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A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics

The fast-growing biopharmaceutical industry demands speedy development of highly efficient and reliable production systems to meet the increasing ...

Merck & Co., Inc

&#x9176;&#x8054;&#x514D;&#x75AB;&#x5438;&#x9644;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x3002;

ELISA measurement of interferons.

Mesure de ELISA d&#39;interf&eacute;rons.

ELISA-Messung von Interferonen.

Misurazione di ELISA di interferoni.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E; ELISA &#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3002;

ELISA interferons&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Medici&oacute;n de ELISA de los interferones.

Heteropolymer (HP) &#x662F;&#x7531;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x4EA4;&#x8054;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53; &#xFF08;Mab&#xFF09; &#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x53CC;&#x6297;&#x4F53;&#x5171;&#x8F6D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x51C0;&#x5316;&#x9AD8;&#x538B;&#x94A0;&#x706F;&#x4F7F;&#x7528;&#x758F;&#x6C34;&#x5C42;&#x6790; (HIC)&#x3002;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E19; HIC &#x6811;&#x8102; &#xFF1B;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x4E86; [PolyPropyl A &#x548C; EMD Fractogel &#x4E19;&#x916F; (S)]&#x3002;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x7F13;&#x51B2;&#x3001; ph &#x503C; 6.5 &#x542B;&#x6709;&#x786B;&#x9178;&#x94F5;&#x6216;&#x786B;&#x9178;&#x94A0;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5217;&#x7684; HP&#x3002;&#x964D;&#x5E8F;&#x786B;&#x9178;&#x6E10;&#x53D8;&#x6216;&#x6B65;&#x6E10;&#x53D8;&#x7528;&#x4E8E;&#x6790;&#x51FA;&#x5217;&#x4E2D;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; HP &#x7269;&#x79CD;&#x3002;HP &#x53CD;&#x5E94;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x901A;&#x5E38;&#x5305;&#x542B;&#x591A;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;HP &#x5171;&#x8F6D;&#x4EE5;&#x53CA;&#x672A;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x5355;&#x4F53;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x5171;&#x8F6D;&#x7684; HP &#x4EA7;&#x54C1;&#x6210;&#x529F;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x4E0E;&#x786B;&#x9178;&#x94F5;&#x4E24;&#x4E19;&#x916F;&#x6811;&#x8102;&#x4ECE;&#x672A;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x5355;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x4ECE;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x4F7F;&#x7528;&#x786B;&#x9178;&#x94A0;&#x7684; HP &#x7684;&#x5355;&#x4F53;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x975E;&#x4EA4;&#x53C9;&#x94FE;&#x63A5;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5217;&#x6CA1;&#x6709;&#x88AB;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x6811;&#x8102;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5217;&#x7684;&#x4EA4;&#x8054;&#x7684;&#x6297;&#x4F53; &#xFF08;HP &#x4EA7;&#x54C1;&#xFF09; &#x540E;&#x6765;&#x88AB;&#x6D17;&#x8131;&#x901A;&#x8FC7;&#x964D;&#x4F4E;&#x8FD0;&#x884C;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x4E2D;&#x7684;&#x786B;&#x9178;&#x94F5;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;HP &#x4EA7;&#x54C1;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x4E0E;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x81EA;&#x7531;&#x4EE5;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x5236;&#x5907;&#x7684;&#x89C4;&#x6A21;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E19; HIC &#x6811;&#x8102;&#x7684;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;

&#x7EAF;&#x5316;&#x6297;&#x4F53; heteropolymers &#x758F;&#x6C34;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x3002;

A heteropolymer (HP) is a unique dual antibody conjugate composed of specific, chemically cross-linked monoclonal antibodies (mAbs). In this study we have demonstrated that HPs can be purified using hydrophobic interaction chromatography (HIC). Two propyl HIC resins; [PolyPropyl A and EMD Fractogel Propyl (S)] were evaluated in this study. Phosphate buffers, pH 6.5 containing ammonium sulfate or sodium sulfate were used to bind the HP to the column. A descending sulfate gradient or step gradient was used to elute the bound HP species from the column. The HP reaction mixture typically contains multiple conjugated HP species, as well as unreacted monomer mAbs. Conjugated HP product was successfully separated from unreacted antibody monomers with both propyl resins using buffers with ammonium sulfate. There was no monomer separation from HP using buffers with sodium sulfate. The purification processes, presented in this study allows the non-cross-linked antibodies to pass through the column without being bound to the resin, while the cross-linked antibodies (the HP product) bound to the column were subsequently eluted by decreasing the ammonium sulfate concentration in the running buffer. HP product was efficiently separated from free mAbs using Propyl HIC resins at both analytical and preparative scales.

Purification of antibody heteropolymers using hydrophobic interaction chromatography.

Une h&eacute;t&eacute;ropolym&egrave;re (HP) est un conjugu&eacute; d&#39;anticorps double unique compos&eacute; d&#39;anticorps monoclonaux sp&eacute;cifiques, r&eacute;ticul&eacute; chimiquement (mAbs). Dans cette &eacute;tude, nous avons d&eacute;montr&eacute; que les HPs peuvent &ecirc;tre purifi&eacute;s &agrave; l&#39;aide de la chromatographie hydrophobe (HIC). Deux r&eacute;sines HIC de propyle ; [Polypropyl&egrave;ne A et EMD Fractogel Propyl (S)] ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s dans cette &eacute;tude. Tampons phosphate, pH 6.5 contenant du sulfate d&#39;ammonium ou le sulfate de sodium ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour lier le HP &agrave; la colonne. Un gradient d&eacute;croissant de sulfate ou le gradient de l&#39;&eacute;tape a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour &eacute;luer les esp&egrave;ces d&eacute;pendant de HP de la colonne. Le m&eacute;lange r&eacute;actionnel HP contient g&eacute;n&eacute;ralement plusieurs esp&egrave;ces de HP conjugu&eacute;s, ainsi que mAbs monom&egrave;re inalt&eacute;r&eacute;. Produit HP conjugu&eacute; a &eacute;t&eacute; avec succ&egrave;s s&eacute;par&eacute; de monom&egrave;res d&#39;anticorps n&#39;a pas r&eacute;agi avec les deux r&eacute;sines de propyle &agrave; l&#39;aide de tampons avec du sulfate d&#39;ammonium. Il n&#39;y n&#39;avait aucune s&eacute;paration de monom&egrave;re de HP &agrave; l&#39;aide de tampons avec du sulfate de sodium. Les processus de purification, pr&eacute;sent&eacute;s dans cette &eacute;tude permet les anticorps non r&eacute;ticul&eacute; &agrave; passer &agrave; travers la colonne sans &ecirc;tre li&eacute; &agrave; la r&eacute;sine, tandis que les anticorps r&eacute;ticul&eacute;s (le produit HP) li&eacute;s &agrave; la colonne sont ensuite &eacute;lu&eacute;s par diminution de la concentration de sulfate d&#39;ammonium dans le tampon en cours d&#39;ex&eacute;cution. Produit HP a &eacute;t&eacute; efficacement s&eacute;par&eacute; du mAbs libres utilisant des r&eacute;sines de propyle HIC &agrave; l&#39;&eacute;chelle pr&eacute;parative et analytiques.

Purification d&#39;anticorps h&eacute;t&eacute;ropolym&egrave;res chromatographie d&#39;interactions hydrophobes.

Ein Heteropolymer (HP) ist eine einzigartige dual Antik&ouml;rper konjugiert bestehend aus bestimmten, chemisch vernetzte monoklonale Antik&ouml;rper (mAbs). In dieser Studie haben wir gezeigt, dass HPs mit hydrophobe Interaktion Chromatographie (HIC) gereinigt werden k&ouml;nnen. Zwei Propyl HIC Harze; [PolyPropyl A und EMD Fractogel Propyl (S)] wurden in dieser Studie evaluiert. Phosphat-Puffer, pH 6.5 mit Ammoniumsulfat oder Natriumsulfat dienten die HP an die Spalte zu binden. Eine absteigende Sulfat Farbverlauf oder einen Schritt Verlauf wurde verwendet, um die gebundenen HP-Arten aus der Spalte zu eluieren. Das Reaktionsgemisch HP enth&auml;lt normalerweise mehrere konjugierte HP-Arten sowie Spurenverunreinigungen Monomer mAbs. Konjugierte HP-Produkt wurde erfolgreich von Spurenverunreinigungen Antik&ouml;rper Monomere mit beiden Propyl-Harzen mit Puffer mit Ammonsulfat getrennt. Es gab keine Monomer-Trennung von HP mit Puffer mit Natriumsulfat. Die Reinigungsverfahren, die in dieser Studie vorgestellt erm&ouml;glicht die Kreuz-chromosomale Antik&ouml;rper, ohne an das Harz gebunden wird, w&auml;hrend die vernetzte Antik&ouml;rper (das HP-Produkt) an die Spalte gebunden anschlie&szlig;end durch eine Verringerung der Ammonium-Sulfat-Konzentration im laufenden Puffer eluiert wurden durch die Spalte &uuml;bergeben. HP Produkt wurde vom freien mAbs pr&auml;parative und Analytische Waage Propyl HIC Harze mit effizient abgetrennt.

Reinigung von Antik&ouml;rper-Heteropolymers mit hydrophobe Interaktion Chromatographie.

Un heteropolymer (HP) &egrave; un unico doppio anticorpo coniugato composto specifici, reticolati chimicamente anticorpi monoclonali (mAbs). In questo studio abbiamo dimostrato che HPs pu&ograve; essere purificato mediante cromatografia di interazione idrofobica (HIC). Due resine di propile HIC; [PolyPropyl A ed EMD Fractogel propilico (S)] sono stati valutati in questo studio. Buffer fosfato, pH 6.5 contenente solfato di ammonio o solfato di sodio sono stati utilizzati per associare l&#39;HP per la colonna. Un gradiente decrescente di solfato o gradiente di passaggio &egrave; stato utilizzato per eluire la specie HP vincolato dalla colonna. La miscela di reazione HP contiene in genere pi&ugrave; coniugati HP specie, cos&igrave; come monomero non reagiti mAbs. Coniugati HP prodotto con successo &egrave; stato separato dai monomeri non reagiti anticorpo con entrambe le resine propile utilizzando tamponi con solfato di ammonio. Non non c&#39;era nessuna separazione di monomero da HP utilizzando tamponi con solfato di sodio. I processi di purificazione, presentati in questo studio permette gli anticorpi non cross-linked passare attraverso la colonna senza essere vincolato alla resina, mentre gli anticorpi Cross-Linked (il prodotto HP) associati alla colonna sono stati successivamente eluiti diminuendo la concentrazione di solfato dell&#39;ammonio nel buffer in esecuzione. HP prodotto efficiente fu separata da mAbs gratis utilizzando resine di propile HIC a bilance analitiche e preparative.

Purificazione dell&#39;anticorpo heteropolymers mediante cromatografia di interazione idrofobica.

Heteropolymer &#xFF08;HP&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x67B6;&#x6A4B;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53; (Mab) &#x306E;&#x4F5C;&#x66F2;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x5171;&#x5F79;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; (HIC) &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; HPs &#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB; HIC &#x6A39;&#x8102;;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F; [PolyPropyl A &#x3068; EMD Fractogel &#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB; (S)] &#x306B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;, pH 6.5 &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x786B;&#x9178;&#x30A2;&#x30F3;&#x30E2;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x3084;&#x786B;&#x9178;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;HP &#x3092;&#x5217;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x964D;&#x9806;&#x786B;&#x9178;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5217;&#x304B;&#x3089;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; HP &#x7A2E;&#x6EB6;&#x51FA;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;HP &#x53CD;&#x5FDC;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x306B;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5171;&#x5F79; HP &#x7A2E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x672A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E; Mab &#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5171;&#x5F79; HP &#x88FD;&#x54C1;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x786B;&#x9178;&#x30A2;&#x30F3;&#x30E2;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4E21;&#x65B9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB;&#x6A39;&#x8102;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x672A;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x533A;&#x5207;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x786B;&#x9178;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; HP &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x6D44;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9; &#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x5217;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x67B6;&#x6A4B;&#x6297;&#x4F53; (HP &#x88FD;&#x54C1;) &#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x5B9F;&#x884C;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x4E2D;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30E2;&#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x786B;&#x9178;&#x5869;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6EB6;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x6A39;&#x8102;&#x306B;&#x7E1B;&#x3089;&#x308C;&#x305A;&#x5217;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6E21;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HP &#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30EB; HIC &#x6A39;&#x8102;&#x3067;&#x5206;&#x6790;&#x30FB;&#x5206;&#x53D6;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7121;&#x6599;&#x306E; Mab &#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6297;&#x4F53; heteropolymers &#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x3002;

Heteropolymer (HP)&#xC740; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xD56D; &#xCCB4; &#xACF5;&#xC561; &#xD2B9;&#xC815;, &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xD574;&#xC62C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; (mAbs)&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; HPs &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (HIC)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC21C;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; HIC &#xC218; &#xC9C0;; [PolyPropyl A &#xBC0F; EMD Fractogel &#xD504;&#xB85C;&#xD544; (S)]&#xC774;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xBC84;&#xD37C;, pH 6.5 &#xD3EC;&#xD568; &#xD669;&#xC0B0; &#xB610;&#xB294; &#xD669;&#xC0B0; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;&#xC740; HP &#xC5F4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB0B4;&#xB9BC;&#xCC28;&#xC21C; &#xD669;&#xC0B0; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xACC4; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xC5F4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; HP &#xC885; elute &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. HP &#xBC18;&#xC751; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC885;, HP &#xD65C;&#xC6A9;&#xB41C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; unreacted &#xBAA8;&#xB178; &#xBA38; Mabs&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC6A9;&#xB41C; HP &#xC81C;&#xD488; &#xD669;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC84;&#xD37C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB450; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xC218; &#xC9C0;&#xC640; unreacted &#xD56D; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD669;&#xC0B0; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC84;&#xD37C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; HP&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4; &#xBD84;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC5F4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xD574;&#xC62C;&#xB41C; &#xCCB4; (HP &#xC81C;&#xD488;) &#xC2E4;&#xD589; &#xBC84;&#xD37C;&#xC5D0; &#xD669;&#xC0B0; &#xB18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xCF1C; eluted &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;, &#xC218; &#xC9C0;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC5B4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC5F4; &#xD1B5;&#xACFC; &#xAC04; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HP &#xC81C;&#xD488; &#xBB34;&#xB8CC; mAbs Propyl HIC &#xC218; &#xC9C0;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xB9AC;&#xC810; &#xBE44;&#xB298;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD56D; &#xCCB4; heteropolymers&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Un caset (HP) es un conjugado de anticuerpo dual &uacute;nica compuesto por los anticuerpos monoclonales espec&iacute;ficos, qu&iacute;micamente reticulados (mAbs). En este estudio hemos demostrado que HPs pueden ser purificadas mediante cromatograf&iacute;a de interacci&oacute;n hidr&oacute;foba (HIC). Dos propil HIC resinas; [PolyPropyl A y EMD Fractogel propilo (S)] fueron evaluados en este estudio. B&uacute;feres de fosfato, pH 6.5 que contiene sulfato de amonio o sulfato de sodio fueron utilizados para atar los caballos de fuerza a la columna. Un gradiente descendente de sulfato o gradiente de paso sirvi&oacute; para eluir las especies HP encuadernadas de la columna. La mezcla de reacci&oacute;n de HP normalmente contiene m&uacute;ltiples especies conjugadas de HP, as&iacute; como mon&oacute;mero no reaccionado mAbs. Producto de HP conjugado con &eacute;xito fue separado de mon&oacute;meros de anticuerpo con ambas resinas de propilo utilizando tampones con sulfato de amonio. No hab&iacute;a separaci&oacute;n mon&oacute;mero de HP utilizando tampones con sulfato de sodio. Los procesos de purificaci&oacute;n, presentados en este estudio permite que los anticuerpos no-cruz-ligado a atravesar la columna sin quedar obligados a la resina, mientras que los anticuerpos reticulados (el producto HP) enlazados a la columna se eluyen posteriormente al disminuir la concentraci&oacute;n de sulfato de amonio en el b&uacute;fer de corriente. Producto HP eficientemente fue separado de mAbs gratis utilizando resinas de propilo HIC en escalas tanto anal&iacute;ticas y preparativas.

Purificaci&oacute;n de anticuerpos heteropolymers utilizando cromatograf&iacute;a de interacci&oacute;n hidr&oacute;foba.

&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x529B;&#x662F;&#x6781;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x836F;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x5236;&#x9020;&#x3002;&#x5F97;&#x4EE5;&#x987A;&#x5229;&#x63A8;&#x884C;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x589E;&#x52A0;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4F18;&#x5316;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x5411;&#x91CF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x4EA7;&#x91CF;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x4EA7;&#x91CF;&#x3002;&#x5F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x91CD;&#x578B;&#x548C;&#x8F7B;&#x578B;&#x94FE;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x65F6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8F6C;&#x67D3;&#x3002;&#x9AD8;&#x67B6;&#x91CD;&#x94FE; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x662F;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x589E;&#x5F3A; mRNA &#x7A33;&#x5B9A;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x4E5F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x7A33;&#x5B9A;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x3002;

&#x5728; CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; mRNA &#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#xFF1A; &#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F18;&#x5316;&#x6539;&#x8FDB;&#x3002;

The productivity of stably transfected cell lines is of critical importance for the manufacturing of therapeutic proteins. Various methods have been successfully implemented to increase the production output of mammalian cell cultures. Increasing evidence suggests that optimization of the gene coding sequences of an expression vector can improve specific cell line yield of the recombinant protein. Here we demonstrate that gene optimization substantially enhances antibody production in Chinese hamster ovary cells. When gene optimization was applied to the heavy and light chain genes of a therapeutic antibody, we observed increased antibody production in transient transfection. Elevated heavy chain mRNA level was associated with the increase of antibody production. Further analysis suggested that the increased antibody expression is attributable to enhanced mRNA stability resulting from gene optimization. Gene optimization also led to increased antibody production in stable clones.

mRNA stability and antibody production in CHO cells: improvement through gene optimization.

La productivit&#xE9; des lign&#xE9;es cellulaires transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable est d&#x26;#39;une importance critique pour la fabrication de prot&#xE9;ines th&#xE9;rapeutiques. Diverses m&#xE9;thodes ont &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;es avec succ&#xE8;s pour augmenter le rendement de production des cultures de cellules de mammif&#xE8;res. Plus en plus &#xE9;vident que l&#x26;#39;optimisation du g&#xE8;ne codant des s&#xE9;quences d&#x26;#39;un vecteur d&#x26;#39;expression peut am&#xE9;liorer le rendement sp&#xE9;cifique lign&#xE9;e cellulaire de la prot&#xE9;ine recombinante. Ici, nous d&#xE9;montrons que l&#x26;#39;optimisation du g&#xE8;ne am&#xE9;liore sensiblement la production d&#x26;#39;anticorps dans ovariennes de hamster chinois. Lorsque l&#x26;#39;optimisation du g&#xE8;ne a &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;e aux g&#xE8;nes des cha&#xEE;nes lourdes et l&#xE9;g&#xE8;res d&#x26;#39;un anticorps th&#xE9;rapeutique, nous avons observ&#xE9; la production d&#x26;#39;anticorps a augment&#xE9; en transfection transitoire. Elevated niveau ARNm de la cha&#xEE;ne lourde a &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;augmentation de la production d&#x26;#39;anticorps. Une analyse plus pouss&#xE9;e sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;anticorps accrue est attribuable &#xE0; la stabilit&#xE9; des ARNm accrue r&#xE9;sultant de l&#x26;#39;optimisation des g&#xE8;nes. L&#x26;#39;optimisation Gene a &#xE9;galement conduit &#xE0; la production d&#x26;#39;anticorps a augment&#xE9; dans des clones stables.

Stabilit&#xE9; de l&#x26;#39;ARNm et la production d&#x26;#39;anticorps dans des cellules CHO: Am&#xE9;lioration g&#xE9;n&#xE9;tique gr&#xE2;ce &#xE0; l&#x26;#39;optimisation

Die Produktivit&auml;t der Stabil transfizierte Zellinien ist von entscheidender Bedeutung f&uuml;r die Herstellung von therapeutischen Proteinen. Verschiedene Methoden wurden erfolgreich umgesetzt, um die Produktionsleistung der S&auml;ugetier-Zellkulturen zu erh&ouml;hen. Zunehmender Beweis schl&auml;gt die Optimierung im Gen Sequenzen eines Ausdrucks Vektor kann bestimmte Zelle Zeile Ausbeute des rekombinanten Proteins zu verbessern. Hier zeigen wir, dass dieses Gen-Optimierung Antik&ouml;rperproduktion in chinesischen Hamsterzellen Eierstock erheblich verbessert. Beim gen-Optimierung auf die schwere und leichte Kette Gene ein therapeutischer Antik&ouml;rper angewendet wurde, beobachteten wir erh&ouml;hte Antik&ouml;rper-Produktion in transiente Transfektion. Erh&ouml;hten schwere Kette mRNA-Ebene war verbunden mit der Zunahme der Produktion von Antik&ouml;rpern. Weitere Analyse vorgeschlagen, dass der erh&ouml;hte Antik&ouml;rper-Ausdruck auf erh&ouml;hte mRNA Stabilit&auml;t aus gen Optimierung zur&uuml;ckzuf&uuml;hren ist. Gen Optimierung f&uuml;hrte zu erh&ouml;hte Antik&ouml;rper-Produktion in stabile Klone.

Stabilit&auml;t und Antik&ouml;rper-Produktion von mRNA in CHO-Zellen: Verbesserung durch Gen-Optimierung.

La produttivit&agrave; delle linee cellulari stabile transfected &egrave; di fondamentale importanza per la produzione di proteine terapeutiche. Vari metodi sono stati implementati con successo per aumentare la produzione di colture di cellule di mammifero. Crescente evidenza suggerisce che l&#39;ottimizzazione del gene che codifica le sequenze di un&#39;espressione vettoriale pu&ograve; migliorare la resa linea cella specifica della proteina ricombinante. Qui dimostriamo che ottimizzazione gene sostanzialmente aumenta la produzione dell&#39;anticorpo in cellule di ovaio di criceto cinese. Quando l&#39;ottimizzazione del gene &egrave; stata applicata ai geni di un anticorpo terapeutico catena pesante e leggera, abbiamo osservato produzione aumentata dell&#39;anticorpo nella trasfezione transiente. Livello di mRNA elevata catena pesante &egrave; stato associato con l&#39;aumento della produzione di anticorpi. Un&#39;ulteriore analisi ha suggerito che l&#39;espressione aumentata dell&#39;anticorpo &egrave; attribuibile ad una maggiore stabilit&agrave; del mRNA derivanti dall&#39;ottimizzazione del gene. Ottimizzazione del gene ha portato anche alla produzione aumentata dell&#39;anticorpo nei cloni stabili.

produzione di mRNA stabilit&agrave; e anticorpo nelle cellule CHO: miglioramento attraverso l&#39;ottimizzazione del gene.

&#x5B89;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x306F;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x88FD;&#x9020;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x91CF;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9F;&#x88C5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B69;&#x7559;&#x307E;&#x308A;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x7528;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x9396;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8EFD;&#x9396;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x305F;&#x91CD;&#x9396;mRNA&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x200B;&#x200B;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x767A;&#x73FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;mRNA&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x306A;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

CHO&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;mRNA&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6297;&#x4F53;&#x7523;&#x751F;&#xFF1A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6539;&#x5584;

&#xC548;&#xC815;&#xC801; transfected &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC131; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xB7C9; &#xC99D;&#xAC00;&#xB97C; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xD604; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xC81C;&#xC548; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCA1;&#xD130; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC218;&#xC728;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB294; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xBB34; &#xAC81; &#xACE0; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xC0AC;&#xC2AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xACFC;&#xB3C4; transfection&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; &#xC99D;&#xAC00; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC2DD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; mRNA &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD558;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD074;&#xB860;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC8FC;&#xB3C4;.

&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; mRNA &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;: &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC1C;&#xC120;.

La productividad de las l&#xED;neas celulares transfectadas establemente es de importancia cr&#xED;tica para la fabricaci&#xF3;n de prote&#xED;nas terap&#xE9;uticas. Varios m&#xE9;todos han sido aplicado con &#xE9;xito para aumentar el rendimiento de producci&#xF3;n de cultivos celulares de mam&#xED;feros. Aumento de la evidencia sugiere que la optimizaci&#xF3;n del gen que codifica secuencias de un vector de expresi&#xF3;n puede mejorar el rendimiento espec&#xED;fico l&#xED;nea celular de la prote&#xED;na recombinante. Aqu&#xED; demostramos que la optimizaci&#xF3;n del gen mejora sustancialmente la producci&#xF3;n de anticuerpos en las c&#xE9;lulas de ovario de h&#xE1;mster chino. Cuando gen optimizaci&#xF3;n se aplic&#xF3; a los genes de las cadenas pesada y ligera de un anticuerpo terap&#xE9;utico, se observ&#xF3; aumento de la producci&#xF3;n de anticuerpos en transfecci&#xF3;n transitoria. Elevado nivel de ARNm de la cadena pesada se asoci&#xF3; con el aumento de la producci&#xF3;n de anticuerpos. Un an&#xE1;lisis m&#xE1;s detallado sugiere que la expresi&#xF3;n de anticuerpos incrementada es atribuible a la estabilidad del mRNA mejorada como resultado de la optimizaci&#xF3;n del gen. Optimizaci&#xF3;n Gene tambi&#xE9;n condujo a la producci&#xF3;n de anticuerpos aumentado en los clones estables.

Finn Hung

Merck Research Laboratory

Merck & Co., Inc

A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics

Finn Hung

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Merck & Co., Inc

A High-throughput Automated Platform for the Development of Manufacturing Cell Lines for Protein Therapeutics

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