Floral-dip Transformation of <em>Arabidopsis thaliana</em> to Examine <em>pTSO2::&beta;-glucuronidase</em> Reporter Gene Expression

The ability to introduce foreign genes into an organism is the foundation for modern biology and biotechnology. In the model flowering plant Arabidopsis ...

University of Maryland College Park

&#x82B1;&#x5349;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684; ABCE &#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x662F;&#x62EE;&#x6297; A &#x7C7B;&#x548C; C &#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x57FA;&#x7840; A C &#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D; miR172 &#x8868;&#x793A;&#x5185;&#x90E8;&#x82B1;&#x5349;&#x65CB;&#x6DA1;&#x4E2D;&#x51E1;&#x5B83;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7C7B; A &#x57FA;&#x56E0;&#x65E0;&#x74E3;&#x6D77;&#x6851; 2 (AP2)&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x4EC0;&#x4E48;&#x63A7;&#x5236; miR172 &#x8FD9;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5185;&#x7684;&#x87BA;&#x7EB9;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6D1B;&#x4F0A;&#x5C3C;&#x5E0C; &#xFF08;&#x8033;&#xFF09; &#x548C;&#x82CF;&#x65AF;&#x535A;&#x58EB; &#xFF08;&#x7FFB;&#x8F6C;&#xFF09; &#x5171;&#x6291;&#x5236;&#x5B50;&#x538B;&#x5236; miR172 &#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x5916;&#x7684;&#x65CB;&#x6DA1;&#x4E2D;&#x7684; A.&#x5357;&#x82A5;&#x82B1;&#x3002;MiR172 &#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x8033;/&#x7FFB;&#x8F6C;&#x7684;&#x62DB;&#x52DF;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56; AP2&#xFF0C;&#x6697;&#x793A; AP2 &#x538B;&#x6291;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x7684; microRNA &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5E95;&#x5C42;&#x7684; A C &#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x53CA;&#x9610;&#x660E; miR172 &#x82B1;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x65B0;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;

&#x6D1B;&#x4F0A;&#x5C3C;&#x5E0C;&#x548C;&#x82CF;&#x65AF;&#x535A;&#x58EB;&#x5171;&#x6291;&#x5236;&#x5B50;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x82B1; miR172 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

Central to the ABCE model of flower development is the antagonistic interaction between class A and class C genes. The molecular mechanisms underlying the A-C antagonism are not completely understood. In Arabidopsis thaliana, miR172 is expressed in the inner floral whorls where it downregulates the class A gene APETALA 2 (AP2). However, what controls this predominantly inner whorl-specific expression of miR172 is not known. We show that the LEUNIG (LUG) and SEUSS (SEU) co-repressors repress miR172 expression in the outer whorls of A. thaliana flowers. The recruitment of LUG/SEU to the miR172 promoters is dependent on AP2, suggesting that AP2 represses the expression of its cognate microRNA. Our study provides new insights into the molecular mechanisms underlying the A-C antagonism and shed light on the transcriptional regulation of miR172 during flower development.

LEUNIG and SEUSS co-repressors regulate miR172 expression in Arabidopsis flowers.

Centrale au mod&#xE8;le ABCE du d&#xE9;veloppement des fleurs est l&#x26;#39;interaction antagoniste entre la classe A et les g&#xE8;nes de classe C. Les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui sous-tendent l&#x26;#39;antagonisme AC ne sont pas compl&#xE8;tement compris. Chez Arabidopsis thaliana, miR172 est exprim&#xE9;e dans les verticilles floraux int&#xE9;rieurs o&#xF9; il r&#xE9;gule &#xE0; la baisse de la classe A apetala g&#xE8;ne 2 (AP2). Toutefois, ce contr&#xF4;le cette pr&#xE9;dominance int&#xE9;rieure verticille-expression sp&#xE9;cifique de miR172 n&#x26;#39;est pas connue. Nous montrons que la LEUNIG (LUG) et Seuss (SEU) co-r&#xE9;presseurs de r&#xE9;primer l&#x26;#39;expression miR172 dans les verticilles ext&#xE9;rieurs de fleurs chez A. thaliana. Le recrutement du LUG / SEU aux miR172 promoteurs d&#xE9;pend AP2, ce qui sugg&#xE8;re que AP2 r&#xE9;prime l&#x26;#39;expression de son microARN apparent&#xE9;. Notre &#xE9;tude apporte un nouvel &#xE9;clairage sur les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui sous-tendent l&#x26;#39;antagonisme AC et faire la lumi&#xE8;re sur la r&#xE9;gulation transcriptionnelle de miR172 pendant la floraison.

LEUNIG et SEUSS co-r&#xE9;presseurs R&#xE9;glementer MiR172 expression en fleurs d&#x26;#39;Arabidopsis

Dem ABCE-Modell der Blume-Entwicklung im Mittelpunkt steht die antagonistische Wechselwirkung zwischen der Klasse A und Klasse-C-Gene. Die molekularen Mechanismen des A-C-Antagonismus werden nicht v&ouml;llig verstanden. In Arabidopsis Thaliana, miR172 dr&uuml;ckt sich in die inneren floralen Quirlen wo es Downregulates der Klasse-A-Gen APETALA 2 (AP2). Jedoch ist was steuert diese &uuml;berwiegend innere Quirl-spezifischen Ausdruck der miR172 nicht bekannt. Wir zeigen, dass die LEUNIG (LUG) und SEUSS (SEU) Co-repressors miR172 Ausdruck in den &auml;u&szlig;eren Quirlen von A. Thaliana Blumen zu unterdr&uuml;cken. Die Rekrutierung von LUG/SEU an die Projekttr&auml;ger miR172 h&auml;ngt AP2, darauf hindeutet, dass AP2 Ausdruck seiner Verwandten MicroRNA unterdr&uuml;ckt. Unsere Studie liefert neue Erkenntnisse &uuml;ber die molekularen Mechanismen zugrunde liegen den A-C-Antagonismus und Aufschluss &uuml;ber die transkriptionelle Regulation der miR172 w&auml;hrend der Blume-Entwicklung.

LEUNIG und SEUSS Co-repressors Regeln miR172 Ausdruck in Arabidopsis Blumen.

Centrale al modello di sviluppo del fiore ABCE &egrave; l&#39;interazione antagonistica tra classe A e classe C geni. I meccanismi molecolari sottostanti l&#39;antagonismo A-C non sono completamente chiari. In Arabidopsis thaliana, miR172 &egrave; espresso nei verticilli floreali interiore dove esso sottoregola la classe A gene APETALA 2 (AP2). Tuttavia, ci&ograve; che controlla questa espressione prevalentemente interna whorl specifici di miR172 non conosciuto. Mostriamo che la co-repressors LEUNIG (LUG) e SEUSS (SEU) reprimere miR172 espressione nell&#39;esterni verticilli di fiori di a. thaliana. L&#39;assunzione di LUG/SEU i promotori di miR172 dipende dalla AP2, suggerendo che AP2 reprime l&#39;espressione delle sue cognata microRNA. Il nostro studio fornisce nuove intuizioni i meccanismi molecolari sottostanti l&#39;antagonismo A-C e far luce sulla regolazione trascrizionale del miR172 durante lo sviluppo del fiore.

Co-repressors LEUNIG e SEUSS regolano l&#39;espressione miR172 in Arabidopsis fiori.

&#x82B1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;ABCE&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3068;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;C&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; AC&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;miR172&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;APETALA 2&#xFF08;AP2&#xFF09;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x82B1;&#x306E;&#x6E26;&#x5DFB;&#x304D;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4F55;&#x304C;miR172&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4E3B;&#x306B;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x6E26;&#x5DFB;&#x304D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;&#x82B1;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x6E26;&#x5DFB;&#x304D;&#x3067;&#x305D;&#x306E;LEUNIG&#xFF08;LUG&#xFF09;&#x3068;&#x30B9;&#x30FC;&#x30B9;&#xFF08;SEU&#xFF09;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;miR172&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; miR172&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;LUG / SEU&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x306F;&#x3001;AP2&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;RNA&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;AP2&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;AC&#x5BFE;&#x7ACB;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x82B1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;miR172&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x5149;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x3002;

LEUNIG&#x3068;&#x30B9;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;&#x82B1;&#x306E;MiR172&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

&#xAF43; &#xAC1C;&#xBC1C; ABCE &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; A&#xC640; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; C &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC04;&#xC758; &#xB300;&#xB9BD; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. &#xAE30;&#xBCF8; A C &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Arabidopsis thaliana miR172 &#xB0B4;&#xBD80; &#xAF43; whorls&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xAC83; downregulates &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; A &#xC720;&#xC804;&#xC790; APETALA 2 (AP2). &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, Mir172&#xC774; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC724; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xAD00;&#xB828; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; LEUNIG (&#xB7EC; &#xADF8;)&#xC640; &#xC218; &#xC2A4; (SEU) co-repressors A. thaliana &#xAF43;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; whorls&#xC5D0; miR172 &#xC2DD; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB7EC; &#xADF8;/SEU miR172 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC744; &#xBAA8;&#xC9D1; AP2, AP2 &#xB204;&#xB974;&#xB294; &#xADF8; &#xB3D9;&#xC871; Microrna&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAE30;&#xBCF8; A C &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xACFC; &#xAF43; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Mir172&#xC758; transcriptional &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

LEUNIG &#xACE0; &#xC218; &#xC2A4; co-repressors Arabidopsis &#xAF43;&#xC5D0; miR172 &#xC2DD; &#xADDC;&#xC81C;.

Central para el modelo de desarrollo de la flor ABCE es la interacci&#xF3;n antag&#xF3;nica entre la clase A y clase C genes. Los mecanismos moleculares que subyacen en el antagonismo de CA no se entienden completamente. En Arabidopsis thaliana, miR172 se expresa en los verticilos florales interiores donde downregulates la clase A APETALA gen 2 (AP2). Sin embargo, lo que controla este predominantemente interior verticilo expresi&#xF3;n espec&#xED;fica de miR172 no se conoce. Se demuestra que la Leunig (LUG) y Seuss (SEU), co-represores reprime miR172 expresi&#xF3;n en los verticilos exteriores de las flores de A. thaliana. La contrataci&#xF3;n de LUG / SEU a los promotores miR172 depende de AP2, lo que sugiere que AP2 reprime la expresi&#xF3;n de su microARN afines. Nuestro estudio proporciona nuevos conocimientos sobre los mecanismos moleculares que subyacen el antagonismo de CA y arrojar luz sobre la regulaci&#xF3;n transcripcional de miR172 durante el desarrollo de la flor.

Boyana Grigorova

Department of Cell Biology and Molecular Genetics

University of Maryland College Park

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::β-glucuronidase Reporter Gene Expression

Boyana Grigorova

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Cell Biology and Molecular Genetics

University of Maryland College Park

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::β-glucuronidase Reporter Gene Expression

Department of Cell Biology and Molecular Genetics