR). Pez cebra mutantes de platino mostraron reducci&#xF3;n de la pigmentaci&#xF3;n en el cuerpo y el epitelio pigmentado retiniano (EPR), sin embargo, el desarrollo melan&#xF3;foro, la migraci&#xF3;n y la dispersi&#xF3;n se desarroll&#xF3; con normalidad. RPE, fotorreceptores y neuronas de la retina interna formada normalmente en los mutantes de platino de pez cebra. Sin embargo, una p&#xE9;rdida gradual de la RPE, la ausencia de melanosomas maduros y la subsiguiente degradaci&#xF3;n de RPE / fotorreceptor interdigitaci&#xF3;n se observ&#xF3;. Conclusiones: Estos datos muestran que Vps11 no es necesaria para el desarrollo normal de la retina o el inicio de la bios&#xED;ntesis de melanina, pero es necesario para la maduraci&#xF3;n de los melanosomas y el mantenimiento saludable de la EPR y los fotorreceptores.

Fgf &#xC2E0;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;, &#xBC30;&#xC544; &#xD328;&#xD134;&#xD654;, &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;, &#xC0C1;&#xCC98; &#xCE58;&#xC720; &#xBC0F; &#xC554; &#xC9C4;&#xD589; &#xB4F1;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Fgf &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC591;&#xC11C;&#xB958;&#xC640; zebrafish&#xC5D0; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;, &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC911;&#xC0DD; &#xB3CC;&#xCD9C;&#xBD80; &#xC911;&#xC0DD;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; zebrafish &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC5EC;&#xAE30; FGF 2 intravitreal &#xC8FC;&#xC0AC; &#xB9C9;&#xB300; &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC140; neuroprotection &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xC911; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Tg(hsp70:dn-fgfr1) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC; Fgf &#xC2E0;&#xD638; &#xB9C9;&#xB300;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCF58;, &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. Fgfr1 &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB300;&#xB1CC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; Fgf &#xC2E0;&#xD638; &#xBE5B; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; hsp70:dn&#xC640; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xBC0F; &#xB9C9;&#xB300; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;-fgfr1 transgene &#xD06C;&#xAC8C; &#xCF58; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC911;&#xC0DD;&#xC744; &#xC5B5;&#xC555;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB85C;&#xB4DC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xBC0F; &#xC911;&#xC0DD;&#xC740; Fgf &#xC885;&#xC18D; &#xC131;&#xC778; zebrafish&#xC758; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xCF58; &#xB300;&#xB1CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

FGF &#xC2E0;&#xD638; &#xC870;&#xC808; &#xB9C9;&#xB300; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xBC0F; zebrafish&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD;.

Fgf &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6D89;&#x53CA;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x7A33;&#x6001;&#x3001; &#x4F24;&#x53E3;&#x6108;&#x5408;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x8FDB;&#x5C55;&#x6240;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x3002;&#x867D;&#x7136; Fgf &#x4FE1;&#x53F7;&#x529F;&#x80FD;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x80A2;&#x4F53;&#x518D;&#x751F;&#x4E24;&#x6816;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x9CCD;&#x548C;&#x5FC3;&#x810F;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x6709;&#x5C1A;&#x672A;&#x7814;&#x7A76;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x518D;&#x751F;&#x671F;&#x95F4;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; FGF-2 &#x73BB;&#x7483;&#x4F53;&#x8154;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5728;&#x6FC0;&#x70C8;&#x7684;&#x5149;&#x635F;&#x4F24;&#x81F4;&#x6746;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Tg(hsp70:dn-fgfr1) &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x884C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Fgf &#x4FE1;&#x53F7;&#x6746;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x9525;&#x5F62;&#xFF0C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5373;&#x4F7F; fgfr1 &#x8868;&#x793A;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; Fgf &#x4FE1;&#x53F7;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5F71;&#x54CD;&#x5149;&#x53D7;&#x635F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E0E;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; hsp70:dn &#x9525;&#x548C;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7684;&#x518D;&#x751F;-fgfr1 &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5927;&#x5927;&#x538B;&#x5236;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x9525;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; Fgf &#x4F9D;&#x8D56;&#x662F;&#x6746;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x7A33;&#x6001;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x68D2;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x53D7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

FGF &#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282;&#x6746;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EF4;&#x6301;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x3002;

Fgf signaling is required for many biological processes involving the regulation of cell proliferation and maintenance, including embryonic patterning, tissue homeostasis, wound healing, and cancer progression. Although the function of Fgf signaling is suggested in several different regeneration models, including appendage regeneration in amphibians and fin and heart regeneration in zebrafish, it has not yet been studied during zebrafish photoreceptor cell regeneration. Here we demonstrate that intravitreal injections of FGF-2 induced rod precursor cell proliferation and photoreceptor cell neuroprotection during intense light damage. Using the dominant-negative Tg(hsp70:dn-fgfr1) transgenic line, we found that Fgf signaling was required for homeostasis of rod, but not cone, photoreceptors. Even though fgfr1 is expressed in both rod and cone photoreceptors, we found that Fgf signaling differentially affected the regeneration of cone and rod photoreceptors in the light-damaged retina, with the dominant-negative hsp70:dn-fgfr1 transgene significantly repressing rod photoreceptor regeneration without affecting cone photoreceptors. These data suggest that rod photoreceptor homeostasis and regeneration is Fgf-dependent and that rod and cone photoreceptors in adult zebrafish are regulated by different signaling pathways.

FGF signaling regulates rod photoreceptor cell maintenance and regeneration in zebrafish.

Fgf signalisation est n&#xE9;cessaire pour de nombreux processus biologiques impliquant la r&#xE9;gulation de la prolif&#xE9;ration cellulaire et de l&#x26;#39;entretien, y compris structuration embryonnaire, l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie tissulaire, la cicatrisation des plaies, et la progression du cancer. Bien que la fonction de FGF de signalisation est sugg&#xE9;r&#xE9; dans plusieurs mod&#xE8;les de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration, y compris la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration appendice chez les amphibiens et le rorqual commun et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration cardiaque chez le poisson z&#xE8;bre, il n&#x26;#39;a pas encore &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des cellules photor&#xE9;ceptrices poisson-z&#xE8;bre. Nous d&#xE9;montrons ici que des injections intravitr&#xE9;ennes de FGF-2 induite par la prolif&#xE9;ration de cellules pr&#xE9;curseurs tige et la neuroprotection des cellules photor&#xE9;ceptrices lors d&#x26;#39;un dommage lumi&#xE8;re intense. Utilisation de la dominante-n&#xE9;gative Tg (hsp70: dn-FGFR1) lign&#xE9;e transg&#xE9;nique, nous avons trouv&#xE9; que le FGF de signalisation a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie de la tige, mais pas de c&#xF4;ne, les photor&#xE9;cepteurs. M&#xEA;me si FGFR1 est exprim&#xE9; &#xE0; la fois dans la tige et des c&#xF4;nes photor&#xE9;cepteurs, nous avons trouv&#xE9; que le FGF de signalisation affect&#xE9;es diff&#xE9;remment la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des photor&#xE9;cepteurs &#xE0; c&#xF4;nes et de la tige de la r&#xE9;tine &#xE0; la lumi&#xE8;re endommag&#xE9;, avec la dominante-n&#xE9;gative hsp70: dn-FGFR1 transg&#xE8;ne de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de fa&#xE7;on significative la r&#xE9;pression tige photor&#xE9;cepteur sans affectant photor&#xE9;cepteurs &#xE0; c&#xF4;nes. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie photor&#xE9;cepteur de tige et de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration est le FGF-d&#xE9;pendante et que les photor&#xE9;cepteurs b&#xE2;tonnets et des c&#xF4;nes chez le poisson z&#xE8;bre adultes sont r&#xE9;gis par diff&#xE9;rentes voies de signalisation.

FGF signalisation R&#xE9;gule entretien Rod cellules photor&#xE9;ceptrices et de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration chez le poisson z&#xE8;bre

FGF Signalisierung ist f&uuml;r viele biologische Prozesse, die mit die Verordnung der Zellproliferation und Wartung einschlie&szlig;lich embryonale Musterung, Gewebe-Hom&ouml;ostase, Wundheilung und Fortschreiten erforderlich. Die Funktion der Fgf Signalisierung in mehrere verschiedene Regenerierung-Modelle, einschlie&szlig;lich Anh&auml;ngsel Regenerierung bei Amphibien und Fin und Herz Regeneration im Zebrafisch, oft empfohlen ist es nicht noch w&auml;hrend der Zebrafisch Photorezeptor Zellregeneration gepr&uuml;ft worden. Hier zeigen wir, dass Intravitreal Injektion von FGF-2 Stab Vorl&auml;ufer Zellproliferation und Photorezeptoren Zelle Nervenschutz w&auml;hrend intensiven Licht Schaden verursachte. Mithilfe der Dominant-negativen Tg(hsp70:dn-fgfr1) transgenen Linie, fanden wir, dass die Fgf Signalisierung f&uuml;r Hom&ouml;ostase der Rute, aber nicht Kegel, Photorezeptoren erforderlich war. Obwohl fgfr1 Stab und Kegel Photorezeptoren abgefa&szlig;t ist, wir fanden, dass die Regeneration von Kegel und Rod Lichtrezeptoren in der Licht-Gesch&auml;digte Netzhaut, mit der Dominant-negativen Hsp70:dn Fgf Signalisierung differentiell betroffen werden.-fgfr1 Transgene deutlich Stab Photorezeptor Regenerierung ohne Kegel Photorezeptoren verdr&auml;ngen. Diese Daten legen nahe, dass Stab Photorezeptor Hom&ouml;ostase und Regeneration ist Fgf-abh&auml;ngige und Rod und Kegel Photorezeptoren in Erwachsenen Zebrafisch verschiedene Signalwege geregelt sind.

FGF Signalisierung regelt Stab Photorezeptor Zelle Wartung und Erneuerung in Zebrafisch.

FGF di segnalazione &egrave; necessario per molti processi biologici che coinvolgono la regolazione della proliferazione cellulare e manutenzione, compresi patterning embrionale, l&#39;omeostasi dei tessuti, la guarigione della ferita e progressione del cancro. Anche se la funzione di segnalazione di Fgf &egrave; suggerita in vari modelli di rigenerazione differenti, tra cui rigenerazione appendice in anfibi e rigenerazione pinna e cuore in zebrafish, esso non &egrave; ancora stato studiato durante la rigenerazione di cellule fotorecettrici zebrafish. Qui dimostriamo che intravitreal iniezioni di FGF-2 indotta da proliferazione di cellule precursore rod e neuroprotezione delle cellule fotorecettrici durante intensi danni leggeri. Utilizzando la riga di transgenica Tg(hsp70:dn-fgfr1) dominante-negativo, abbiamo trovato che Fgf di segnalazione &egrave; stato richiesto per l&#39;omeostasi dell&#39;asta, ma non cono, fotorecettori. Anche se fgfr1 &egrave; espressa in asta sia cono fotorecettori, abbiamo trovato che Fgf segnalando differenzialmente colpite la rigenerazione del cono e asta di fotorecettori nella retina danneggiata di luce, con la hsp70:dn dominante-negativo-transgene fgfr1 significativamente reprimendo rigenerazione fotorecettore asta senza che colpisce i fotorecettori cono. Questi dati suggeriscono che la rigenerazione e rod fotorecettore omeostasi &egrave; Fgf-dipendente e che fotorecettori rod e cono in zebrafish adulto sono regolati da diverse vie di segnalazione.

FGF segnalando regola rod fotorecettore cellula manutenzione e rigenerazione di zebrafish.

FGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3001;&#x5275;&#x50B7;&#x6CBB;&#x7652;&#x3001;&#x764C;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x7DAD;&#x6301;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; FGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x4ED8;&#x5C5E;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5FC3;&#x81D3;&#x518D;&#x751F;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x518D;&#x751F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x3044;&#x5149;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x6642;&#x306B;FGF-2&#x8A98;&#x5C0E;&#x68D2;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x785D;&#x5B50;&#x4F53;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;Tg&#xFF08;HSP70&#xFF1A;DN-FGFR1&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;FGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x304C;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x3001;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3002; FGFR1&#x306F;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;FGF&#x306F;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;HSP70&#x3068;&#x3001;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x9310;&#x4F53;&#x3068;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x5DEE;&#x52D5;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF1A;&#x306A;&#x304F;&#x3066;&#x3082;DN-FGFR1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x687F;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x304C;FGF-&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

FGF&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

FGF se&#xF1;alizaci&#xF3;n es necesaria para muchos procesos biol&#xF3;gicos relacionados con la regulaci&#xF3;n de la proliferaci&#xF3;n celular y el mantenimiento, incluyendo el desarrollo embrionario, la homeostasis de los tejidos, la cicatrizaci&#xF3;n de heridas, y la progresi&#xF3;n del c&#xE1;ncer. Aunque la funci&#xF3;n de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de FGF se sugiere en varios modelos diferentes, incluyendo la regeneraci&#xF3;n de la regeneraci&#xF3;n de ap&#xE9;ndices en los anfibios y la aleta y la regeneraci&#xF3;n del coraz&#xF3;n en el pez cebra, que a&#xFA;n no ha sido estudiada durante la regeneraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas fotorreceptoras de pez cebra. Aqu&#xED; se demuestra que las inyecciones intrav&#xED;treas de FGF-2 la proliferaci&#xF3;n celular inducida por la varilla de precursores y la neuroprotecci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas fotorreceptoras en da&#xF1;o de la luz intensa. Usando el dominante negativo Tg (hsp70: dn FGFR1-) l&#xED;nea transg&#xE9;nica, hemos encontrado que el FGF se&#xF1;alizaci&#xF3;n se requiere para la homeostasis de la varilla, pero no cono, fotorreceptores. Aunque FGFR1 se expresa en tanto la varilla y conos, hemos encontrado que el FGF se&#xF1;alizaci&#xF3;n diferencialmente afectado a la regeneraci&#xF3;n de los fotorreceptores del cono y la varilla en la retina da&#xF1;ada por la luz, con el dominante negativo hsp70: dn-FGFR1 transg&#xE9;n significativamente reprimir regeneraci&#xF3;n varilla fotorreceptor sin que afecta a los conos. Estos datos sugieren que la homeostasis de la barra de fotorreceptores y la regeneraci&#xF3;n es el FGF-dependiente y que los fotorreceptores conos y bastones en el pez cebra adultos est&#xE1;n regulados por diferentes v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n.

FGF se&#xF1;alizaci&#xF3;n regula Rod mantenimiento de las c&#xE9;lulas fotorreceptoras y regeneraci&#xF3;n en el pez cebra

&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B0;&#x521B;&#x5EFA;&#x7684;-Tg(nrd:egfp)/&#x767D;&#x5316;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6591;&#x9A6C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63CF;&#x8FF0; neurod &#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A; neurod &#x6210;&#x4EBA;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D; neurod &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x610F;&#x89C1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x884C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3001; &#x677E;&#x679C;&#x817A;&#x3001; &#x5C0F;&#x8111;&#x3001; &#x55C5;&#x7403;&#x3001; &#x4E2D;&#x8111;&#x3001; &#x540E;&#x8111;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x7BA1;&#x3001; &#x4FA7;&#x7EBF;&#x3001; &#x5185;&#x8033;&#x3001; &#x80F0;&#x3001; &#x80A0;&#xFF0C;&#x3001; &#x9CCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x8F83; nrd:egfp &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; neurod &#x548C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x57FA;&#x4E8E;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x80B2;&#x671F;&#x95F4;&#x663E;&#x793A;&#x7684; nrd:egfp &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0D;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x589E;&#x6B96;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x3002;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;nrd:egfp &#x662F;&#x9010;&#x6E10; re-expressed &#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x8FD9; neurod M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x5728;&#x7956;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5411;&#x5916;&#x6838;&#x5C42;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x65B0;&#x6746;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x5728;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B; nrd:egfp &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5339;&#x914D;&#x7684; neurod&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; Tg(nrd:egfp)/&#x767D;&#x5316;&#x662F;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; neurod &#x8868;&#x60C5;&#x7684;&#x826F;&#x597D;&#x8868;&#x73B0;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316; neurod &#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x5C06;&#x63F4;&#x52A9;&#x8C03;&#x67E5;&#x6307;&#x5BFC;&#x6210;&#x4EBA;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528; Tg(nrd:egfp)/&#x767D;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x884C;&#x6765;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684; neurod &#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

In this study, we used a newly-created transgenic zebrafish, Tg(nrd:egfp)/albino, to further characterize the expression of neurod in the developing and adult retina and to determine neurod expression during adult photoreceptor regeneration. We also provide observations regarding the expression of neurod in a variety of other tissues. In this line, EGFP is found in cells of the developing and adult retina, pineal gland, cerebellum, olfactory bulbs, midbrain, hindbrain, neural tube, lateral line, inner ear, pancreas, gut, and fin. Using immunohistochemistry and in situ hybridization, we compare the expression of the nrd:egfp transgene to that of endogenous neurod and to known retinal cell types. Consistent with previous data based on in situ hybridizations, we show that during retinal development, the nrd:egfp transgene is not expressed in proliferating retinal neuroepithelium, and is expressed in a subset of retinal neurons. In contrast to previous studies, nrd:egfp is gradually re-expressed in all rod photoreceptors. During photoreceptor regeneration in adult zebrafish, in situ hybridization reveals that neurod is not expressed in MÃ¼ller glial-derived neuronal progenitors, but is expressed in photoreceptor progenitors as they migrate to the outer nuclear layer and differentiate into new rod photoreceptors. During photoreceptor regeneration, expression of the nrd:egfp matches that of neurod. We conclude that Tg(nrd:egfp)/albino is a good representation of endogenous neurod expression, is a useful tool to visualize neurod expression in a variety of tissues and will aid investigating the fundamental processes that govern photoreceptor regeneration in adults.

Using the Tg(nrd:egfp)/albino zebrafish line to characterize in vivo expression of neurod.

Dans cette &#xE9;tude, nous avons utilis&#xE9; un nouvellement cr&#xE9;&#xE9; transg&#xE9;nique poisson-z&#xE8;bre, Tg (BDNI: egfp) / albinos, afin de mieux caract&#xE9;riser l&#x26;#39;expression de NeuroD dans la r&#xE9;tine en d&#xE9;veloppement et des adultes et pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;expression NeuroD lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration photor&#xE9;cepteur adulte. Nous fournissons &#xE9;galement des observations concernant l&#x26;#39;expression de NeuroD dans une vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;autres tissus. Dans cette ligne, EGFP se trouve dans les cellules de la r&#xE9;tine en d&#xE9;veloppement et les adultes, la glande pin&#xE9;ale, le cervelet, le bulbe olfactif, le m&#xE9;senc&#xE9;phale, le rhombenc&#xE9;phale, le tube neural, la ligne lat&#xE9;rale, l&#x26;#39;oreille interne, le pancr&#xE9;as, l&#x26;#39;intestin, et la nageoire. Utilisation de l&#x26;#39;immunohistochimie et hybridation in situ, nous comparons l&#x26;#39;expression de la BDNI: transg&#xE8;ne EGFP &#xE0; celle de NeuroD endog&#xE8;ne et &#xE0; conna&#xEE;tre les types de cellules r&#xE9;tiniennes. Conform&#xE9;ment aux donn&#xE9;es ant&#xE9;rieures bas&#xE9;es sur des hybridations in situ, nous montrons que pendant le d&#xE9;veloppement de la r&#xE9;tine, la BDNI: transg&#xE8;ne EGFP n&#x26;#39;est pas exprim&#xE9;e dans la prolif&#xE9;ration neuro&#xE9;pith&#xE9;lium r&#xE9;tinien, et est exprim&#xE9; dans un sous-ensemble de neurones de la r&#xE9;tine. Contrairement aux &#xE9;tudes pr&#xE9;c&#xE9;dentes, la BDNI: EGFP est progressivement re-exprim&#xE9;e dans tous les photor&#xE9;cepteurs b&#xE2;tonnets. Lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration chez le poisson z&#xE8;bre adulte photor&#xE9;cepteur, hybridation in situ r&#xE9;v&#xE8;le que NeuroD n&#x26;#39;est pas exprim&#xE9;e dans l&#x26;#39;arr&#xEA;t M&#xFC;ller d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules gliales prog&#xE9;nitrices neuronales, mais elle est exprim&#xE9;e dans les prog&#xE9;niteurs photor&#xE9;cepteurs comme ils migrent vers la couche nucl&#xE9;aire externe et se diff&#xE9;rencient en photor&#xE9;cepteurs nouvelle tige. Lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration photor&#xE9;cepteur, l&#x26;#39;expression de la BDNI: matchs eGFP que de NeuroD. Nous concluons que Tg (BDNI: egfp) / albinos est une bonne repr&#xE9;sentation de l&#x26;#39;expression NeuroD endog&#xE8;ne, est un outil utile pour visualiser l&#x26;#39;expression NeuroD dans une vari&#xE9;t&#xE9; de tissus et aidera enqu&#xEA;ter sur les processus fondamentaux qui r&#xE9;gissent la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration photor&#xE9;cepteur chez les adultes.

Utilisation de la Tg (BDNI: egfp) / Ligne poisson z&#xE8;bre albinos pour caract&#xE9;riser l&#x26;#39;expression in vivo de NeuroD

In dieser Studie verwendeten wir eine neu erstellte transgene Zebrafisch, Tg(nrd:egfp)/Albino, Ausdruck der Neurod in der Retina entwickeln und Erwachsenen weiter zu charakterisieren und Neurod Ausdruck beim Erwachsenen Photorezeptor regenerieren zu bestimmen. Wir bieten auch Beobachtungen &uuml;ber den Ausdruck der Neurod in einer Vielzahl von anderen Geweben. In dieser Zeile findet sich in den Zellen der Entwicklungs- und Erwachsenen Netzhaut, Zirbeldr&uuml;se, Kleinhirn, Bulbus olfactorius, Mittelhirn, Hinterhirn, Neuralrohr, Seitenlinienorgan, Innenohr, Bauchspeicheldr&uuml;se, Darm und Fin EGFP. Mit Immunhistochemie und in-situ-Hybridisierung, vergleichen wir den Ausdruck der Nrd:egfp-Transgene der endogenen Neurod und bekannten Netzhaut Zelltypen. In &Uuml;bereinstimmung mit fr&uuml;heren Daten basierend auf in-situ-Hybridisierung, wir zeigen, dass w&auml;hrend der retinalen Entwicklung der Nrd:egfp-Transgene dr&uuml;ckt sich nicht in proliferierenden retinalen Neuroepithelium und dr&uuml;ckt sich in einer Teilmenge der Netzhaut Neuronen. Im Gegensatz zu fr&uuml;heren Untersuchungen ist Nrd:egfp in allen Stab Photorezeptoren allm&auml;hlich re-expressed. W&auml;hrend der Photorezeptoren Regenerierung in Erwachsenen Zebrafisch offenbart in situ Hybridisierung, Neurod in M&uuml;ller Gliazellen abgeleitete neuronalen Vorl&auml;uferzellen nicht angegeben, jedoch wird in Photorezeptoren Vorl&auml;uferzellen ausgedr&uuml;ckt, wie sie auf die nukleare Au&szlig;enschicht migrieren und differenzieren sich in neuen Stab Photorezeptoren. W&auml;hrend der Photorezeptoren Regenerierung entspricht Ausdruck der Nrd:egfp dem von Neurod. Wir schlie&szlig;en, dass Tg(nrd:egfp)/Albino eine gute Darstellung der endogenen Neurod Ausdruck ist, ein n&uuml;tzliches Werkzeug ist, Neurod Ausdruck in einer Vielzahl von Geweben zu visualisieren und wird helfen, die grundlegenden Prozesse &uuml;ber den Photorezeptoren Regenerierung bei Erwachsenen untersucht.

Benutzung der Tg(nrd:egfp)/Albino-Zebrafisch-Line in-vivo Ausdruck der Neurod charakterisieren.

In questo studio, abbiamo usato zebrafish transgenici appena creato, Tg(nrd:egfp)/albino, per caratterizzare ulteriormente l&#39;espressione di neurod nella retina in via di sviluppo e adulti e determinare neurod espressione durante la rigenerazione del fotorecettore adulto. Forniamo anche le osservazioni per quanto riguarda l&#39;espressione di neurod in una variet&agrave; di altri tessuti. In questa linea, EGFP si trova nelle cellule della retina in via di sviluppo e dell&#39;adulto, ghiandola pineale, cervelletto, bulbi olfattivi, mesencefalo, hindbrain, tubo neurale, linea laterale, orecchio interno, pancreas, intestino e pinna. Mediante immunoistochimica ed ibridazione in situ, confrontiamo l&#39;espressione del transgene nrd:egfp a quella di neurod endogeni e di tipi di cellule retiniche conosciuto. Coerente con i dati precedenti basati su ibridazioni in situ, ci mostrano che durante lo sviluppo della retina, il transgene nrd:egfp non &egrave; espressa nella proliferazione retinica neuroepithelium e si esprime in un subset di neuroni della retina. A differenza dei precedenti studi, &egrave; gradualmente riespresse in tutti i fotorecettori asta nrd:egfp. Durante la rigenerazione di fotorecettori in zebrafish adulto, ibridazione in situ rivela che neurod non &egrave; espressa in M&uuml;ller glial derivato progenitori neuronali, ma &egrave; espresso in progenitori fotorecettore come migrare verso lo strato nucleare esterno e differenziarsi in nuovi fotorecettori rod. Durante la rigenerazione del fotorecettore, espressione della nrd:egfp corrisponde a quello di neurod. Concludiamo che Tg(nrd:egfp)/albino &egrave; una buona rappresentazione dell&#39;espressione endogena neurod, &egrave; uno strumento utile per visualizzare neurod espressione in una variet&agrave; di tessuti e aiuteranno a indagare i processi fondamentali che regolano la rigenerazione fotorecettore negli adulti.

Utilizzando la riga di zebrafish Tg(nrd:egfp)/albino per caratterizzare l&#39;espressione in vivo di neurod.

&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306B;neurod&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3068;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;neurod&#x5F0F;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;/&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30CE;&#xFF1A;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3001;Tg&#x3092;&#xFF08;EGFP NRD&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;neurod&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x884C;&#x3067;&#x306F;&#x3001;EGFP&#x306F;&#x767A;&#x5C55;&#x9014;&#x4E0A;&#x3068;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x3001;&#x677E;&#x679C;&#x4F53;&#x3001;&#x5C0F;&#x8133;&#x3001;&#x55C5;&#x7403;&#x3001;&#x8133;&#x3001;&#x5F8C;&#x8133;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x3001;&#x5074;&#x7DDA;&#x3001;&#x5185;&#x8033;&#x3001;&#x81B5;&#x81D3;&#x3001;&#x8178;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;neurod&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3068;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7DB2;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3078;&#x306E;EGFP&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF1A;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;NRD&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C1;&#x30E5;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;NRD&#xFF1A;EGFP&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;NRD&#xFF1A;EGFP&#x306F;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x687F;&#x4F53;&#x3067;&#x518D;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x305D;&#x306E;neurod&#x304C;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5916;&#x9846;&#x7C92;&#x5C64;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x687F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;neurod&#x306E;EGFP&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#xFF1A;NRD&#x306E;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Tg&#x304C;&#xFF08;NRD&#xFF1A;EGFP&#xFF09;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;/&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30CE;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;neurod&#x5F0F;&#x306E;&#x826F;&#x3044;&#x8868;&#x73FE;&#x3067;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;neurod&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6210;&#x4EBA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x969B;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neurod&#x306E;in vivo&#x767A;&#x73FE;&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;/&#x30A2;&#x30EB;&#x30D3;&#x30CE;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF1A;Tg&#x3092;&#xFF08;EGFP NRD&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; zebrafish, Tg(nrd:egfp)/&#xC54C; &#xBE44; &#xB178;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; neurod &#xC2DD;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xACE0; &#xC131;&#xC778; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; neurod &#xC2DD;&#xC744; &#xACB0;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; neurod &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; EGFP &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC11C;&#xBE44;&#xC2A4;, &#xB1CC;&#xC758; &#xC1A1;&#xACFC;&#xC120;, &#xC18C; &#xB1CC;, &#xAC15;&#xD55C; &#xC804;&#xAD6C;, midbrain, hindbrain, &#xC2E0;&#xACBD; &#xD29C;&#xBE0C;, &#xCE21;&#xBA74; &#xB77C;&#xC778;, &#xB0B4;&#xAC00;, &#xCDCC; &#xC7A5;, &#xCC3D; &#xC790;, &#xBC0F; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0DD; neurod&#xC758; &#xACE0; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; nrd:egfp transgene&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB0B4; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC804; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; nrd:egfp transgene &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xB9DD;&#xB9C9; neuroepithelium&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; nrd:egfp&#xC740; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC810;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; re-expressed. &#xC131;&#xC778; zebrafish&#xC758; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xADF8; neurod &#xBB90;&#xB7EC; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAD50; &#xC2E0;&#xACBD; progenitors&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC678;&#xBD80; &#xD575; &#xCE35;&#xC744; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xACE0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB300;&#xB1CC;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; progenitors &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; nrd:egfp&#xC758; &#xD45C;&#xD604; neurod&#xB97C; &#xC77C;&#xCE58;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACB0;&#xB860; Tg(nrd:egfp)/&#xC54C; &#xBE44; &#xB178; &#xC0DD; neurod &#xC2DD;&#xC758; &#xC88B;&#xC740; &#xD45C;&#xD604;&#xC778; neurod &#xC2DD; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xB3C4;&#xC6B8; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;.

Neurod vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; Tg(nrd:egfp)/&#xC54C; &#xBE44; &#xB178; zebrafish &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;.

En este estudio, se utiliz&#xF3; una nueva creaci&#xF3;n de pez cebra transg&#xE9;nico, Tg (NRD: EGFP) / albino, para caracterizar mejor la expresi&#xF3;n de NeuroD en la retina en desarrollo y adultos y para determinar la expresi&#xF3;n NeuroD durante la regeneraci&#xF3;n de los fotorreceptores de adultos. Tambi&#xE9;n proporcionar observaciones relativas a la expresi&#xF3;n de NeuroD en una variedad de otros tejidos. En esta l&#xED;nea, EGFP se encuentra en las c&#xE9;lulas de la retina en desarrollo y el adulto, la gl&#xE1;ndula pineal, el cerebelo, bulbo olfatorio, mesenc&#xE9;falo, rombenc&#xE9;falo, el tubo neural, la l&#xED;nea lateral, el o&#xED;do interno, el p&#xE1;ncreas, el intestino, y la aleta. La inmunohistoqu&#xED;mica y la hibridaci&#xF3;n in situ, se compara la expresi&#xF3;n de la NRD: transg&#xE9;n EGFP al de NeuroD end&#xF3;geno y que conocen los tipos de c&#xE9;lulas de la retina. De acuerdo con los datos anteriores sobre la base de hibridaciones in situ, nos muestran que durante el desarrollo de la retina, la NRD: transg&#xE9;n EGFP no se expresa en la proliferaci&#xF3;n de retina neuroepithelium, y se expresa en un subconjunto de neuronas de la retina. En contraste con estudios anteriores, NRD: egfp poco a poco volver a expresarse en todos los fotorreceptores de los bastones. Durante la regeneraci&#xF3;n de los fotorreceptores en adultos de pez cebra, la hibridaci&#xF3;n in situ revela que NeuroD no se expresa en la gl&#xED;a de M&#xFC;ller derivados de progenitores neuronales, sino que se expresa en progenitores de fotorreceptores a medida que migran a la capa nuclear externa y se diferencian en nuevos fotorreceptores de los bastones. Durante la regeneraci&#xF3;n fotorreceptor, la expresi&#xF3;n de la NRD: partidos que eGFP de NeuroD. Se concluye que la Tg (NRD: egfp) / albino es una buena representaci&#xF3;n de expresi&#xF3;n NeuroD end&#xF3;geno, es una herramienta &#xFA;til para visualizar expresi&#xF3;n NeuroD en una variedad de tejidos y ayudar&#xE1; a la investigaci&#xF3;n de los procesos fundamentales que gobiernan la regeneraci&#xF3;n de los fotorreceptores en los adultos.

Uso de la Tg (NRD: EGFP) / L&#xED;nea de pez cebra albina para la Caracterizaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n in vivo de NeuroD

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x975E;&#x51E1;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x518D;&#x751F;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x6709;&#x4E24;&#x79CD;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7528;&#x4E8E;&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D8;&#x6027;&#x6A21;&#x578B;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E38;&#x91CF;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x5149;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x800C;&#x5176;&#x4ED6;&#x4F7F;&#x7528;&#x77ED;&#x53D7;&#x5230;&#x6781;&#x5176;&#x5F3A;&#x70C8;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x76EE;&#x524D;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x578B;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x662F;&#x5426;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x533A;&#x522B;&#x5728;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x635F;&#x574F;&#x6216;&#x968F;&#x540E;&#x518D;&#x751F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x635F;&#x574F;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5F7B;&#x5E95;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E0E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6CBB;&#x7597;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x5DEE;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x89C2;&#x6D4B;&#x5728;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x4E2D;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x8179;&#x524D;&#x540E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x90E8;&#x5206;&#x53D7;&#x5149;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7ED3;&#x5408;&#x77ED;&#x7684;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x4E0D;&#x65AD;&#x7684;&#x660E;&#x4EAE;&#x5149;&#x6CBB;&#x7597;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x6D88;&#x9664;&#x4E86; neuroprotected &#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x6746;&#x548C;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x548C;&#x9C81;&#x68D2;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3002;

&#x591A;&#x4E2A;&#x5149;&#x635F;&#x4F24;&#x8303;&#x5F0F;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x5149;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;

Zebrafish provide an attractive model to study the retinal response to photoreceptor apoptosis due to its remarkable ability to spontaneously regenerate retinal neurons following damage. There are currently two widely-used light-induced retinal degeneration models to damage photoreceptors in the adult zebrafish. One model uses constant bright light, whereas the other uses a short exposure to extremely intense ultraviolet light. Although both models are currently used, it is unclear whether they differ in regard to the extent of photoreceptor damage or the subsequent regeneration response. Here we report a thorough analysis of the photoreceptor damage and subsequent proliferation response elicited by each individual treatment, as well as by the concomitant use of both treatments. We show a differential loss of rod and cone photoreceptors with each treatment. Additionally, we show that the extent of proliferation observed in the retina directly correlates with the severity of photoreceptor loss. We also demonstrate that both the ventral and posterior regions of the retina are partially protected from light damage. Finally, we show that combining a short ultraviolet exposure followed by a constant bright light treatment largely eliminates the neuroprotected regions, resulting in widespread loss of rod and cone photoreceptors and a robust regenerative response throughout the retina.

Characterization of multiple light damage paradigms reveals regional differences in photoreceptor loss.

Poisson-z&#xE8;bre constituent un mod&#xE8;le int&#xE9;ressant pour &#xE9;tudier la r&#xE9;ponse r&#xE9;tinienne &#xE0; l&#x26;#39;apoptose des photor&#xE9;cepteurs en raison de sa remarquable capacit&#xE9; &#xE0; r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer spontan&#xE9;ment neurones de la r&#xE9;tine apr&#xE8;s des dommages. Il existe actuellement deux largement utilis&#xE9;s induits par la lumi&#xE8;re des mod&#xE8;les de d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence r&#xE9;tinienne &#xE0; photor&#xE9;cepteurs des dommages dans le poisson z&#xE8;bre adulte. Un mod&#xE8;le utilise constamment la lumi&#xE8;re vive, tandis que l&#x26;#39;autre utilise une courte exposition &#xE0; la lumi&#xE8;re ultraviolette extr&#xEA;mement intense. Bien que les deux mod&#xE8;les sont actuellement utilis&#xE9;s, il est difficile de savoir si elles diff&#xE8;rent en ce qui concerne l&#x26;#39;&#xE9;tendue des d&#xE9;g&#xE2;ts photor&#xE9;cepteur ou la r&#xE9;ponse la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration ult&#xE9;rieure. Nous rapportons ici une analyse approfondie des dommages photor&#xE9;cepteur et la r&#xE9;ponse subs&#xE9;quente provoqu&#xE9;e par la prolif&#xE9;ration chaque traitement, ainsi que par l&#x26;#39;utilisation concomitante des deux traitements. Nous montrons une perte diff&#xE9;rentielle des photor&#xE9;cepteurs b&#xE2;tonnets et des c&#xF4;nes &#xE0; chaque traitement. En outre, nous montrons que la mesure de la prolif&#xE9;ration observ&#xE9;e dans la r&#xE9;tine est directement corr&#xE9;l&#xE9;e avec la s&#xE9;v&#xE9;rit&#xE9; de la perte de photor&#xE9;cepteurs. Nous d&#xE9;montrons &#xE9;galement que les deux r&#xE9;gions ventrale et post&#xE9;rieure de la r&#xE9;tine sont partiellement prot&#xE9;g&#xE9;s contre les dommages de la lumi&#xE8;re. Enfin, nous montrons que la combinaison d&#x26;#39;une exposition aux ultraviolets de courte suivie d&#x26;#39;un traitement lumi&#xE8;re constante &#xE9;limine en grande partie les r&#xE9;gions neuroprotected, r&#xE9;sultant en une perte g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;e de la tige et des c&#xF4;nes photor&#xE9;cepteurs et une r&#xE9;ponse robuste tout au long de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de la r&#xE9;tine.

Caract&#xE9;risation de multiples paradigmes Light Damage r&#xE9;v&#xE8;le des diff&#xE9;rences r&#xE9;gionales dans la perte de photor&#xE9;cepteurs

Zebrab&auml;rbling bieten ein attraktives Modell die Netzhaut Reaktion auf Photorezeptor Apoptosis durch seine bemerkenswerte F&auml;higkeit, spontan Netzhaut Neuronen nach Sch&auml;den regenerieren zu studieren. Derzeit gibt es zwei Licht-induzierten Netzhautdegeneration verbreiteten Modelle Photorezeptoren in den Erwachsenen Zebrafisch besch&auml;digen. Ein Modell verwendet konstantes helles Licht, w&auml;hrend die andere eine kurze Exposition gegen&uuml;ber &auml;u&szlig;erst intensive UV-Licht verwendet. Obwohl beide Modelle derzeit verwendet werden, ist unklar, ob sie sich im Hinblick auf das Ausma&szlig; der Photorezeptoren Sch&auml;den oder die nachfolgende Regenerierung Antwort unterscheiden. Hier berichten wir eine gr&uuml;ndliche Analyse der Photorezeptoren Schaden und anschlie&szlig;ende Verbreitung Reaktion hervorgerufen durch jede einzelne Behandlung sowie durch die gleichzeitige Anwendung beider Behandlungen. Wir zeigen einen differenziellen Verlust von Rod und Kegel Photorezeptoren mit jeder Behandlung. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir, dass das Ausma&szlig; der Verbreitung in der Netzhaut direkt beobachtet mit der Schwere der Photorezeptoren Verlust korreliert. Wir zeigen auch, dass die ventralen und hinteren Regionen der Netzhaut teilweise vor leichten Besch&auml;digungen gesch&uuml;tzt sind. Schlie&szlig;lich zeigen wir, dass kombinieren eine kurze ultraviolette Belichtung, gefolgt von eine Konstante helle Licht Behandlung weitgehend eliminiert die Neuroprotected Regionen, was weit verbreitete Verlust von Rod und Kegel Photorezeptoren und eine robuste regenerative Reaktion w&auml;hrend der Netzhaut.

Charakterisierung von mehrere leichte Sch&auml;den Paradigmen zeigt regionale Unterschiede in der Photorezeptoren Verlust.

Zebrafish forniscono un modello attraente per studiare la risposta della retina alla apoptosi fotorecettore a causa della sua notevole capacit&agrave; di rigenerare spontaneamente neuroni della retina dopo danni. Ci sono attualmente due modelli diffusi degenerazione retinica indotta da luce ai danni di fotorecettori in the zebrafish adulto. Un modello utilizza luce costante, mentre l&#39;altra utilizza una breve esposizione alla luce ultravioletta estremamente intensa. Sebbene entrambi i modelli sono attualmente utilizzati, non &egrave; chiaro se essi differiscono per quanto riguarda l&#39;entit&agrave; del danno di fotorecettori o la risposta successiva rigenerazione. Qui riportiamo un&#39;analisi approfondita del fotorecettore danno e risposta successiva proliferazione provocata da ogni trattamento individuale, nonch&eacute; con l&#39;uso concomitante di due trattamenti. Vi mostriamo una differenziale perdita dei fotorecettori rod e cono con ogni trattamento. Inoltre, ci mostrano che la misura di proliferazione osservata direttamente nella retina correla con la gravit&agrave; della perdita di fotorecettori. Abbiamo anche dimostrare che le regioni ventrale e posteriore della retina sono parzialmente protetti da danni leggeri. Infine, ci mostra che combinando una breve esposizione ultravioletta seguita da un trattamento di luce luminoso costante in gran parte elimina le regioni neuroprotected, con conseguente perdita diffusa dell&#39;asta e cono fotorecettori e una robusta risposta rigenerativa in tutta la retina.

Caratterizzazione di pi&ugrave; paradigmi danno luce rivela le differenze regionali nella perdita di fotorecettori.

&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x640D;&#x50B7;&#x5F8C;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306B;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3002;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x88AB;&#x5BB3;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5149;&#x8A98;&#x8D77;&#x7DB2;&#x819C;&#x5909;&#x6027;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5F37;&#x70C8;&#x306A;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x306B;&#x77ED;&#x3044;&#x9732;&#x5149;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x73FE;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x3084;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x70B9;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x5FB9;&#x5E95;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x5831;&#x200B;&#x200B;&#x544A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3068;&#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3067;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x8179;&#x5074;&#x3068;&#x5F8C;&#x90E8;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x5149;&#x640D;&#x50B7;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x77ED;&#x3044;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x9732;&#x5149;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x3001;&#x687F;&#x4F53;&#x3068;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x304C;neuroprotected&#x9818;&#x57DF;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x518D;&#x751F;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5149;&#x30C0;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x5149;&#x4F53;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x5DEE;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

Zebrafish &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; apoptosis &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xB2A5;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC131;&#xC778; zebrafish&#xC758; &#xB300;&#xB1CC; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xB450; &#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBCC0;&#xC131; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC0C1;&#xC218; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;, &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC15;&#xB82C;&#xD55C; &#xC790;&#xC678;&#xC120;&#xC5D0; &#xC9E7;&#xC740; &#xB178;&#xCD9C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB450; &#xBAA8;&#xB378; &#xBAA8;&#xB450; &#xD604;&#xC7AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0;, &#xC5EC;&#xBD80; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC190;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC911;&#xC0DD; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC190;&#xC0C1;&#xACFC; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC18;&#xC751; elicited &#xBD80;&#xCC28;&#xC801;&#xC778; &#xB450; &#xD2B8;&#xB9AC; &#xD2B8; &#xBA3C; &#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAC01; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCCA0;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xC11D; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC01; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB300;&#xB1CC;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC94;&#xC704; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC758; &#xBCF5; &#xBD80;&#xC640; &#xD6C4;&#xBD80; &#xC601;&#xC5ED; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xC190;&#xC0C1; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBCC0;&#xD568; &#xC5C6;&#xB294; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB4A4; &#xC9E7;&#xC740; &#xC790;&#xC678;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; neuroprotected &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC5C6;&#xC564;&#xB2E4; &#xB9C9;&#xB300; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xB300;&#xB1CC;&#xC640; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC751;&#xB2F5; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC190;&#xC2E4;.

&#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xC190;&#xC0C1; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC758; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xCC28;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Pez cebra ofrecer un modelo atractivo para estudiar la respuesta de la retina a la apoptosis de fotorreceptores, debido a su notable capacidad de regeneraci&#xF3;n espont&#xE1;nea neuronas de la retina despu&#xE9;s del da&#xF1;o. Actualmente hay dos ampliamente utilizados inducidos por la luz los modelos de degeneraci&#xF3;n de la retina a los fotorreceptores de da&#xF1;o en el pez cebra adulto. Un modelo utiliza una luz brillante constante, mientras que el otro utiliza una corta exposici&#xF3;n a la luz ultravioleta muy intensa. Aunque ambos modelos se utilizan actualmente, no est&#xE1; claro si difieren en cuanto a la extensi&#xF3;n del da&#xF1;o fotorreceptor o la respuesta regeneraci&#xF3;n subsiguiente. Aqu&#xED; se presenta un an&#xE1;lisis detallado de los da&#xF1;os fotorreceptores y la respuesta posterior proliferaci&#xF3;n inducida por cada tratamiento individual, as&#xED; como por el uso concomitante de ambos tratamientos. Nos muestran una p&#xE9;rdida diferencial de fotorreceptores conos y bastones con cada tratamiento. Adem&#xE1;s, nos muestran que el grado de proliferaci&#xF3;n observado en la retina se correlaciona directamente con la severidad de la p&#xE9;rdida de fotorreceptores. Tambi&#xE9;n demuestran que tanto las regiones ventral y posterior de la retina est&#xE1;n parcialmente protegidos de da&#xF1;os luz. Por &#xFA;ltimo, nos muestran que la combinaci&#xF3;n de una exposici&#xF3;n ultravioleta corta seguida de un tratamiento con luz brillante constante elimina en gran medida las regiones neuroprotected, resultando en la p&#xE9;rdida generalizada de la barra y los conos y una s&#xF3;lida respuesta regenerativa a trav&#xE9;s de la retina.

Caracterizaci&#xF3;n de m&#xFA;ltiples paradigmas de da&#xF1;os causados &#x200B;&#x200B;por la luz revela las diferencias regionales en la p&#xE9;rdida de fotorreceptores

A reversed phase gradient ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (UPLC/MS/MS) method has been developed for the analysis of smokeless powders. A total of 20 different components were separated by UPLC and detected by MS/MS in multiple reaction monitoring (MRM) mode. These compounds included diphenylamines, centralites, nitrotoluenes, nitroglycerin, and various phthalates. Simultaneous positive and negative electrospray ionization (ESI) was used along with negative atmospheric pressure chemical ionization (APCI) to detect all compounds in a single analysis. Analysis times were under 8 min with a gradient of 10-73% organic at a flow rate of 0.500 mL/min. With this method, ultraviolet and MRM limits of detection ranging from 0.08 to 2.6 ng and 0.4-64 ng injected were achieved. Commercially available smokeless powders were also extracted with methylene chloride and characterized using the developed UPLC/MS/MS method. The procedure permits the determination of compositional differences between different brands as well as lot-to-lot variations.

Jennifer L. Thomas

Department of Anatomy and Cell Biology

Wayne State University School of Medicine

A Novel Light Damage Paradigm for Use in Retinal Regeneration Studies in Adult Zebrafish

Jennifer L. Thomas

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Anatomy and Cell Biology

Wayne State University School of Medicine

A Novel Light Damage Paradigm for Use in Retinal Regeneration Studies in Adult Zebrafish

Department of Anatomy and Cell Biology