Bioengineering Human Microvascular Networks in Immunodeficient Mice

The future of tissue engineering and cell-based therapies for tissue regeneration will likely rely on our ability to generate functional vascular networks ...

Harvard Medical School

MEMS &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;-T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xBAA8;&#xB180;&#xB9AC;&#xC2DD; &#xCE69; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC81C;&#xC548; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xC804;&#xAE30; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xC778; &#xAC70;&#xD488;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xAE30; &#xAC70;&#xD488; &#xC561;&#xCD94;&#xC5D0;&#xC774;&#xD130;, &#xB0AE;&#xC740; &#xC628;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xB192;&#xC740; &#xD45C;&#xBA74; &#xC7A5;&#xB825; &#xD798;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC815;&#xB82C; &#xAD6C;&#xC870; &#xC791;&#xC6A9; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB354;&#xBE14; T &#xAD6C;&#xC870; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xBC84;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC544;&#xB2CC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T-&#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xCC44;&#xB110;, &#xC804;&#xAE30; &#xAC70;&#xD488; &#xC561;&#xCD94;&#xC5D0;&#xC774;&#xD130;&#xC640;&#xC758; &#xAD50;&#xCC28;&#xC810;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC774;&#xB3D9;&#xC2DD; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; T &#xC790;&#xD615; &#xBC84;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC544;&#xB2CC; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCC44;&#xB110; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC774;&#xC9C4; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E0;&#xB2E4;. &#xC2E4; &#xC628; &#xB3D9;&#xC791;&#xACFC; &#xB0AE;&#xC740; &#xC804;&#xC555; &#xC804;&#xAE30; &#xAC1C;&#xD3D0;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; cytometry &#xB4F1; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xAE30; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC545;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xC5B4;&#xB098;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3.0&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xD544;&#xC694; &#xC791;&#xB3D9; &#xC804;&#xC555;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xCE69; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC57D; 3.5 V&#xC774; &#xC2E0;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. PH &#xAC12; &#xCE21;&#xC815; pH &#xAC12; &#xD3B8;&#xCC28; &#xBC0F; actuating &#xCC54;&#xBC84;&#xC640; &#xC804;&#xAE30; &#xAC1C;&#xD3D0; &#xC791;&#xC5C5; &#xC911; pH &#xAC12; &#xD3B8;&#xCC28; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD574;&#xB97C; &#xCD94;&#xC801; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xB958; microchannels &#xBD84;&#xD3EC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC815;&#xB82C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC740; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; 84.1% &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC740; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, 70.2% &#xCD1D; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xC140;&#xC758; &#xC815;&#xB82C; &#xD6C4; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC815;&#xB82C; &#xC791;&#xC5C5; &#xD6C4; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5;. &#xC774; &#xC2E0;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB514;&#xC790;&#xC778;, &#xC81C;&#xC791;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xCE69;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; T &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xCE69;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xB370;&#xBAA8;&#xC640; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xACE0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Micromachined &#xC804;&#xAE30; T-&#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xC140; &#xC815;&#xB82C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

MEMS micro-T-interruptores accionados mediante burbujas electroqu&iacute;micas para aplicaciones de clasificaci&oacute;n celular a nivel de chip monol&iacute;tico son propuestos y demostrados con &eacute;xito. El actuador de electr&oacute;lisis-burbuja, que tiene las caracter&iacute;sticas de operaci&oacute;n baja temperatura y alta fuerza de tensi&oacute;n superficial, se desarrolla para actuar sobre la estructura de clasificaci&oacute;n T-microinterruptor en nuestro dispositivo. El dise&ntilde;o de doble estructura T, el MCP en forma de T con la estructura m&oacute;vil de T-microinterruptor situada en el cruce de la MCP en forma de T, con el actuador de electr&oacute;lisis-burbuja hace una funci&oacute;n de interruptor activo binarias disponibles para aplicaciones de clasificaci&oacute;n de la c&eacute;lula. La operaci&oacute;n de la temperatura y la baja tensi&oacute;n necesaria para la actuaci&oacute;n de electr&oacute;lisis minimizan la posibilidad de da&ntilde;o celular que ocurre en los instrumentos de separaci&oacute;n el&eacute;ctrica alta convencionales, tales como la citometr&iacute;a de flujo. La funci&oacute;n de nuestra viruta del microinterruptor-T con una tensi&oacute;n baja actuaci&oacute;n requiere de 3.0 aproximadamente 3.5 V se demuestra usando c&eacute;lulas de hepatoma humano en este papel. Las mediciones del valor pH caracterizan la variaci&oacute;n de pH-valor y distribuci&oacute;n en las salas de accionamiento y la corriente microcanales para trazar las posibles lesiones de c&eacute;lulas hep&aacute;ticas debido a la variaci&oacute;n del valor de pH durante el funcionamiento de la electr&oacute;lisis-actuaci&oacute;n. La viabilidad de 84.1% celular en las c&eacute;lulas de hepatoma humano ordenados a trav&eacute;s de nuestro clasificador de T-microinterruptor se observa mediante la t&eacute;cnica de an&aacute;lisis de fluorescencia. Adem&aacute;s, 70,2% de las c&eacute;lulas inyectadas totales recuperarse en cultura despu&eacute;s de clasificar y crecer en colonias despu&eacute;s de la operaci&oacute;n de clasificaci&oacute;n T-microinterruptor. En este art&iacute;culo, describimos el dise&ntilde;o, microfabricaci&oacute;n y caracterizaci&oacute;n de nuestra viruta de separaci&oacute;n celular T-microinterruptor. Tambi&eacute;n divulgamos la demostraci&oacute;n de separaci&oacute;n celular y los resultados de viabilidad celular de los hepatocitos de mam&iacute;fero a trav&eacute;s de nuestro chip de separaci&oacute;n celular T-microinterruptor.

Micro electroqu&iacute;micos T-interruptores para aplicaciones de clasificaci&oacute;n de la c&eacute;lula.

&#x4E3A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6392;&#x5E8F;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x96C6;&#x6210;&#x7684;&#x5355;&#x82AF;&#x7247;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x63D0;&#x51FA;&#x548C;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;MEMS &#x5FAE;&#x578B; T &#x5F00;&#x5173;&#x9A71;&#x52A8;&#x901A;&#x8FC7;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CE1;&#x6CAB;&#x3002;&#x5BF9;&#x7535;&#x89E3;&#x6CE1;&#x6CAB;&#x81F4;&#x52A8;&#x5668;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x64CD;&#x4F5C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x548C;&#x9AD8;&#x8868;&#x9762;&#x5F20;&#x529B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x88AB;&#x5F00;&#x53D1;&#x6765;&#x9A71;&#x52A8;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x5FAE;&#x578B; T &#x5F00;&#x5173;&#x5206;&#x7C7B;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x53CC; T &#x7ED3;&#x6784;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x4F4D;&#x4E8E; t &#x578B;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7535;&#x89E3;&#x6C14;&#x6CE1;&#x5236;&#x52A8;&#x5668;&#x4EA4;&#x754C;&#x7684;&#x53EF;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x5FAE;&#x578B; T &#x5F00;&#x5173;&#x7ED3;&#x6784; t &#x578B;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x4E3B;&#x52A8;&#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236;&#x5F00;&#x5173;&#x529F;&#x80FD;&#x4F7F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6392;&#x5E8F;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x53EF;&#x7528;&#x3002;&#x5BA4;&#x6E29;&#x64CD;&#x4F5C;&#x548C;&#x7535;&#x89E3;&#x9A71;&#x52A8;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4F4E;&#x7535;&#x538B;&#x5C3D;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#x5728;&#x5E38;&#x89C4;&#x9AD8;&#x7535;&#x5206;&#x79BB;&#x4EEA;&#xFF0C;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672F;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;3.0 &#x4F4E;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x7535;&#x538B;&#x6211;&#x4EEC;&#x5FAE; T &#x5F00;&#x5173;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5927;&#x7EA6; 3.5 V &#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;PH &#x503C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x7684; pH &#x503C;&#x53D8;&#x5316;&#x548C;&#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x64CD;&#x5206;&#x5EAD;&#x548C;&#x4E3B;&#x6D41;&#x7684;&#x5FAE;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7535;&#x89E3;&#x9A71;&#x52A8;&#x64CD;&#x4F5C;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D; pH &#x503C;&#x53D8;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6211;&#x4EEC;&#x5FAE; T &#x5F00;&#x5173;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 84.1%&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x89C2;&#x5BDF;&#x901A;&#x8FC7;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;70.2%&#x7684;&#x603B;&#x6CE8;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6392;&#x5E8F;&#x540E;&#x6587;&#x5316;&#x6062;&#x590D;&#x548C;&#x5FAE;&#x578B; T &#x5F00;&#x5173;&#x6392;&#x5E8F;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4E4B;&#x540E;&#x6210;&#x957F;&#x4E3A;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x5FAE;&#x7EC6;&#x52A0;&#x5DE5;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5FAE; T &#x5F00;&#x5173;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6392;&#x5E8F;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x901A;&#x8FC7;&#x6211;&#x4EEC;&#x5FAE; T &#x5F00;&#x5173;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6392;&#x5E8F;&#x82AF;&#x7247;&#x62A5;&#x544A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009;&#x7684;&#x793A;&#x8303;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x529B;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x5FAE;&#x673A;&#x68B0;&#x7535;&#x5316;&#x5B66; T-&#x5207;&#x6362;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6392;&#x5E8F;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

MEMS micro-T-switches actuated via electrochemical bubbles for cell sorting applications in a monolithic chip level are proposed and successfully demonstrated. The electrolysis-bubble actuator, which has the features of low operation temperature and high surface-tension force, is developed to actuate the micro-T-switch sorting structure in our device. The double T-structure design, the T-shape microchannel with the movable micro-T-switch structure located at the junction of the T-shape microchannel, with the electrolysis-bubble actuator makes an active-binary switch function available for cell sorting applications. The room temperature operation and the low voltage required for electrolysis actuation minimize the possibility of cell-damage that happens in the conventional high electric separation instruments, such as flow cytometry. The function of our micro-T-switch chip with a low required actuation voltage of 3.0 approximately 3.5 V is demonstrated by using human hepatoma cells in this paper. The pH-value measurements characterize the pH-value variation and distribution in the actuating chambers and the mainstream microchannels to trace the possible liver-cell injury due to the pH-value variation during electrolysis-actuation operation. The 84.1% cell viability in the sorted human hepatoma cells through our micro-T-switch sorter is observed via the fluorescence assay technique. Furthermore, 70.2% of total injected cells recover in culture after sorting and grow into colonies after micro-T-switch sorting operation. In this paper, we describe the design, microfabrication, and characterization of our micro-T-switch cell-sorting chip. We also report the cell-sorting demonstration and the cell viability results for the mammalian liver cells through our micro-T-switch cell-sorting chip.

Micromachined electrochemical T-switches for cell sorting applications.

MEMS micro-T-interrupteurs actionnement par l&#39;interm&eacute;diaire de bulles &eacute;lectrochimiques pour applications de tri de cellules dans un niveau de puce monolithique sont propos&eacute;es et a d&eacute;montr&eacute; avec succ&egrave;s. L&#39;actionneur d&#39;Electrolyse-bulle, qui poss&egrave;de les caract&eacute;ristiques de fonctionnement basse temp&eacute;rature et haute force de tension superficielle, est mis au point afin d&#39;actionner la structure triage T-micro-switch dans notre dispositif. La double conception de T-structure, le MICROCANAUX en forme de T avec la structure micro-commutateur-T Mobile, situ&eacute;e &agrave; la jonction de la forme en T microchannel, avec le d&eacute;clencheur de l&#39;&eacute;lectrolyse-bulle rend une fonction commutateur active binaires disponibles pour cellule tri des applications. L&#39;op&eacute;ration de la temp&eacute;rature ambiante et de la basse tension n&eacute;cessaire pour l&#39;actionnement de l&#39;&eacute;lectrolyse minimiser les risques de dommages cellulaires qui se passe dans les instruments conventionnels s&eacute;paration &eacute;lectrique &eacute;lev&eacute;e, comme la cytom&eacute;trie en flux. La fonction de notre puce micro-commutateur-T, avec une tension faible activation requise de 3.0 environ 3,5 V est d&eacute;montr&eacute;e &agrave; l&#39;aide de cellules d&#39;h&eacute;patome humain dans cet article. Les mesures de pH-valeur caract&eacute;risent la variation de la valeur du pH et de la distribution dans les chambres &agrave; actionnement et les MICROCANAUX grand public pour retracer le pr&eacute;judice &eacute;ventuel des cellules du foie due &agrave; la variation de pH-valeur pendant le fonctionnement de l&#39;&eacute;lectrolyse-actionnement. La viabilit&eacute; cellulaire de 84,1 % dans les cellules de l&#39;h&eacute;patome humain tri&eacute; par le biais de notre trieuse micro-interrupteur-T est observ&eacute;e par la technique de dosage de fluorescence. En outre, 70,2 % des cellules inject&eacute;es totales r&eacute;cup&eacute;rer en culture apr&egrave;s triage et poussent en colonies apr&egrave;s l&#39;op&eacute;ration de tri T-micro-switch. Dans cet article, nous d&eacute;crivons la conception, microfabrication et caract&eacute;risation de notre puce de tri cellulaire T-micro-switch. Nous rapportons &eacute;galement la d&eacute;monstration de tri cellulaire et les r&eacute;sultats de la viabilit&eacute; de cellule pour les cellules h&eacute;patiques de mammif&egrave;re gr&acirc;ce &agrave; notre puce de tri cellulaire T-micro-switch.

Micro-usines &eacute;lectrochimiques T-commutateurs pour cellule tri des candidatures.

MEMS T-Mikroschalter bet&auml;tigt &uuml;ber elektrochemische Blasen f&uuml;r Zelle Sortieren Anwendungen in einer monolithischen Chip-Ebene sind vorgeschlagen und erfolgreich demonstriert. Der Elektrolyse-Bubble-Antrieb, der die Merkmale der niedrige Betriebstemperatur und hohe Oberfl&auml;chenspannung Kraft hat, wurde entwickelt, um die Mikroschalter-T-Sortier-Struktur in unser Ger&auml;t bet&auml;tigen. Das doppelte T-Struktur-Design, stellt die T-Form-Microchannel mit der beweglichen Mikroschalter-T-Struktur befindet sich an der Kreuzung von der Microchannel T-Form mit der Elektrolyse-Bubble-Antrieb eine aktiv-Binary-Switch-Funktion Zelle Sortieren Anwendungen zur Verf&uuml;gung. Die Raumtemperatur-Operation und die low-Voltage ben&ouml;tigt f&uuml;r die Elektrolyse Ansteuerung minimieren die M&ouml;glichkeit von Zellsch&auml;den, die in die herk&ouml;mmlichen hohe elektrische Trennung-Instrumente, wie Durchflusszytometrie geschieht. Die Funktion unserer T-Mikroschalter-Chip mit einer niedrigen erforderliche Bet&auml;tigung-Spannung von 3.0 ca. 3,5 V zeigt sich mit menschlichen berechnete Zellen in diesem Papier. Die pH-Wert-Messungen charakterisieren die pH-Wert-Variation und Verteilung in der Stellantrieb Kammern und der etablierten Mikrokan&auml;len die m&ouml;gliche Verletzung der Leber-Zellen zur&uuml;ckzuf&uuml;hren auf den pH-Wert im Elektrolyse-Bet&auml;tigung Betrieb zu verfolgen. Die 84,1 % Zellviabilit&auml;t in den sortierten menschlichen berechnete Zellen durch unsere T-Mikroschalter-Sortierer wird &uuml;ber die Fluoreszenz-Assay-Technik beobachtet. Dar&uuml;ber hinaus 70,2 % der insgesamt eingef&uuml;gten Zellen in Kultur nach der Sortierung wiederherstellen und wachsen in Kolonien nach T-Mikroschalter Sortiervorgang. In diesem Beitrag beschreiben wir Design, Microfabrication und Charakterisierung von unserer T-Mikroschalter Zellsortierung Chip. Zellsortierung Demonstration und die Zelle Entwicklungsf&auml;higkeit Ergebnisse f&uuml;r das S&auml;ugetieren-Leberzellen berichten wir &uuml;ber unsere T-Mikroschalter Zellsortierung Chip.

Micromachined elektrochemische T-Schalter f&uuml;r Zelle Sortieren Anwendungen.

MEMS micro-T-interruttori azionati tramite bolle elettrochimiche per applicazioni ordinamento delle cellule in un livello di circuito integrato monolitico sono proposto e dimostrate con successo. L&#39;attuatore di elettrolisi-bolla, che ha le caratteristiche di funzionamento bassa temperatura ed elevata forza di tensione superficiale, &egrave; sviluppato per azionare il microinterruttore-T ordinamento struttura nel nostro dispositivo. Il design a doppio T-struttura, il microchannel forma a T con il mobile struttura micro-T-interruttore situata all&#39;incrocio tra il microchannel T-forma, con l&#39;attuatore di elettrolisi-bubble rende una funzione attiva-binario interruttore disponibile per cella Ordinamento applicazioni. Il funzionamento a temperatura ambiente e la bassa tensione necessaria per l&#39;azionamento elettrolisi ridurre al minimo la possibilit&agrave; di danni cellulari che accade negli strumenti convenzionali ad alta separazione elettrica, come la citometria a flusso. La funzione del nostro chip micro-T-interruttore con una tensione bassa necessaria attuazione di 3.0 circa 3,5 V &egrave; dimostrata utilizzando cellule di epatoma umano in questa carta. Le misurazioni di pH caratterizzano la variazione del valore del pH e la distribuzione in camere di azionamento e il mainstream microcanali di tracciare le possibili lesioni fegato-cella a causa della variazione del valore del pH durante l&#39;operazione di elettrolisi-azionamento. La vitalit&agrave; delle cellule 84,1% nelle cellule di epatoma umano ordinato attraverso la nostra selezionatrice di micro-T-interruttore &egrave; osservata tramite la tecnica di analisi di fluorescenza. Inoltre, 70,2% del totale cellule iniettate recuperare nella cultura dopo la cernita e crescono in colonie dopo switch-micro-T operazione di ordinamento. In questo articolo, descriviamo la progettazione, microfabbricazione e caratterizzazione del nostro chip di ordinamento delle cellule T-microinterruttore. Segnaliamo anche la dimostrazione di ordinamento delle cellule e i risultati di attuabilit&agrave; delle cellule per le cellule del fegato dei mammiferi attraverso il nostro chip di ordinamento delle cellule T-microinterruttore.

Micro elettrochimici T-interruttori per cella Ordinamento applicazioni.

&#x30E2;&#x30CE;&#x30EA;&#x30B7;&#x30C3;&#x30AF; &#x30C1;&#x30C3;&#x30D7; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x9078;&#x5225;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x3001;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x7528; MEMS &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; T &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x6CE1;&#x4F5C;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F4E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x8868;&#x9762;&#x5F35;&#x529B;&#x306E;&#x529B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;, &#x96FB;&#x89E3;&#x6C17;&#x6CE1;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;, &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; T &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x69CB;&#x9020;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x4F5C;&#x52D5;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB; 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3.0 &#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; T &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; &#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D04; 3.5 V &#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3072;&#x3068;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PH &#x5024;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;pH &#x5024;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x4F5C;&#x52D5;&#x5BA4;&#x3068;&#x96FB;&#x89E3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x306E; pH &#x5024;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x3092;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x6D41;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;84.1% &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; T &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; &#x30BD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x86CD;&#x5149;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;70.2% &#x5408;&#x8A08;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x305F;&#x5F8C;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; 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&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66; T-&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; cell &#x9078;&#x5225;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;

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&#x809D;&#x764C;&#x7403;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x52A8;&#x6001;&#x5206;&#x6790;&#xFF1A; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x548C; beta1 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

A spheroid is an in vitro multicellular aggregate that provides a microenvironment resembling that of normal tissue in vivo. Although cell adhesion molecules such as integrins and cadherins have been implicated in participating in the process of spheroid formation, little is known about the timing of their action. In this study, we have employed an image-based quantitative method to investigate the compactness of cell aggregates during hepatoma spheroid formation in a dynamic fashion. By modulating beta1-integrin and E-cadherin activity with specific blocking antibodies, ion chelators, and RGD-sequence-containing peptides, we show that these cell adhesion molecules mediate the formation of spheroids through the establishment of complex cell-cell and cell-extracellular matrix (ECM) interactions. The dynamics of spheroid formation can be separated into three stages. In the first stage, ECM fibers act as a long-chain linker for the attachment of dispersed single-cells to form loose aggregations through the binding of integrins. This is followed by a delay period in which cell aggregates pause in compaction, presumably because of the accumulation of sufficient amounts of E-cadherins. In the third stage, strong homophilic interaction of E-cadherins is a major factor for the morphological transition from loose cell aggregates to compact spheroids. These findings thus provide comprehensive information on the molecular mechanisms and dynamics of hepatoma spheroid formation.

Dynamic analysis of hepatoma spheroid formation: roles of E-cadherin and beta1-integrin.

Un sph&eacute;ro&iuml;de est un agr&eacute;gat multicellulaire in vitro fournit un micro-environnement qui ressemble &agrave; celle des tissus normaux in vivo. Bien que les mol&eacute;cules d&#39;adh&eacute;rence cellulaire telles que les int&eacute;grines et cadh&eacute;rines ont &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;s &agrave; participer dans le processus de formation de sph&eacute;ro&iuml;de, on en sait peu sur le moment de leur action. Dans cette &eacute;tude, nous avons utilis&eacute; une m&eacute;thode quantitative bas&eacute;e sur les images pour &eacute;tudier la compacit&eacute; des agr&eacute;gats cellulaires au cours de la formation sph&eacute;ro&iuml;de h&eacute;patome de mani&egrave;re dynamique. En modulant la beta1 int&eacute;grine et activit&eacute; de E-cadh&eacute;rine RGD-s&eacute;quence contenant des peptides sp&eacute;cifiques anticorps bloquants et ch&eacute;lateurs d&#39;ions, nous montrons que ces mol&eacute;cules d&#39;adh&eacute;rence cellulaire m&eacute;dient la formation des sph&eacute;ro&iuml;des &agrave; travers la mise en place de cellules complexes et des interactions cellule-extracellulaire (ECM). La dynamique de formation de l&#39;ellipso&iuml;de peut &ecirc;tre s&eacute;par&eacute;e en trois &eacute;tapes. Dans un premier temps, les fibres ECM agissent comme un linker de longues cha&icirc;nes pour la fixation de single-cellules dispers&eacute;es aux agr&eacute;gations l&acirc;che forme &agrave; travers la liaison des int&eacute;grines. Elle est suivie d&#39;une p&eacute;riode de d&eacute;lai dans lequel agr&eacute;gats cellulaires pause au compactage, probablement en raison de l&#39;accumulation de quantit&eacute;s suffisantes de E-cadh&eacute;rines. Dans la troisi&egrave;me phase, forte interaction homophile de E-cadh&eacute;rines est un facteur majeur pour la transition morphologique d&#39;agr&eacute;gats cellulaires l&acirc;che pour compacter les sph&eacute;ro&iuml;des. Ces r&eacute;sultats fournissent donc une information compl&egrave;te sur les m&eacute;canismes mol&eacute;culaires et la dynamique de formation sph&eacute;ro&iuml;de h&eacute;patome.

Analyse dynamique de formation sph&eacute;ro&iuml;de h&eacute;patome : r&ocirc;les de la E-cadh&eacute;rine et beta1 int&eacute;grine.

Ein Sph&auml;roid ist ein in-vitro-Vielzellige Aggregat, das ein Mikromilieu, &auml;hnlich der in-vivo normalem Gewebe erm&ouml;glicht. Obwohl ZELLADH&Auml;SIONSMOLEK&Uuml;LE wie Integrine und Cadherine Teilnahme Sph&auml;roid verschmelzen verwickelt haben, ist wenig &uuml;ber den Zeitpunkt ihres Handelns bekannt. In dieser Studie haben wir eine bildbasierte quantitative Methode, um die Kompaktheit der Zelle Aggregate zu untersuchen, w&auml;hrend berechnete Sph&auml;roid Bildung auf dynamische Weise besch&auml;ftigt. Durch Modulation beta1-Integrin und E-Cadherin-Aktivit&auml;t mit spezifischen blockierende Antik&ouml;rper, Ion Chelatoren und RGD-Sequenz-haltiger Peptide, zeigen wir, dass diese ZELLADH&Auml;SIONSMOLEK&Uuml;LE die Bildung von Sph&auml;roide durch Errichtung einer komplexen Zell-Zell und Zelle-extrazellul&auml;ren Matrix (ECM) Interaktionen vermitteln. Die Dynamik der Sph&auml;roid-Formation kann in drei Phasen aufgeteilt werden. In der ersten Stufe fungieren ECM-Fasern als einen langkettigen Linker zur Befestigung eines verteilten Einzel-Zellen in Form lose Aggregationen durch die Bindung der Integrine. Es folgt in der Zelle Aggregate Verdichtung, vermutlich wegen der Anh&auml;ufung von ausreichenden Mengen an E-Cadherine in Pause einen Verz&ouml;gerungszeitraum. In der dritten Stufe ist starke homophilic Interaktion von E-Cadherine ein wichtiger Faktor f&uuml;r den morphologischen &Uuml;bergang von lose Zelle Aggregate Sph&auml;roide komprimieren. Diese Erkenntnisse bieten somit umfassende Informationen &uuml;ber die molekularen Mechanismen und Dynamiken der berechnete Sph&auml;roid-Formation.

Dynamische Analyse berechnete Sph&auml;roid-Formation: Rollen von E-Cadherin und beta1-Integrin.

Uno sferoide &egrave; un&#39;aggregazione in vitro pluricellulare che fornisce un microambiente simile a quella del tessuto normale in vivo. Sebbene le molecole di adesione cellulare come integrine e caderine sono stati implicati nella partecipazione nel processo di formazione di sferoide, poco si sa circa i tempi della loro azione. In questo studio, noi abbiamo impiegato un metodo quantitativo basato su immagini per indagare la compattezza di aggregati cellulari durante la formazione sferoide epatoma in modo dinamico. Modulando la beta1-integrina e attivit&agrave; di E-caderina con specifici anticorpi bloccanti, chelanti ioni e peptidi RGD-sequenza-contenente, mostriamo che queste molecole di adesione cellulare mediano la formazione di sferoidi attraverso la creazione di complesso cellula-cellula e le interazioni cellula-extracellulare (ECM). Le dinamiche di formazione sferoide possono essere suddivisa in tre fasi. Nella prima fase, fibre ECM agiscono come un lunga catena del linker per il fissaggio di singolo-cellule disperse per aggregazioni sciolto forma attraverso il legame delle integrine. Questo &egrave; seguito da un periodo di ritardo in cui aggregati cellulari pausa nella compattazione, presumibilmente a causa dell&#39;accumulo di una quantit&agrave; sufficiente di E-caderine. Nella terza fase, l&#39;interazione forte omofilo delle E-caderine &egrave; un fattore importante per la transizione morfologica da aggregati cellulari sciolto per compattare sferoidi. Questi risultati cos&igrave; forniscono informazioni esaurienti sui meccanismi molecolari e dinamiche della formazione sferoide epatoma.

Analisi dinamica della formazione di epatoma sferoide: ruoli di E-caderina e beta1-integrina.

&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D44;&#x7E54; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x4F3C;&#x305F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x8A08;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x884C;&#x52D5;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x7D30;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x584A;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x6027;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5F62;&#x6210;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x52D5;&#x7684;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8ABF;&#x67FB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6CD5;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Beta1 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x6297;&#x4F53;&#x3001;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x3068; RGD &#x914D;&#x5217;&#x542B;&#x6709;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;, &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;-&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; (ECM) &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ECM &#x7E4A;&#x7DAD;&#x9577;&#x9396;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x5206;&#x6563;&#x3057;&#x305F;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x7DE9;&#x3044;&#x96C6;&#x8A08;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x6642;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x584A;&#x5727;&#x7E2E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x84C4;&#x7A4D; E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x91CF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x505C;&#x6B62;&#x9045;&#x5EF6;&#x671F;&#x9593;&#x304C;&#x7D9A;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;3 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x30DB;&#x30E2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F62;&#x614B;&#x8EE2;&#x79FB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x306B;&#x7DE9;&#x3093;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x584A;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3068;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x5305;&#x62EC;&#x7684;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;: E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068; beta1 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xD55C; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xB2EE;&#xC740; &#xC815;&#xC0C1; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; microenvironment&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; integrins &#xBC0F; cadherins &#xAC19;&#xC740; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD615;&#xC131; &#xACFC;&#xC815; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC791;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB3D9;&#xC801; &#xD328;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC740; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD615;&#xC131; &#xB3D9;&#xC548; &#xC140; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xC18C;&#xD615;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xAE30;&#xBC18; &#xC591;&#xC801; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. Beta1 integrin &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC815; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD56D; &#xCCB4;, &#xC774;&#xC628; chelators, RGD &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC640; E cadherin &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790; &#xC911;&#xC7AC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC140; &#xBC0F; &#xC140; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; (ECM) &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; spheroids&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559; 3 &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; ECM &#xC12C;&#xC720; integrins&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC591;&#xC2DD; &#xB290;&#xC2A8;&#xD55C; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140;&#xC758; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE34; &#xCCB4;&#xC778; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xD589;&#xC704;&#xB85C;. &#xC774;&#xB294; &#xC140; &#xC9D1;&#xACC4; &#xC77C;&#xC2DC; &#xC555;&#xCD95;&#xC5D0; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; E-cadherins&#xC758; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC591; &#xCD95;&#xC801; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xAE30;&#xAC04;&#xC774; &#xB098;&#xC635;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3 &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; E cadherins&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; homophilic &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; spheroids &#xC555;&#xCD95; &#xB290;&#xC2A8;&#xD55C; &#xC140; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC18C; &#xC804;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xAD04;&#xC801;&#xC778; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;.

&#xB3D9;&#xC801; &#xBD84;&#xC11D;&#xC740; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD615;&#xC131;: &#xC804;&#xC790; cadherin beta1 integrin&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Un esferoide es un agregado multicelular in vitro que proporciona un microambiente de tejidos normales en vivo. Aunque las mol&eacute;culas de adhesi&oacute;n celular como las integrinas y caderinas se han implicado en participar en el proceso de formaci&oacute;n del esferoide, poco se sabe sobre el momento de su acci&oacute;n. En este estudio, hemos empleado un m&eacute;todo cuantitativo basado en im&aacute;genes para investigar la compacidad de los agregados de la c&eacute;lula durante la formaci&oacute;n del esferoide de hepatoma de manera din&aacute;mica. Modulando beta1-integrina y actividad de la E-cadherina con anticuerpos espec&iacute;ficos de bloqueo, quelantes de iones y p&eacute;ptidos que contienen RGD-secuencia, mostramos que estas mol&eacute;culas de adhesi&oacute;n celular median la formaci&oacute;n de esferoides mediante el establecimiento de la c&eacute;lula compleja e interacciones de la matriz celular-extracelular (MEC). La din&aacute;mica de formaci&oacute;n esferoide puede dividirse en tres etapas. En la primera etapa, fibras de ECM act&uacute;an como un enlazador de cadena larga para el accesorio de solo c&eacute;lulas dispersas a formar agregaciones sueltos a trav&eacute;s de la Uni&oacute;n de integrinas. Esto es seguido por un periodo de espera en que agregados de c&eacute;lulas una pausa en la compactaci&oacute;n, presumiblemente debido a la acumulaci&oacute;n de cantidades suficientes de E-caderinas. En la tercera etapa, la fuerte interacci&oacute;n homophilic de E-caderinas es un factor importante para la transici&oacute;n morfol&oacute;gica de agregados de c&eacute;lulas sueltas para compactar esferoides. As&iacute;, estos resultados proporcionan informaci&oacute;n exhaustiva sobre los mecanismos moleculares y din&aacute;mica de formaci&oacute;n del esferoide de hepatoma.

An&aacute;lisis din&aacute;mico de formaci&oacute;n de hepatoma esferoide: funciones de E-cadherina y beta1-integrina.

Biomim&eacute;tique structuration h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne de cellules endoth&eacute;liales et h&eacute;patiques, qui commencent &agrave; partir au hasard distribu&eacute; des cellules &agrave; l&#39;int&eacute;rieur de la chambre de la microfluidique, via la conception de puce d&#39;accrue induite par le champ dielectrophoresis (DEP) pi&egrave;ge est d&eacute;montr&eacute;e et pr&eacute;sent&eacute;e dans cet article. La conception de tableau concentriques-stellaire-tip &eacute;lectrode dans cette puce g&eacute;n&egrave;re des champs &eacute;lectriques radial-mod&egrave;le pour la manipulation de DEP des cellules du foie direct. En construisant la forme g&eacute;om&eacute;trique et la distribution des embouts &eacute;toil&eacute;s, les &eacute;lectrodes DEP am&eacute;liorent les gradients de champ &eacute;lectrique spatiales souhait&eacute;es afin de guider et de prendre au collet des cellules individuelles pour former le motif d&eacute;sir&eacute; biomim&eacute;tique. Avec ce projet de conception de puces microfluidiques, les h&eacute;patocytes originales distribu&eacute;s al&eacute;atoirement &agrave; l&#39;int&eacute;rieur de la chambre de microfluidique peuvent &ecirc;tre manipul&eacute;s en parall&egrave;le et alignement dans le mod&egrave;le de tableau de perle-cha&icirc;ne souhait&eacute;. Ce mod&egrave;le radial imite la morphologie lobulaire du tissu h&eacute;patique r&eacute;el. Les cellules endoth&eacute;liales, puis, sont pris au pi&egrave;ge dans le tableau de perle-cha&icirc;ne suppl&eacute;mentaire et s&#39;&eacute;tablir &agrave; l&#39;entre-deux de l&#39;espace du tableau pr&eacute;c&eacute;dent de perle-cha&icirc;ne h&eacute;patique. Par cette puce cell-lab, nous d&eacute;montrons la reconstruction in vitro du lobule-mim&eacute;tique motif radial h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne avec la viabilit&eacute; cellulaire bon apr&egrave;s la structuration de la cellule. Ce travail rapporte la structuration en parall&egrave;le rapide des types de cellules du foie vivantes par le pi&egrave;ge DEP renforc&eacute; &agrave; l&#39;int&eacute;rieur de la puce microfluidique doubles.

Rapide h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne foie cellules sur puce le patterning via l&#39;interruption accrue induite par le champ di&eacute;lectrophor&egrave;se.

&#x4EFF;&#x751F;&#x5F02;&#x6784;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x809D;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x968F;&#x673A;&#x542F;&#x52A8;&#x5206;&#x5E03;&#x5F0F;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7089;&#x819B;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A;&#x573A;&#x81F4;&#x4ECB;&#x7535;&#x6CF3; (DEP) &#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x9677;&#x9631;&#x662F;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x8FD9;&#x4EFD;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;&#x6B64;&#x82AF;&#x7247;&#x4E2D;&#x7684;&#x540C;&#x5FC3;&#x661F;&#x72B6;&#x63D0;&#x793A;&#x7535;&#x6781;&#x9635;&#x5217;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x751F;&#x6210;&#x5F84;&#x5411;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7535;&#x573A; DEP &#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x6D3B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6784;&#x5EFA;&#x51E0;&#x4F55;&#x5F62;&#x72B6;&#x548C;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x661F;&#x72B6;&#x63D0;&#x793A;&#xFF0C;DEP &#x7535;&#x6781;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7535;&#x573A;&#x68AF;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6307;&#x5BFC;&#x548C;&#x7F51;&#x7F57;&#x5404;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EE5;&#x5F62;&#x6210;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4EFF;&#x751F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x539F;&#x59CB;&#x968F;&#x673A;&#x5206;&#x5E03;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5206;&#x5EAD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E76;&#x884C;&#x64CD;&#x4F5C;&#x548C;&#x5BF9;&#x9F50;&#x5230;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x73CD;&#x73E0;&#x94FE;&#x9635;&#x5217;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6B64;&#x5F84;&#x5411;&#x6A21;&#x5F0F;&#x6A21;&#x4EFF;&#x5C0F;&#x53F6;&#x771F;&#x6B63;&#x809D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x3002;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x6355;&#x5230;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x73CD;&#x73E0;&#x94FE;&#x6570;&#x7EC4;&#x548C;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x809D;&#x73CD;&#x73E0;&#x94FE;&#x6570;&#x7EC4;&#x5B9A;&#x5C45;&#x5728;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4ECB;&#x4E8E;&#x4E24;&#x8005;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x6B64;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4F53;&#x5916;&#x91CD;&#x5EFA;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x5C0F;&#x53F6;&#x4EFF;&#x751F;&#x5F84;&#x5411;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0E;&#x826F;&#x597D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9635;&#x5217;&#x64CD;&#x4F5C;&#x540E;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x62A5;&#x544A;&#x8FC5;&#x901F;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x53CC;&#x6D3B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A; DEP &#x9677;&#x9631;&#x91CC;&#x9762;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x5728;&#x5E76;&#x884C;&#x683C;&#x5C40;&#x3002;

&#x5FEB;&#x901F;&#x5F02;&#x6784;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x82AF;&#x7247;&#x9635;&#x5217;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x573A;&#x81F4;&#x4ECB;&#x7535;&#x6CF3;&#x7684;&#x9677;&#x9631;&#x3002;

Biomimetic heterogeneous patterning of hepatic and endothelial cells, which start from randomly distributed cells inside the microfluidic chamber, via the chip design of enhanced field-induced dielectrophoresis (DEP) trap is demonstrated and reported in this paper. The concentric-stellate-tip electrode array design in this chip generates radial-pattern electric fields for the DEP manipulation of the live liver cells. By constructing the geometric shape and the distribution of stellate tips, the DEP electrodes enhance the desired spatial electric-field gradients to guide and snare individual cells to form the desired biomimetic pattern. With this proposed microfluidic chip design, the original randomly distributed hepatocytes inside the microfluidic chamber can be manipulated in parallel and align into the desired pearl-chain array pattern. This radial pattern mimics the lobular morphology of real liver tissue. The endothelial cells, then, are snared into the additional pearl-chain array and settle at the space in-between the previous hepatic pearl-chain array. By this cell-lab chip, we demonstrate the in vitro reconstruction of the heterogeneous lobule-mimetic radial pattern with good cell viability after cell patterning. This work reports the rapid in-parallel patterning of the dual types of live liver cells via the enhanced DEP trap inside the microfluidic chip.

Rapid heterogeneous liver-cell on-chip patterning via the enhanced field-induced dielectrophoresis trap.

Biomimetische heterogene Musterung von Leber- und endothelial Zellen, die nach dem Zufallsprinzip aus starten Zellen innerhalb der Microfluidic-Kammer, verteilt &uuml;ber die Chipdesign der erweiterten Feld induziert Dielektrophorese (DEP) Trap gezeigt und berichtet in diesem Papier ist. Das konzentrischen-stellate-Spitze Elektrode Array-Design in dieser Chip generiert Radial-Muster elektrischer Felder f&uuml;r die DEP-Manipulation der live Leberzellen. Durch den Bau der geometrischen Form und der Verteilung der stellate Tipps, verbessern die DEP-Elektroden die gew&uuml;nschte r&auml;umliche elektrische Feld Farbverl&auml;ufe zu leiten und snare einzelne Zellen um das gew&uuml;nschte Biomimetic-Muster bilden. Mit der vorgeschlagenen Microfluidic Chip-Design die urspr&uuml;nglichen zuf&auml;llig verteilten Hepatozyten in der Microfluidic Kammer parallel bearbeitet werden k&ouml;nnen und richten Sie in das gew&uuml;nschte Perle-Kette-Array-Muster. Diese Radialmuster imitiert die lobul&auml;res Morphologie des echten Lebergewebes. Endothelzellen, dann, sind gefangen in den zus&auml;tzlichen Perle-Kette-Array und das vorherige hepatische Perle-Kette-Array an den Raum dazwischen zu begleichen. Durch diese Zelle-Lab-Chip zeigen wir die in-vitro-Rekonstruktion der heterogenen empfinden-mimetischen Radialmuster mit guten Zellviabilit&auml;t nach Zelle Musterung. Diese Arbeit berichtet die schnelle in-Parallel-Musterung der zwei Arten von Leben Leberzellen &uuml;ber die verbesserte DEP-Falle innerhalb der Microfluidic Chip.

Schnelle heterogene Leber-Zellen auf dem Chip &uuml;ber die erweiterte Feld induziert Dielektrophorese Falle Musterung.

Biomimetic patterning eterogenea di cellule endoteliali ed epatiche, che partono da casualmente distribuite le cellule all&#39;interno della camera microfluidica, attraverso la progettazione dei chip di enhanced indotta dal campo dielettroforesi (DEP) trappola &egrave; dimostrato e riportato in questo documento. La progettazione di array degli elettrodi concentrici-stellate-punta in questo chip genera campi elettrici radiale-modello per la manipolazione DEP delle cellule del fegato dal vivo. Costruire la forma geometrica e la distribuzione dei suggerimenti stellate, gli elettrodi DEP migliorano i gradienti di campo elettrico spaziali desiderati per guida e rullante singole celle per formare il modello desiderato biomimetici. Con tale proposta la progettazione dei chip microfluidici, originali epatociti casualmente distribuiti all&#39;interno della camera microfluidica possono essere manipolati in parallelo e allineare il pattern di matrice perla-catena desiderata. Questo modello radiale imita la morfologia lobulare del tessuto epatico vero e proprio. Le cellule endoteliali, poi, sono catturate nella matrice perla-catena supplementare e stabilirsi presso l&#39;in-between spazio precedente matrice perla-catena epatica. Da questo chip cell-lab, dimostriamo la ricostruzione in vitro del lobulo-mimetico modello radiale eterogeneo con vitalit&agrave; cellulare buono dopo il modello di cellulare. Questo lavoro riporta la rapida patterning in parallelo dei dual tipi di cellule del fegato dal vivo attraverso la trappola DEP rafforzata all&#39;interno del chip microfluidico.

Rapida eterogenei fegato-cella on-chip creazione tramite la trappola migliorata dielettroforesi indotta dal campo.

&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x7570;&#x7A2E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x809D;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x4E2D;&#x5206;&#x6563;&#x3001;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x78C1;&#x5834;&#x8A98;&#x8D77;&#x6CF3; (DEP) &#x306E;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7; &#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x3059;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x5FC3;&#x5186;&#x72B6;&#x5148;&#x7AEF;&#x96FB;&#x6975;&#x914D;&#x5217;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; DEP &#x64CD;&#x4F5C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x72B6;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x96FB;&#x754C;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5E7E;&#x4F55;&#x5B66;&#x7684;&#x5F62;&#x72B6;&#x3068;&#x661F;&#x72B6;&#x306E;&#x30D2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;DEP &#x306E;&#x96FB;&#x6975;&#x3092;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x6240;&#x671B;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x76EE;&#x7684;&#x7A7A;&#x9593;&#x96FB;&#x5834;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3001;&#x5143;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x5206;&#x5E03;&#x809D;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x5185;&#x4E26;&#x5217;&#x3067;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3001;&#x76EE;&#x7684;&#x30D1;&#x30FC;&#x30EB; &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x914D;&#x5217;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x653E;&#x5C04;&#x72B6;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x809D;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x5C0F;&#x8449;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30D1;&#x30FC;&#x30EB; &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x914D;&#x5217;&#x306B; snared &#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3057;&#x3001;&#x524D;&#x306E;&#x809D;&#x30D1;&#x30FC;&#x30EB; &#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x914D;&#x5217;&#x30B9;&#x30DA;&#x30FC;&#x30B9;&#x9593;&#x3067;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB; &#x30E9;&#x30DC; &#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7570;&#x7A2E;&#x5C0F;&#x8449;&#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x653E;&#x5C04;&#x72B6;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E; in vitro &#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3088;&#x3044;&#x30BB;&#x30EB;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x5185;&#x90E8;&#x62E1;&#x5F35; DEP &#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x4E26;&#x5217;&#x3067;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x7570;&#x7A2E;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x78C1;&#x5834;&#x8A98;&#x8D77;&#x8A98;&#x96FB;&#x6CF3;&#x52D5;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3002;

&#xC784;&#xC758;&#xB85C; &#xC2DC;&#xC791; &#xAC04;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xBAA8;&#xBC29; &#xC774;&#xAE30;&#xC885; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xBD84;&#xC0B0; &#xBBF8;&#xC138; &#xCC54;&#xBC84; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC140;, &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD544;&#xB4DC; &#xC720;&#xB3C4; dielectrophoresis (DEP)&#xC758; &#xCE69; &#xC124;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD2B8;&#xB7A9; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBC0F;&#xC774; &#xC2E0;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCE69;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC2EC; &#xC8FC;&#xBB38;&#xACFC; &#xD301; &#xC804;&#xADF9; &#xBC30;&#xC5F4; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; DEP &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC0AC;&#xD615; &#xD328;&#xD134; &#xC804;&#xAE30; &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xD558;&#xD559;&#xC801; &#xBAA8;&#xC591;&#xACFC; &#xC8FC;&#xBB38;&#xACFC; &#xD301;&#xC758; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; DEP &#xC804;&#xADF9; &#xAC00;&#xC774;&#xB4DC; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; biomimetic &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC140;&#xC744; &#xC62C; &#xBB34;&#xC5D0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xACF5;&#xAC04; &#xC804;&#xAE30; &#xBD84;&#xC57C; &#xADF8;&#xB77C;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xC774; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xC81C;&#xC548;, &#xBBF8;&#xC138; &#xCC54;&#xBC84; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC6D0;&#xB798; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;&#xB85C; &#xBD84;&#xC0B0;&#xB41C; hepatocytes &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC870;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC9C4;&#xC8FC; &#xCCB4;&#xC778; &#xBC30;&#xC5F4; &#xD328;&#xD134;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB82C;. &#xC774; &#xBC29;&#xC0AC;&#xD615; &#xD328;&#xD134; &#xC2E4;&#xC81C; &#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; lobular &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC744; &#xBAA8;&#xBC29;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;, &#xCD94;&#xAC00; &#xC9C4;&#xC8FC; &#xCCB4;&#xC778; &#xBC30;&#xC5F4;&#xB85C; snared &#xBC0F; &#xC774;&#xC804; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC9C4;&#xC8FC; &#xCCB4;&#xC778; &#xBC30;&#xC5F4; &#xACF5;&#xAC04; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0; &#xC815;&#xCC29;. &#xC140; &#xB7A9; &#xCE69;&#xC774; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC140; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD6C4; &#xC88B;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xAE30;&#xC885; lobule &#xBAA8;&#xBC29; &#xB808;&#xC774;&#xB514;&#xC5BC; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xAC74;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xD1B5;&#xD574; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; DEP &#xD568;&#xC815; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAC04; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C;-&#xBCD1;&#xB82C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC774;&#xAE30;&#xC885; &#xAC04; &#xC140; &#xB0B4;&#xC7A5; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD544;&#xB4DC; &#xC720;&#xB3C4; dielectrophoresis &#xD2B8;&#xB7A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Biomim&eacute;ticos patrones heterog&eacute;neos de c&eacute;lulas hep&aacute;ticas y endoteliales, que partir al azar distribuci&oacute;n las c&eacute;lulas dentro de la c&aacute;mara de microfluidos, mediante el dise&ntilde;o de chip de mejorada dielectroforesis inducida por el campo (DEP) trampa es demostrado y divulgado en este papel. El dise&ntilde;o de matriz de electrodos conc&eacute;ntricos-estrellado-tip en este chip genera campos el&eacute;ctricos de patr&oacute;n radial para la manipulaci&oacute;n de DEP de las c&eacute;lulas del h&iacute;gado vivos. Mediante la construcci&oacute;n de la forma geom&eacute;trica y la distribuci&oacute;n de puntas radiados, los electrodos DEP mejoran los gradientes de campo el&eacute;ctrico espaciales deseados para orientar y encadenar las c&eacute;lulas individuales para formar el patr&oacute;n deseado biomim&eacute;ticos. Con esta propuesta de dise&ntilde;o de chip microflu&iacute;dico, los hepatocitos originales distribuidos al azar dentro de la c&aacute;mara de microfluidos pueden manipularse en paralelo y alinean en el patr&oacute;n deseado perla cadena matriz. Este patr&oacute;n radial imita la morfolog&iacute;a lobulada de tejido del h&iacute;gado real. Las c&eacute;lulas endoteliales, entonces, est&aacute;n atrapadas en la matriz de perla cadena adicional e instalarse en el medio del espacio la matriz anterior de perla cadena hep&aacute;tica. Este chip de celular-laboratorio, demostramos la reconstrucci&oacute;n in vitro del patr&oacute;n radial l&oacute;bulo-mim&eacute;tico heterog&eacute;neo con viabilidad celular buena despu&eacute;s de patrones de la c&eacute;lula. Este trabajo reporta el patr&oacute;n en paralelo r&aacute;pido de los tipos duales de c&eacute;lulas vivas h&iacute;gados v&iacute;a la trampa DEP mejorada dentro del chip microflu&iacute;dico.

R&aacute;pida heterog&eacute;neo c&eacute;lulas hep&aacute;ticas en el chip patrones a trav&eacute;s de la captura mejorada dielectroforesis inducida por el campo.

&#x5DE5;&#x7A0B;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x5668;&#x5B98;&#x4F53;&#x5916;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9635;&#x5217;&#x6280;&#x672F;&#x53D1;&#x5C55;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5728;&#x9884;&#x5148;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7684;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x8D28;&#x91CF;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E92;&#x52A8;&#x63A2;&#x7D22;&#x4E09;&#x7EF4;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x9664;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4ECB;&#x7535;&#x6CF3; (DEP)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6709;&#x5229;&#x9635;&#x5217;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x901F;&#x5EA6;&#x5FEB;&#x3001; &#x64CD;&#x4F5C;&#x65B9;&#x4FBF;&#x3001; &#x4F4E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#x548C;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x56DE;&#x987E;&#x4E86; DEP &#x57FA;&#x4E8E;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7535;&#x6781;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x3001; &#x9002;&#x5408;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x548C;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x3001; &#x5F71;&#x54CD;&#x7535;&#x6D41;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x7EC4;&#x5408;&#x6F5C;&#x529B;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x751F;&#x6210;&#x4E09;&#x7EF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x7684;&#x6700;&#x65B0;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

&#x4ECB;&#x7535;&#x6CF3;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x9635;&#x5217;&#x3002;

Engineering functional tissues and organs in vitro is considered integral to regenerative medicine. Many recent cell patterning technique developments position cells at a pre-designated pattern to improve tissue engineering efficiency and quality and to facilitate 3-D cell-cell interaction exploration. Among these techniques, dielectrophoresis (DEP)-based cell patterning advantageously offers speed, ease of operation, low degree of cell damage, and precision. This article reviews recent advances in DEP-based patterning techniques, including electrode design, suitable buffer and hydrogel, effects of the electric current to cells, combination potential with other techniques, as well as efforts to generate 3-D tissues.

Dielectrophoresis based-cell patterning for tissue engineering.

Ing&eacute;nierie fonctionnelles tissus et organes in vitro est consid&eacute;r&eacute; comme faisant partie int&eacute;grante de la m&eacute;decine r&eacute;g&eacute;n&eacute;rative. Nombreux d&eacute;veloppements r&eacute;cents de la technique du patterning cellule positionner les cellules &agrave; un mod&egrave;le pr&eacute;-d&eacute;sign&eacute;s pour am&eacute;liorer la qualit&eacute; et l&#39;efficacit&eacute; de g&eacute;nie tissulaire et &agrave; faciliter l&#39;exploration des interactions cellule-cellule 3D. Parmi ces techniques, dielectrophoresis (DEP)-fonction cellulaire avantageusement le patterning offre vitesse, facilit&eacute; d&#39;utilisation, faible degr&eacute; de dommages cellulaires et de pr&eacute;cision. Cet article passe en revue les progr&egrave;s r&eacute;cents dans les techniques de mod&eacute;lisation ax&eacute;e sur le DEP, y compris la conception de l&#39;&eacute;lectrode, tampon ad&eacute;quat et hydrogel, effets du courant &eacute;lectrique aux cellules, les possibilit&eacute;s de combinaison avec d&#39;autres techniques, ainsi que les efforts visant &agrave; g&eacute;n&eacute;rer des tissus 3D.

Di&eacute;lectrophor&egrave;se base-cell patterning pour l&#39;ing&eacute;nierie tissulaire.

Ingenieur funktionale Gewebe und Organe, die in-vitro-gilt als wesentlich f&uuml;r die regenerative Medizin. Viele aktuelle Zelle Musterung Technik Entwicklungen positionieren Zellen auf eine bestimmte Muster Gewebe technische Effizienz und Qualit&auml;t zu verbessern und 3-d-Zell-Zell-Interaktion-Exploration zu erleichtern. Unter dieser Techniken, Dielektrophorese (DEP)-je Zelle vorteilhaft Musterung bietet Geschwindigkeit, einfache Bedienung, geringer Grad von Zellsch&auml;den und Pr&auml;zision. Dieses Aufsatzes j&uuml;ngste Fortschritte in der Musterung DEP-basierte Techniken, einschlie&szlig;lich Elektrodenkonstruktion, geeignete Puffer und Hydrogel, Auswirkungen der elektrischen Strom zu Zellen, Potenzial der Kombination mit anderen Techniken, sowie die Bem&uuml;hungen um 3-d Gewebe zu generieren.

Dielektrophorese Basis-Zelle Musterung f&uuml;r Tissue-Engineering.

Ingegneria funzionali tessuti e organi in vitro &egrave; considerata parte integrante della medicina rigenerativa. Molti sviluppi recenti di cella patterning tecnica posizione celle a un modello prestabilito per migliorare la qualit&agrave; e l&#39;efficienza di ingegneria dei tessuti e per facilitare l&#39;esplorazione di interazione cellula-cellula 3D. Tra queste tecniche, dielettroforesi (DEP)-cella basata creazione vantaggiosamente offre velocit&agrave;, semplicit&agrave; d&#39;uso, basso grado di danni cellulari e precisione. Questo articolo recensioni recenti progressi nelle tecniche di patterning DEP-based, incluso elettrodo design, buffer adatto e idrogel, effetti della corrente elettrica a celle, potenziale di combinazione con altre tecniche, come pure gli sforzi per generare tessuti tridimensionali.

Dielettroforesi basato su celle creazione di serie per ingegneria tissutale.

&#x5DE5;&#x5B66;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7D44;&#x7E54;&#x3084;&#x81D3;&#x5668;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306F;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x6240;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3; &#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3068;&#x54C1;&#x8CEA;&#x5411;&#x4E0A;&#x3068; 3&#x6B21;&#x5143;&#x7D30;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x63A2;&#x67FB;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;, &#x8A98;&#x96FB;&#x6CF3;&#x52D5; (DEP) &#x306E;&#x9593;&#x3067;-&#x6709;&#x5229;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30BB;&#x30EB;&#x901F;&#x5EA6;&#x3001;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306E;&#x5BB9;&#x6613;&#x3055;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x3055;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6975;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3068;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;3&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x4ED6;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306B;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x542B;&#x3080; DEP &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x3092;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A98;&#x96FB;&#x6CF3;&#x52D5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;-&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC140; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xACFC; &#xD488;&#xC9C8;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558; &#xACE0; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC140; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD0D0;&#xC0AC;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC;-&#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC95;, dielectrophoresis (DEP) &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C;-&#xAE30;&#xBC18;&#xB41C; &#xC140; &#xD328;&#xD134;&#xD654; advantageously &#xC81C;&#xACF5; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xC6A9;&#xC774;&#xC131;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC0C1;, &#xACE0; &#xC815;&#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC815;&#xB3C4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; DEP &#xAE30;&#xBC18; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD; &#xAE30;&#xC220;, &#xC804;&#xADF9; &#xB514;&#xC790;&#xC778;, &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xBC84;&#xD37C; hydrogel&#xC758; &#xC140;, 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB178;&#xB825; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC220;, &#xC870;&#xD569; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB958; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBC1C;&#xC804; &#xAC80;&#xD1A0;.

Dielectrophoresis &#xAE30;&#xBC18; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tejidos funcionales con ingenier&iacute;a y &oacute;rganos in vitro se considera esencial para la medicina regenerativa. Muchas c&eacute;lulas patrones t&eacute;cnica novedades colocar las c&eacute;lulas en un patr&oacute;n predesignada para mejorar la calidad y eficacia de la ingenier&iacute;a del tejido y para facilitar la exploraci&oacute;n de interacci&oacute;n c&eacute;lula-c&eacute;lula 3D. Entre estas t&eacute;cnicas, dielectroforesis (DEP)-celular basado en patrones ventajosamente ofrece velocidad, facilidad de operaci&oacute;n, bajo grado de da&ntilde;o celular y precisi&oacute;n. Este art&iacute;culo repasa los avances recientes en t&eacute;cnicas basadas en el DEP de patrones, incluyendo dise&ntilde;o de electrodo, tamp&oacute;n adecuado e hidrogel, efectos de la corriente el&eacute;ctrica a las c&eacute;lulas, el potencial de la combinaci&oacute;n con otras t&eacute;cnicas, as&iacute; como esfuerzos para generar tejidos 3D.

Dielectroforesis basado-c&eacute;lula patrones para ingenier&iacute;a de tejidos.

UDP-glucosa deshidrogenasa (UGDH) cataliza un NAD de dos etapas (+)-oxidaci&oacute;n dependiente de la UDP-glucosa para producir &aacute;cido UDP-glucur&oacute;nico, que es un sustrato com&uacute;n para la bios&iacute;ntesis de exopolisac&aacute;rido. Buscando la Pseudomonas aeruginosa PAO1 base de datos del genoma de un UGDH ha ayudado a identificar dos marcos de lectura abierta, PA2022 y PA3559, que puede codificar un UGDH. Para aclarar su identidad enzim&aacute;tica, los dos genes fueron clonados y se sobreexpresa en Escherichia coli, y las prote&iacute;nas recombinantes se purificaron. Tanto los productos de genes est&aacute;n activos como d&iacute;meros y son capaces de utilizar UDP-glucosa como sustrato para generar &aacute;cido UDP-glucur&oacute;nico. Los valores de k de PA2022 y PA3559 para la UDP-glucosa son aproximadamente 0,1 y 0,4 mM, mientras que los valores de k para NAD(+) son de 0,5 y 2,0 mM, respectivamente. En comparaci&oacute;n con PA3559, el PA2022 exhibe m&aacute;s amplia especificidad de sustrato, utilizando TDP-glucosa y UDP-N-acetilglucosamina con un tercio la velocidad de con la UDP-glucosa. El mutante de PA2022 y PA2022-PA3559 doble mutante, pero no el mutante PA3559, es m&aacute;s susceptible a la ampicilina, cloranfenicol y cefotaxima. El mutante PA3559, sin embargo, muestra una resistencia reducida a la polimixina B en comparaci&oacute;n con el tipo salvaje PAO1. Finalmente, el an&aacute;lisis PCR de tiempo real indican que PA3559 se expresa principalmente en bajas concentraciones de mg, que contrasta con la expresi&oacute;n constitutiva de PA2022. Aunque tanto las enzimas catalizan la misma reacci&oacute;n, sus propiedades enzim&aacute;ticas y perfiles de expresi&oacute;n g&eacute;nica indican que desempe&ntilde;an distintas funciones fisiol&oacute;gicas en p. aeruginosa, tal y como refleja diversos fenotipos de los mutantes.

An&aacute;lisis comparativo de dos Deshidrogenasas de UDP-glucosa en Pseudomonas aeruginosa PAO1.

UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x8131;&#x6C22;&#x9176; (UGDH) &#x50AC;&#x5316;&#x4E24;&#x6B65; NAD (+)-&#x4F9D;&#x8D56;&#x6C27;&#x5316;&#x7684; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x751F;&#x6210; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x919B;&#x9178;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5171;&#x6027;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x591A;&#x7CD6;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x641C;&#x7D22; UGDH &#x94DC;&#x7EFF;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC; PAO1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6570;&#x636E;&#x57FA;&#x5DF2;&#x5E2E;&#x52A9;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6;&#xFF0C;PA2022 &#x548C; PA3559&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x5BF9; UGDH &#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6F84;&#x6E05;&#x5176;&#x9176;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;, &#x548C;&#x4E86;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x662F;&#x79EF;&#x6781;&#x4E3A;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#xFF0C;&#x80FD;&#x591F;&#x5229;&#x7528; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x8D28;&#x751F;&#x6210; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x919B;&#x9178;&#x3002;PA2022 &#x548C; PA3559 &#x7684; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x7684; K(m) &#x503C;&#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 0.4 0.1 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF0C;&#x800C; NAD(+) &#x7684; K(m) &#x503C;&#x5206;&#x522B;&#x4E3A; 0.5 &#x548C; 2.0 m m&#x3002;PA2022 &#x4E0E; PA3559 &#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x5C55;&#x54C1;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5E95;&#x7269;&#x4E13;&#x4E00;&#x6027;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528; TDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x548C; UDP-N-&#x4E59;&#x9170;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x4E0E;&#x4E09;&#x5206;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x3002;PA2022 &#x7A81;&#x53D8;&#x548C; PA2022 PA3559 &#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; PA3559 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5747;&#x8F83;&#x6613;&#x60A3;&#x6C2F;&#x9709;&#x7D20;&#x3001; &#x5934;&#x5B62;&#x567B;&#x809F;&#x3001; &#x6C28;&#x82C4;&#x897F;&#x6797;&#x3002;PA3559 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x591A;&#x7C98;&#x83CC; B &#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; PAO1 &#x76F8;&#x6BD4;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x65F6; PCR &#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;PA3559 &#x8868;&#x793A;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x5728;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; Mg(2+)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E0E;&#x672C;&#x6784;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; PA2022 &#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x9C9C;&#x660E;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9176;&#x50AC;&#x5316;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5176;&#x9176;&#x5B66;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x8868;&#x660E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x53D1;&#x6325;&#x7EFF;&#x8113;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6240;&#x53CD;&#x6620;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x8868;&#x578B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x3002;

&#x4E24;&#x4E2A; UDP-&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; dehydrogenases &#x94DC;&#x7EFF;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC; PAO1 &#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

UDP-glucose dehydrogenase (UGDH) catalyzes a two-step NAD(+)-dependent oxidation of UDP-glucose to produce UDP-glucuronic acid, which is a common substrate for the biosynthesis of exopolysaccharide. Searching the Pseudomonas aeruginosa PAO1 genome data base for a UGDH has helped identify two open reading frames, PA2022 and PA3559, which may encode a UGDH. To elucidate their enzymatic identity, the two genes were cloned and overexpressed in Escherichia coli, and the recombinant proteins were purified. Both the gene products are active as dimers and are capable of utilizing UDP-glucose as a substrate to generate UDP-glucuronic acid. The K(m) values of PA2022 and PA3559 for UDP-glucose are approximately 0.1 and 0.4 mM, whereas the K(m) values for NAD(+) are 0.5 and 2.0 mM, respectively. Compared with PA3559, PA2022 exhibits broader substrate specificity, utilizing TDP-glucose and UDP-N-acetylglucosamine with one-third the velocity of that with UDP-glucose. The PA2022 mutant and PA2022-PA3559 double mutant, but not the PA3559 mutant, are more susceptible to chloramphenicol, cefotaxime, and ampicillin. The PA3559 mutant, however, shows a reduced resistance to polymyxin B compared with wild type PAO1. Finally, real time PCR analysis indicates that PA3559 is expressed primarily in low concentrations of Mg(2+), which contrasts with the constitutive expression of PA2022. Although both the enzymes catalyze the same reaction, their enzymatic properties and gene expression profiles indicate that they play distinct physiological roles in P. aeruginosa, as reflected by different phenotypes displayed by the mutants.

Comparative analysis of two UDP-glucose dehydrogenases in Pseudomonas aeruginosa PAO1.

UDP-glucose-d&eacute;shydrog&eacute;nase (UGDH) catalyse une NAD en deux &eacute;tapes (+)-oxydation d&eacute;pendante de l&#39;UDP-glucose pour produire de l&#39;acide glucuronique-UDP, qui est un substrat commun pour la biosynth&egrave;se des exopolysaccharides. Cherchez un UGDH de la Pseudomonas aeruginosa PAO1 base de donn&eacute;es de g&eacute;nome a permis d&#39;identifier deux cadres ouverts de lecture, PA2022 et PA3559, qui peut coder un UGDH. Afin d&#39;&eacute;lucider leur identit&eacute; enzymatique, les deux g&egrave;nes ont &eacute;t&eacute; clon&eacute;s et surexprim&eacute;s chez Escherichia coli, et les prot&eacute;ines recombinantes ont &eacute;t&eacute; purifi&eacute;es. Les produits des g&egrave;nes sont actifs comme dim&egrave;res et sont capables d&#39;utiliser UDP-glucose comme substrat pour g&eacute;n&eacute;rer de l&#39;acide glucuronique-UDP. Les valeurs de K(m) de PA2022 et PA3559 pour l&#39;UDP-glucose sont 0,1 et 0,4 mM environ, tandis que les valeurs de K(m) de NAD(+) sont de 0,5 et 2,0 mM, respectivement. Par rapport &agrave; PA3559, PA2022 expositions plus large sp&eacute;cificit&eacute; de substrat, utilisant PDT-glucose et UDP-N-ac&eacute;tylglucosamine avec un tiers la vitesse de celle avec UDP-glucose. Le mutant PA2022 et PA2022-PA3559 double mutant, mais pas le mutant PA3559, est plus sensible &agrave; l&#39;ampicilline, le chloramph&eacute;nicol et c&eacute;fotaxime. Le mutant PA3559, cependant, montre une r&eacute;sistance moindre &agrave; la polymyxine B par rapport &agrave; la souche sauvage PAO1. Enfin, l&#39;analyse PCR en temps r&eacute;el indique que PA3559 s&#39;exprime principalement &agrave; de faibles concentrations de Mg(2+), ce qui contraste avec l&#39;expression constitutive de la PA2022. Bien que les deux enzymes catalysent la m&ecirc;me r&eacute;action, leurs propri&eacute;t&eacute;s enzymatiques et les profils d&#39;expression g&eacute;nique indiquent qu&#39;ils jouent des r&ocirc;les physiologiques distincts chez P. aeruginosa, comme en t&eacute;moigne les diff&eacute;rents ph&eacute;notypes affich&eacute;es par les mutants.

Analyse comparative de deux d&eacute;shydrog&eacute;nases de UDP-glucose chez Pseudomonas aeruginosa PAO1.

UDP-Glucose-Dehydrogenase (UGDH) katalysiert eine zweistufige NAD (+)-abh&auml;ngige Oxidation von UDP-Glucose zu UDP-Glucurons&auml;ure, zu produzieren, das gemeinsame Substrat f&uuml;r die Biosynthese von Exopolysaccharide ist. Suchen eine UGDH der Pseudomonas-Aeruginosa PAO1 Genom-Datenbank hat dazu beigetragen, zwei offene Lesung Frames, PA2022 und PA3559, ein UGDH kodieren kann zu identifizieren. Um ihre enzymatische Identit&auml;t zu erhellen, wurden die beiden Gene geklont Pleuramesotheliom in Escherichia coli und die rekombinante Proteine wurden gereinigt. Sowohl die Genprodukte sind als Dimere aktiv und k&ouml;nnen unter Verwendung von UDP-Glucose als Substrat, UDP-Glucurons&auml;ure zu generieren. Die K(m)-Werte von PA2022 und PA3559 f&uuml;r UDP-Glucose sind ca. 0,1 bis 0,4 mM, die K(m) Werte f&uuml;r NAD(+) 0,5 bis 2,0 mM, bzw.. Verglichen mit PA3559, weist PA2022 breitere Substratspezifit&auml;t, Verwendung von TDP-Glukose und UDP-N-Acetylglucosamin mit einem Drittel der Geschwindigkeit, mit UDP-Glucose. Der Mutant PA2022 und PA2022-PA3559-Doppel-Mutant, aber nicht die PA3559 Mutant, sind anf&auml;lliger f&uuml;r Chloramphenicol, Cefotaxim und Ampicillin. Die PA3559-Mutant, zeigt jedoch eine geringere Resistenz gegen&uuml;ber auch Polymyxin B im Vergleich zu Wildtyp PAO1. Schlie&szlig;lich zeigt Echtzeit-PCR-Analyse, dass PA3559 vor allem in niedrigen Konzentrationen von Mg(2+), zum Ausdruck kommt, die mit der konstitutiven Ausdruck des PA2022 kontrastiert. Obwohl beide Enzyme die gleiche Reaktion katalysieren, zufolge deren enzymatische Eigenschaften und Gen-Ausdruck-Profile sie unterschiedliche physiologische Rolle in p. Aeruginosa, spielen verschiedene Ph&auml;notypen angezeigt, indem die Mutanten deutlich zum Ausdruck kommt.

Vergleichende Analyse von zwei UDP-Glukose-Dehydrogenases in Pseudomonas Aeruginosa PAO1.

UDP-glucosio deidrogenasi (UGDH) catalizza la seguente un NAD in due fasi (+)-dipendente da ossidazione di UDP-glucosio per produrre acido UDP-glucuronico, che &egrave; un comune substrato per la biosintesi di esopolisaccaridi. Alla ricerca di Pseudomonas aeruginosa PAO1 della base di dati del genoma di un UGDH ha contribuito a identificare due open reading frames, PA2022 e PA3559, che pu&ograve; codificare un UGDH. Per chiarire la loro identit&agrave; enzimatica, i due geni sono stati clonati e overexpressed in Escherichia coli, e le proteine ricombinanti sono state purificate. Entrambi i prodotti del gene sono attivi come dimeri e sono capaci di utilizzando UDP-glucosio come substrato per generare acido UDP-glucuronico. I valori di K(m) di PA2022 e PA3559 per UDP-glucosio sono circa 0,1 e 0,4 mM, mentre i valori di K(m) per NAD(+) sono 0,5 e 2,0 mM, rispettivamente. Confrontato con PA3559, PA2022 esibisce pi&ugrave; ampia specificit&agrave; di substrato, che utilizzano TDP-glucosio e UDP-N-acetilglucosamina con un terzo la velocit&agrave; che con UDP-glucosio. Il mutante di PA2022 e PA2022-PA3559 doppio mutante, ma non il mutante PA3559, &egrave; pi&ugrave; sensibile al cloramfenicolo, cefotaxima e ampicillina. Il mutante PA3559, tuttavia, mostra una ridotta resistenza alla polimixina B rispetto al wild type PAO1. Infine, analisi PCR in tempo reale indicano che PA3559 &egrave; espresso principalmente in basse concentrazioni di Mg(2+), che contrasta con l&#39;espressione costitutiva di PA2022. Sebbene entrambi gli enzimi catalizzano la stessa reazione, loro propriet&agrave; enzimatiche e profili di espressione genica indicano che giocano ruoli fisiologici distinti in p. aeruginosa, come riflesso di diversi fenotipi visualizzati da mutanti.

Analisi comparativa delle due dehydrogenases UDP-glucosio in Pseudomonas aeruginosa PAO1.

UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20; (UGDH) &#x89E6;&#x5A92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x4E8C;&#x6BB5; NAD (+)-UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x7CD6;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x3067;&#x3042;&#x308B; UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC; PAO1 &#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x57FA;&#x672C;&#x691C;&#x7D22;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; UGDH PA2022 &#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;UGDH PA3559 &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x8EAB;&#x5143;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8907;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x3082;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3057; UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9; UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;NAD(+) &#x306E; k&#xFF08;m&#xFF09; &#x306E;&#x5024;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; 0.5 &#xFF5E; 2.0 mM &#x3042;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057; PA2022 &#x3068; UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; PA3559 &#x306E; k&#xFF08;m&#xFF09; &#x5024;&#x306F;&#x7D04; 0.1 0.4 mM &#x3067;&#x3059;&#x3002;PA3559 &#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;PA2022 TDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068; UDP-n-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B5;&#x30DF;&#x30F3; UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E; 3 &#x5206;&#x306E; 1 &#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x57FA;&#x8CEA;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PA2022 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068; PA2022 PA3559 &#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x306A;&#x3044; PA3559 &#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E9;&#x30E0;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB; &#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;, &#x30BB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E0;, &#x3068;&#x30A2;&#x30F3;&#x30D4;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;PA3559 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; B &#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; PAO1 &#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; PCR &#x89E3;&#x6790; PA3559 PA2022 &#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x5F0F;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684; Mg(2+) &#x306E;&#x4F4E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x4E3B;&#x306B;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x5B66;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#x3001;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53CD;&#x6620;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC; PAO1 &#x3067;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E; UDP &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x8131;&#x6C34;&#x7D20;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

UDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD6A8;&#xC18C; (UGDH) catalyzes 2 &#xB2E8;&#xACC4; NAD (+)-UDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; exopolysaccharide&#xC758; &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xD310;&#xC740; UDP glucuronic &#xC0B0; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xC885;&#xC18D; &#xC0B0;&#xD654;. &#xB179; &#xB18D; &#xADE0; PAO1 &#xAC8C;&#xB188; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB294; UGDH&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB450; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;, PA2022 &#xBC0F; pa3559&#xB294; UGDH&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xB3D5;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC18C; id &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; overexpressed &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC815;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; &#xC774;&#xD569;&#xCCB4;&#xB85C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; UDP glucuronic &#xC0B0; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; UDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. PA2022 &#xBC0F; UDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; pa3559&#xC758; K(m) &#xAC12;&#xC740; &#xC57D; 0.1 &#xBC0F; 0.4 m m, &#xBC18;&#xBA74; NAD(+)&#xC758; K(m) &#xAC12;&#xC740; 0.5&#xC640; 2.0 m m &#xAC01;&#xAC01;. Pa3559&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;, PA2022 1 / 3&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; UDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9;&#xC73C;&#xB85C;&#xC640; TDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xBC0F; UDP-N-acetylglucosamine&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xAE30;&#xC9C8; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;, &#xC804;&#xC2DC;. PA2022 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; PA2022 PA3559 &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; PA3559 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD398;&#xB2C8;, cefotaxime, &#xC554; &#xD53C; &#xC2E4;&#xB9B0;&#xC744; &#xB354; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB418;&#xAE30; &#xC27D;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; PA3559 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xAC10;&#xC18C; &#xC800;&#xD56D; polymyxin B &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; pao1&#xC640; &#xBE44;&#xAD50;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xBD84;&#xC11D; PA3559 Mg(2+), pa2022&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xB300;&#xC870;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC19;&#xC740; &#xBC18;&#xC751; &#xCD09;&#xB9E4;, &#xBE44;&#xB85D; enzymatic &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC774; P. &#xB18D; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xB2E4;&#xB978; &#xACE0;&#xAE30;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC18;&#xC601;.

&#xB179; &#xB18D; &#xADE0; pao1&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; UDP-&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; dehydrogenases&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;.

&#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC; &#xC9D1;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; spheroids &#xC815;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; &#xC811;&#xCC29;&#xC2DD; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB85C; &#xAD6C;&#xBD84;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xB2E8;&#xCE35; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;, &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; spheroids &#xC2E4;&#xC81C; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; spheroids &#xC804;&#xC774; &#xCE68;&#xACF5; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xAD34; &#xC885;&#xC591; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC8FC; &#xB610;&#xB294; &#xC2DC; &#xC870; &#xC140; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC131;&#xB2A5; spheroids&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xB420; &#xB54C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; spheroids &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xAC74;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAC74;&#xBB3C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD615;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;, &#xC0DD;&#xBA85; &#xC758;&#xD559; &#xC5B4;&#xD50C;&#xB9AC;&#xCF00;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xBB38;&#xD654;, &#xC870;&#xC791; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xAC80;&#xD1A0;.

&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC758;&#xD559; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;.

Muchos tipos de c&eacute;lulas de mam&iacute;fero pueden agregar y se diferencian en 3-d esferoides multicelulares cuando cultivados en un ambiente v: o suspensi&oacute;n. En comparaci&oacute;n con cultivos convencionales monocapa, esferoides multicelulares se asemejan a tejidos reales mejores en t&eacute;rminos de propiedades estructurales y funcionales. Esferoides multicelulares formados por las c&eacute;lulas transformadas son ampliamente utilizados como modelos de tumores avascular de invasi&oacute;n y met&aacute;stasis de la investigaci&oacute;n y para la investigaci&oacute;n terap&eacute;utica. Muchas c&eacute;lulas primarias o progenitor por el contrario, muestran significativamente mayor viabilidad y rendimiento funcional cuando se cultiva como esferoides. Esferoides multicelulares en este aspecto son unidades de construcci&oacute;n ideal para la reconstrucci&oacute;n del tejido. Aqu&iacute; repasamos la comprensi&oacute;n actual de los mecanismos de formaci&oacute;n esferoide multicelulares, sus aplicaciones biom&eacute;dicas y recientes avances en las t&eacute;cnicas de cultivo, la manipulaci&oacute;n y an&aacute;lisis de esferoide.

Avances recientes en la cultura del esferoide multicelulares tridimensional para la investigaci&oacute;n biom&eacute;dica.

&#x8BB8;&#x591A;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x4E09;&#x7EF4;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x65F6;&#x6682;&#x505C;&#x6216;&#x975E;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4F20;&#x7EDF;&#x7684;&#x5355;&#x5C42;&#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5B9E;&#x9645;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x5C5E;&#x6027;&#x66F4;&#x597D;&#x3002;&#x7531;&#x8F6C;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x88AB;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7528;&#x4F5C;&#x80A1;&#x9AA8;&#x5934;&#x80BF;&#x7624;&#x6A21;&#x578B;&#x8F6C;&#x79FB;&#x548C;&#x6D78;&#x6DA6;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x7B5B;&#x67E5;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6216;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7403;&#x957F;&#x5927;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x65B9;&#x9762;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x662F;&#x7406;&#x60F3;&#x5927;&#x53A6;&#x5355;&#x4F4D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x91CD;&#x5EFA;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x673A;&#x5236;&#x53CA;&#x5176;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x5E94;&#x7528;&#x548C;&#x7403;&#x4F53;&#x3001; &#x6587;&#x5316;&#x3001; &#x64CD;&#x4F5C;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

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Many types of mammalian cells can aggregate and differentiate into 3-D multicellular spheroids when cultured in suspension or a nonadhesive environment. Compared to conventional monolayer cultures, multicellular spheroids resemble real tissues better in terms of structural and functional properties. Multicellular spheroids formed by transformed cells are widely used as avascular tumor models for metastasis and invasion research and for therapeutic screening. Many primary or progenitor cells on the other hand, show significantly enhanced viability and functional performance when grown as spheroids. Multicellular spheroids in this aspect are ideal building units for tissue reconstruction. Here we review the current understanding of multicellular spheroid formation mechanisms, their biomedical applications, and recent advances in spheroid culture, manipulation, and analysis techniques.

Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research.

Plusieurs types de cellules de mammif&egrave;res peuvent agr&eacute;ger et de se diff&eacute;rencier en 3D sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires lorsqu&#39;il est cultiv&eacute; dans un environnement laissez-les ou de suspension. Par rapport &agrave; des cultures monocouches classiques, sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires ressemblent &agrave; des vrais tissus de mieux en termes de propri&eacute;t&eacute;s structurales et fonctionnelles. Sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires, form&eacute;s par des cellules transform&eacute;es sont largement utilis&eacute;s comme mod&egrave;les de tumeur avasculaire &agrave; la recherche de m&eacute;tastases et l&#39;invasion et pour le criblage th&eacute;rapeutique. Beaucoup de cellules primaires ou anc&ecirc;tre montre en revanche, une viabilit&eacute; accrue consid&eacute;rablement et performance fonctionnelle lorsqu&#39;il est cultiv&eacute; comme sph&eacute;ro&iuml;des. Sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires dans cet aspect sont immeuble id&eacute;al pour reconstruction des tissus. Ici nous passons en revue les connaissances actuelles des m&eacute;canismes de formation des sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires, leurs applications biom&eacute;dicales et des progr&egrave;s r&eacute;cents dans les techniques de culture, la manipulation et l&#39;analyse de sph&eacute;ro&iuml;de.

Avances r&eacute;centes dans la culture de sph&eacute;ro&iuml;de pluricellulaires tridimensionnels pour la recherche biom&eacute;dicale.

Viele Arten von S&auml;ugetierzellen k&ouml;nnen aggregieren und differenzieren sich in 3-d vielzelligen Sph&auml;roide beim aussetzen oder eine nonadhesive Umgebung kultiviert. Im Vergleich zu konventionellen Monolayer-Kulturen, &auml;hneln vielzelligen Sph&auml;roide echte Gewebe besser in Bezug auf strukturelle und funktionelle Eigenschaften. Vielzellige Sph&auml;roide von transformierten Zellen gebildet werden h&auml;ufig als avaskul&auml;re Tumor Modelle f&uuml;r Metastasierung und Invasion Forschung und therapeutische Screening verwendet. Viele prim&auml;r- oder Progenitor Zellen zeigen auf der anderen Seite deutlich verbesserte Rentabilit&auml;t und funktionelle Leistung, wenn als Sph&auml;roide gewachsen. Vielzellige Sph&auml;roide in dieser Hinsicht sind ideale Bauteile zur Geweberekonstruktion. Hier schauen wir uns das aktuelle Verst&auml;ndnis der vielzelligen Sph&auml;roid Bildung Mechanismen, biomedizinische Anwendungen und j&uuml;ngste Fortschritte in der Sph&auml;roid-Kultur, Manipulation und Analyse-Techniken.

J&uuml;ngste Fortschritte in der dreidimensionalen vielzelligen Sph&auml;roid Kultur f&uuml;r biomedizinische Forschung.

Molti tipi di cellule di mammifero possono aggregare e differenziarsi in 3D sferoidi pluricellulari quando coltivati in sospensione o in un ambiente nonadhesive. Rispetto alle colture monostrato convenzionale, sferoidi pluricellulari assomigliano a veri tessuti migliori in termini di propriet&agrave; strutturali e funzionali. Sferoidi pluricellulari formate da cellule trasformate sono ampiamente utilizzati come modelli di tumore avascolare per ricerca di metastasi ed invasione e per lo screening terapeutico. Molte cellule primarie o progenitore d&#39;altra parte, mostrano significativamente maggiore redditivit&agrave; e prestazioni funzionali quando coltivata come sferoidi. Pluricellulari sferoidi in questo aspetto sono unit&agrave; di costruzione ideale per la ricostruzione del tessuto. Qui esaminiamo l&#39;attuale comprensione dei meccanismi di formazione di sferoide pluricellulari, loro applicazioni biomediche e i recenti progressi nelle tecniche di coltura, la manipolazione e analisi sferoide.

I recenti progressi nella cultura sferoide pluricellulari tridimensionale per la ricerca biomedica.

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x300C;&#x30E6;&#x30D4;&#x30BB;&#x30EB; n&#x300D;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306E; 3-D &#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x96C6;&#x7D04;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x5358;&#x5C64;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7D44;&#x7E54;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x30FB;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x9762;&#x3067;&#x826F;&#x304F;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x63DB;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x7121;&#x8840;&#x7BA1;&#x816B;&#x760D;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8EE2;&#x79FB;&#x3001;&#x6D78;&#x6F64;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x80B2;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x80FD;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x5EFA;&#x306E;&#x5358;&#x4F4D;&#x306F;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x5EFA;&#x7269;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x5F62;&#x6210;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x533B;&#x5B66;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3001;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x6790;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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Multicellular spheroids are useful building blocks for tissue reconstruction. This study reports a simple technique called magnetic organoid patterning for assembly of spheroids into a complex tissue-mimicking construct. Spheroids were labeled magnetically using co-incubation of RGD peptide-conjugated magnetic microparticles and single cells in suspension culture. The labeled spheroids can be manipulated individually or in parallel with a magnet without producing apparent effects on cell growth and migration. Spheroid patterns such as rings, lines, and arrays can be efficiently generated using this method. The patterned spheroid can be immobilized in functional hydrogels, in which fusion of neighboring spheroids and tissue-specific features were observed. Spheroid patterns temporarily encapsulated in a thermal-responsive hydrogel can be stacked layer by layer to generate thick three-dimensional (3D) tissues. These results indicate that magnetic organoid patterning is useful for construction of complex 3D tissue and will find applications in cell-to-cell interaction research, drug screening, and regenerative medicine.

Magnetic reconstruction of three-dimensional tissues from multicellular spheroids.

&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x662F;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x6784;&#x5EFA;&#x5757;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x91CD;&#x5EFA;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x62A5;&#x544A;&#x79F0;&#x4E3A;&#x78C1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x9635;&#x5217;&#x4E3A;&#x7403;&#x7684;&#x7EC4;&#x88C5;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4EFF;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x7403;&#x88AB;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A;&#x78C1;&#x4F7F;&#x7528; co-incubation &#x7684; RGD &#x80BD;&#x5171;&#x8F6D;&#x78C1;&#x6027;&#x5FAE;&#x7C92;&#x548C;&#x60AC;&#x6D6E;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5355;&#x72EC;&#x6216;&#x4E0E;&#x78C1;&#x94C1;&#x5E76;&#x884C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x64CD;&#x4F5C;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x7403;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x751F;&#x6210;&#x7403;&#x4F53;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5982;&#x73AF;&#x3001; &#x7EBF;&#x6761;&#x548C;&#x6570;&#x7EC4;&#x3002;&#x5E26;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x7403;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x529F;&#x80FD;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#xFF0C;&#x5728;&#x54EA;&#x4E9B;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x7403;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x548C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6682;&#x65F6;&#x5C01;&#x88C5;&#x5728;&#x70ED;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x7684;&#x7403;&#x4F53;&#x6A21;&#x5F0F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x662F;&#x5806;&#x79EF;&#x5C42;&#x751F;&#x6210;&#x539A;&#x539A;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x78C1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x9635;&#x5217;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x6784;&#x5EFA;&#x590D;&#x6742;&#x7684; 3D &#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x5C06;&#x5728;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x3001; &#x836F;&#x7269;&#x7B5B;&#x9009;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x4E2D;&#x67E5;&#x627E;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;

&#x4ECE;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7403;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x78C1;&#x91CD;&#x5EFA;&#x3002;

Sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires sont utiles pour la reconstruction des tissus. Cette &eacute;tude d&eacute;crit une technique simple appel&eacute;e organo&iuml;de magn&eacute;tique pour l&#39;assemblage des sph&eacute;ro&iuml;des dans une construction complexe de tissus imitant le patterning. Sph&eacute;ro&iuml;des ont &eacute;t&eacute; marqu&eacute;s par magn&eacute;tisme &agrave; l&#39;aide d&#39;incubation des microparticules magn&eacute;tiques conjugu&eacute; peptide RGD et des cellules individuelles en suspension. Les sph&eacute;ro&iuml;des marqu&eacute;s peuvent &ecirc;tre manipul&eacute;s individuellement ou en parall&egrave;le avec un aimant sans produire d&#39;effets apparents sur la croissance cellulaire et la migration. Patrons de sph&eacute;ro&iuml;de tels que bagues, lignes et tableaux peuvent &ecirc;tre g&eacute;n&eacute;r&eacute;s efficacement &agrave; l&#39;aide de cette m&eacute;thode. L&#39;ellipso&iuml;de &agrave; motifs peut &ecirc;tre immobilis&eacute;e dans des hydrogels fonctionnels, dans lequel fusion des voisins sph&eacute;ro&iuml;des et caract&eacute;ristiques sp&eacute;cifiques des tissus ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s. Les mod&egrave;les de sph&eacute;ro&iuml;de temporairement encapsul&eacute;s dans un hydrogel thermique sensible peuvent &ecirc;tre empil&eacute;es couche par couche pour g&eacute;n&eacute;rer des tissus &eacute;pais &agrave; (3D) en trois dimensions. Ces r&eacute;sultats indiquent qu&#39;organo&iuml;de magn&eacute;tique est utile pour la construction du tissu 3D complexe et va trouver des applications dans la recherche sur les interactions cellule-cellule, d&eacute;pistage de drogue et la m&eacute;decine r&eacute;g&eacute;n&eacute;rative.

Reconstruction magn&eacute;tique des tissus en trois dimensions des sph&eacute;ro&iuml;des multicellulaires.

Vielzellige Sph&auml;roide sind n&uuml;tzliche Bausteine f&uuml;r Geweberekonstruktion. Diese Studie berichtet eine einfache Technik, die magnetische organoide Musterung zur Montage der Sph&auml;roide in ein komplexes Gewebe-Nachahmung-Konstrukt genannt. Sph&auml;roide wurden magnetisch mit Co-incubation RGD Peptid-konjugierten magnetischer Mikropartikel und Einzelzellen in Suspensionskultur beschriftet. Die beschrifteten Sph&auml;roide k&ouml;nnen einzeln oder parallel mit einem Magneten manipuliert werden, ohne offensichtlichen Auswirkungen auf Migration und Wachstum von Zellen. Sph&auml;roid Mustern wie Ringe, Linien und Arrays k&ouml;nnen mit dieser Methode effizient erzeugt werden. Die gemusterten Sph&auml;roid kann in funktionale Hydrogele, die Fusion der benachbarten Sph&auml;roide immobilisiert werden und Gewebe-spezifischen Funktionen beobachtet. Sph&auml;roid-Muster, die vor&uuml;bergehend in einem Thermal-responsive Hydrogel gekapselt k&ouml;nnen Schicht f&uuml;r Schicht dicken dreidimensionale (3D) Gewebe zu generieren gestapelt werden. Diese Ergebnisse zeigen, dass magnetische organoide Musterung eignet sich zum Bau von komplexen 3D Gewebe und Anwendungen in der Zell-Zell-Interaktionsforschung, Drug Screening und regenerative Medizin finden.

Magnetische Rekonstruktion dreidimensionaler Gewebe von mehrzelligen Sph&auml;roide.

Sferoidi pluricellulari sono utili elementi costitutivi per la ricostruzione del tessuto. Questo studio riporta una semplice tecnica chiamata organoid magnetico creazione di serie per il montaggio di sferoidi in un costrutto complesso tessuto imitando. Sferoidi sono stati etichettati magneticamente utilizzando co-incubation di RGD coniugati peptide microparticelle magnetiche e le singole cellule in coltura di sospensione. Gli sferoidi con etichette possono essere manipolati individualmente o in parallelo con un magnete senza produrre effetti evidenti sulla crescita cellulare e la migrazione. Modelli di sferoide quali anelli, linee e matrici possono essere generati in modo efficiente utilizzando questo metodo. La fantasia sferoide pu&ograve; essere immobilizzato in idrogel funzionale, in cui fusione della vicina sferoidi e tessuto-specifiche caratteristiche sono state osservate. Modelli di sferoide temporaneamente incapsulati in un idrogel termo-sensibile possono essere impilati strato dopo strato per generare spessi tridimensionali dei tessuti (3D). Questi risultati indicano che patterning organoid magnetica &egrave; utile per la costruzione del complesso tessuto 3D e trovare applicazioni nella ricerca di interazione cellula-cellula, screening di stupefacenti e la medicina rigenerativa.

Magnetic ricostruzione dei tessuti tridimensionali da sferoidi pluricellulari.

&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x306E;&#x30D3;&#x30EB;&#x30C9; &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x78C1;&#x6C17;&#x5668;&#x5B98;&#x6BDB;&#x7D30;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306B;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x306E; RGD &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x5171;&#x5F79;&#x78C1;&#x6C17;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x78C1;&#x6C17;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6A19;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x30BB;&#x30EB;&#x6210;&#x9577;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4F34;&#x308F;&#x305A;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4E26;&#x884C;&#x78C1;&#x77F3;&#x3067;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x7DDA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FD1;&#x96A3;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306F;&#x6838;&#x878D;&#x5408;&#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x3067;&#x71B1;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB; &#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x5C64;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5C64;&#x7A4D;&#x5C64;&#x539A; 3 &#x6B21;&#x5143; (3 D) &#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x78C1;&#x6C17;&#x5668;&#x5B98;&#x6BDB;&#x7D30;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; 3 D &#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x5EFA;&#x8A2D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4FBF;&#x5229;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x3001;&#x5275;&#x85AC;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E; 3&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x78C1;&#x6C17;&#x518D;&#x5EFA;&#x3002;

&#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; spheroids&#xB294; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD749;&#xB0B4; &#xB0B8; &#xAD6C;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; spheroids&#xC758; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; organoid &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Spheroids &#xC790;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; RGD &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; &#xD65C;&#xC6A9; &#xC790;&#xC11D; &#xB4A4; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140;&#xC758; co-incubation&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xB958; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; spheroids &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xBD84;&#xBA85; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB610;&#xB294; &#xBCD1;&#xD589; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD328;&#xD134; &#xACE0;&#xB9AC;, &#xB77C;&#xC778;, &#xBC30;&#xC5F4; &#xB4F1;&#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; spheroids&#xC758; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB2A5; hydrogels&#xC5D0; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD00;&#xB828; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F4; &#xBC18;&#xC751; hydrogel&#xC5D0; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xD328;&#xD134; &#xB450;&#xAED8; 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xC2A4;&#xD0DD; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; organoid &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD560; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC74;&#xC124;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xC57D;&#xBB3C; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559;&#xC5D0; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xCC3E;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xADF8;&#xB124;&#xD2F1; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; spheroids&#xC5D0;&#xC11C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xAC74;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Esferoides multicelulares son &uacute;tiles los bloques de construcci&oacute;n para la reconstrucci&oacute;n del tejido. Este estudio reporta una t&eacute;cnica simple llamada magn&eacute;tico organoide patrones para montaje de esferoides en una construcci&oacute;n compleja tejido imitan. Esferoides fueron etiquetados magn&eacute;ticamente mediante nexos de RGD conjugado p&eacute;ptido magn&eacute;tico micropart&iacute;culas y c&eacute;lulas en cultivo de suspensi&oacute;n. Los etiquetado esferoides pueden manipularse individualmente o en paralelo con un im&aacute;n sin producir efectos aparentes en el crecimiento celular y la migraci&oacute;n. Patrones esferoide como anillos, l&iacute;neas y arreglos de discos se pueden generar eficientemente utilizando este m&eacute;todo. El esferoide estampado puede ser inmovilizado en hidrogeles funcionales, en que la fusi&oacute;n de las vecinas esferoides y caracter&iacute;sticas espec&iacute;ficas de tejido fueron observadas. Patrones de esferoide temporalmente encapsulados en un hidrogel sensible termal se pueden apilados capa por capa para generar gruesos tejidos tridimensionales de (3D). Estos resultados indican que patr&oacute;n organoide magn&eacute;tico es &uacute;til para la construcci&oacute;n del complejo tejido 3D y aplicaciones en la investigaci&oacute;n de la interacci&oacute;n de c&eacute;lula a c&eacute;lula, detecci&oacute;n de drogas y medicina regenerativa.

Magn&eacute;tica reconstrucci&oacute;n de tejidos tridimensionales de esferoides multicelulares.

Sangue del cordone ombelicale (UCB) &egrave; riconosciuto come fonte di arricchimento delle cellule progenitrici endoteliali (EPC) con potenziale valore terapeutico. Poich&eacute; la crioconservazione &egrave; il metodo solo affidabile per l&#39;archiviazione a lungo termine delle cellule UCB, l&#39;applicazione clinica di EPCs dipende la nostra capacit&agrave; di acquisirle da campioni crioconservati; Tuttavia, la fattibilit&agrave; di facendo cos&igrave; rimane poco chiara. In questo studio dimostriamo che EPCs pu&ograve; essere isolati da cellule mononucleate derivate da UCB crioconservate (MNCs). Il numero di colonie EPC escrescenza che emerse nella cultura da campioni crioconservati era simile a quello ottenuto da UCB fresco. Inoltre, EPCs ottenuti da MNCs crioconservati sono stati fenotipicamente e funzionalmente indistinguibili da quelli appena isolati, compresa la possibilit&agrave; di forma i vasi sanguigni in vivo. I nostri risultati eliminano la necessit&agrave; di eseguire le procedure di isolamento cellula davanti a future esigenze cliniche e suggeriscono che EPCs derivato da UCB crioconservati possono essere adatto per terapie EPC-correlati.

Cellule progenitrici endoteliali funzionale dal sangue del cordone ombelicale crioconservati.

&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#xFF08;UCB&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x7684;&#x4FA1;&#x5024;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;EPC&#xFF09;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306F;&#x3001;UCB&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x4FDD;&#x7BA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;EPC&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5FDC;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x7372;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x5F53;&#x793E;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x3046;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x5B9F;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306F;&#x4F9D;&#x7136;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;EPC&#x304C;&#x51CD;&#x7D50;UCB&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5358;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x56FD;&#x7C4D;&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x51CD;&#x7D50;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x6587;&#x5316;&#x306B;&#x51FA;&#x73FE;&#x4F38;&#x9577;EPC&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x9BAE;&#x306A;UCB&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x51CD;&#x7D50;&#x591A;&#x56FD;&#x7C4D;&#x4F01;&#x696D;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;EPC&#x306F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3068;in vivo&#x3067;&#x8840;&#x7BA1;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x533A;&#x5225;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5148;&#x306B;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x96E2;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;&#x51CD;&#x7D50;UCB&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;EPC&#x306F;EPC&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#x304B;&#x3089;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;

&#x8110;&#x5E26;&#x8840; (UCB) &#x88AB;&#x516C;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6D53;&#x7F29;&#x6765;&#x6E90;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x529B;) &#x4E0E;&#x6F5C;&#x5728;&#x6CBB;&#x7597;&#x4EF7;&#x503C;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58; UCB &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x5B58;&#x50A8;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x53EF;&#x9760;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6765;&#x83B7;&#x5F97;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x51BB;&#x5B58;&#x6837;&#x54C1; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6837;&#x505A;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#xFF0C;&#x6240;&#x4EE5;&#x4ECD;&#x7136;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x529B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x51BB;&#x5B58; UCB &#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x5355;&#x4E2A;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8DE8;&#x56FD;&#x516C;&#x53F8;) &#x9694;&#x79BB;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x65B0;&#x9C9C; UCB &#x6240;&#x5F97;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269; EPC &#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x6587;&#x5316;&#x4ECE;&#x51BB;&#x5B58;&#x6837;&#x54C1;&#x4E2D;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x6B21;&#x6570;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x529B;&#x4ECE;&#x51BB;&#x5B58;&#x8DE8;&#x56FD;&#x516C;&#x53F8;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86;&#x4ECE;&#x521A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x4F53;&#x5185;&#x5F62;&#x6210;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x8868;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x96BE;&#x4EE5;&#x533A;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x6D88;&#x9664;&#x6267;&#x884C;&#x524D;&#x672A;&#x6765;&#x4E34;&#x5E8A;&#x9700;&#x8981;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4ECE;&#x51BB;&#x5B58; UCB &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x9002;&#x5408;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x603B;&#x627F;&#x5305;&#x76F8;&#x5173;&#x7597;&#x6CD5;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x51BB;&#x5B58;&#x7684;&#x8110;&#x5E26;&#x8840;&#x3002;

Umbilical cord blood (UCB) is recognized as an enriched source of endothelial progenitor cells (EPCs) with potential therapeutic value. Because cryopreservation is the only reliable method for long-term storage of UCB cells, the clinical application of EPCs depends on our ability to acquire them from cryopreserved samples; however, the feasibility of doing so remains unclear. In this study we demonstrate that EPCs can be isolated from cryopreserved UCB-derived mononuclear cells (MNCs). The number of outgrowth EPC colonies that emerged in culture from cryopreserved samples was similar to that obtained from fresh UCB. Furthermore, EPCs obtained from cryopreserved MNCs were phenotypically and functionally indistinguishable from freshly isolated ones, including the ability to form blood vessels in vivo. Our results eliminate the necessity of performing cell isolation procedures ahead of future clinical needs and suggest that EPCs derived from cryopreserved UCB may be suitable for EPC-related therapies.

Functional endothelial progenitor cells from cryopreserved umbilical cord blood.

Sang de cordon ombilical (UCB) est reconnue comme une source enrichie en cellules prog&#xE9;nitrices endoth&#xE9;liales (EPC) avec la valeur th&#xE9;rapeutique potentielle. Parce que la cryoconservation est la seule m&#xE9;thode fiable pour stockage &#xE0; long terme de cellules d&#x26;#39;UCB, l&#x26;#39;application clinique des EPC d&#xE9;pend de notre capacit&#xE9; &#xE0; les acqu&#xE9;rir &#xE0; partir d&#x26;#39;&#xE9;chantillons cryoconserv&#xE9;s, mais la faisabilit&#xE9; de le faire reste incertain. Dans cette &#xE9;tude, nous d&#xE9;montrons que les PEC peuvent &#xEA;tre isol&#xE9;s de la soci&#xE9;t&#xE9; UCB-cryoconserv&#xE9;s d&#xE9;riv&#xE9;s des cellules mononucl&#xE9;aires (MNC). Le nombre de colonies qui ont &#xE9;merg&#xE9; CBE excroissance dans la culture &#xE0; partir d&#x26;#39;&#xE9;chantillons cryoconserv&#xE9;s &#xE9;tait similaire &#xE0; celle obtenue &#xE0; partir d&#x26;#39;UCB frais. En outre, les PEC obtenus &#xE0; partir de cryoconserv&#xE9; multinationales &#xE9;taient ph&#xE9;notypiquement et fonctionnellement identique &#xE0; ceux fra&#xEE;chement isol&#xE9;s, y compris la capacit&#xE9; &#xE0; former des vaisseaux sanguins in vivo. Nos r&#xE9;sultats d&#x26;#39;&#xE9;liminer la n&#xE9;cessit&#xE9; d&#x26;#39;effectuer des proc&#xE9;dures d&#x26;#39;isolement des cellules avant de venir r&#xE9;pondre aux besoins cliniques et sugg&#xE8;rent que les PEC issus de UCB cryoconserv&#xE9;s peuvent &#xEA;tre adapt&#xE9;s pour EPC th&#xE9;rapies li&#xE9;es.

Fonctionnels &#xE0; partir de cellules prog&#xE9;nitrices endoth&#xE9;liales sang de cordon ombilical cryoconserv&#xE9;s

Nabelschnur-Blut (UCB) ist anerkannt als eine angereicherte Quelle von endothelialen Vorl&auml;uferzellen (EPC) mit m&ouml;glichen therapeutischen Wert. Kryokonservierung ist die einzige zuverl&auml;ssige Methode f&uuml;r die langfristige Lagerung von UCB Zellen angewiesen die klinische Anwendung von EPCs auf unsere F&auml;higkeit, sie von kryokonservierten Proben zu erwerben; unklar bleibt jedoch, also die Durchf&uuml;hrbarkeit des Tuns. In dieser Studie zeigen wir, dass EPCs aus kryokonservierten UCB abgeleitete mononukle&auml;ren Zellen (MNU) isoliert werden k&ouml;nnen. Die Anzahl der Auswuchs EPC-Kolonien, die sich in der Kultur von kryokonservierten Proben war &auml;hnlich durch den frischen UCB erhalten. Dar&uuml;ber hinaus wurden EPCs gewonnenen kryokonservierten MNU ph&auml;notypisch und funktionell nicht von frisch isoliert sind, einschlie&szlig;lich der F&auml;higkeit, Form Blutgef&auml;&szlig;e in-vivo. Unsere Ergebnisse beseitigen die Notwendigkeit der Durchf&uuml;hrung Zelle Isolierungsma&szlig;nahmen vor zuk&uuml;nftigen klinischen Anforderungen und schlagen vor, da&szlig; EPCs abgeleitet von kryokonservierten UCB f&uuml;r EPC-bezogene Therapien geeignet sind.

Funktionale endothelialen Vorl&auml;uferzellen aus kryokonservierten Nabelschnurblut.

&#xD0EF; &#xC904; &#xD608;&#xC561; (UCB) &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC801; &#xAC00;&#xCE58;&#xC640; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (Epc)&#xC758; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC6D0;&#xCC9C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; &#xB41C;&#xB2E4;. Cryopreservation UCB &#xC140;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC800;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95; &#xC774;&#xBBC0;&#xB85C; Epc&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9; cryopreserved &#xC0D8;&#xD50C;;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xCDE8;&#xB4DD; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD558;&#xC758; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC740; &#xB108;&#xBB34; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; Epc cryopreserved UCB &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; (MNCs)&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cryopreserved &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; EPC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xC218; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; UCB&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xBE44;&#xC2B7; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Epc cryopreserved Mncs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; phenotypically &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD615;&#xC2DD; &#xD608;&#xAD00; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB2A5;&#xB825; &#xB4F1; &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xAC83;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xBBF8;&#xB798; &#xC784;&#xC0C1;&#xC758; &#xC694;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC55E;&#xC11C; &#xC140; &#xACA9;&#xB9AC; &#xC808;&#xCC28; &#xC218;&#xD589;&#xC758; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0; cryopreserved UCB&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Epc EPC &#xAD00;&#xB828; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Cryopreserved &#xD0EF; &#xC904; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBFCC;&#xB9AC;.

La sangre del cord&#xF3;n umbilical (SCU) es reconocida como una fuente enriquecida de las c&#xE9;lulas progenitoras endoteliales (CPE) con el valor terap&#xE9;utico potencial. Debido a que la criopreservaci&#xF3;n es el &#xFA;nico m&#xE9;todo fiable para el almacenamiento a largo plazo de las c&#xE9;lulas de SCU, la aplicaci&#xF3;n cl&#xED;nica de las CPE depende de nuestra capacidad para adquirirlos a partir de muestras criopreservadas, sin embargo, la posibilidad de hacerlo sigue sin estar claro. En este estudio demostramos que la CPE se puede aislar de criopreservados UCB derivados de las c&#xE9;lulas mononucleares (CMN). El n&#xFA;mero de colonias excrecencia EPC que surgieron en el cultivo de las muestras criopreservados fue similar a la obtenida de UCB fresco. Por otra parte, obtenidos a partir de las CPE criopreservado las multinacionales eran fenot&#xED;picamente y funcionalmente indistinguibles de los reci&#xE9;n aisladas, incluyendo la capacidad de formar vasos sangu&#xED;neos en vivo. Nuestros resultados eliminar la necesidad de realizar procedimientos de aislamiento de c&#xE9;lulas por delante de las futuras necesidades cl&#xED;nicas y sugieren que las CFP derivados de UCB criopreservados pueden ser adecuados para EPC relacionadas con las terapias.

Funcionales de las c&#xE9;lulas progenitoras endoteliales de sangre de cord&#xF3;n umbilical criopreservados

&#x8BB8;&#x591A;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (EC) &#x8DEF;&#x53E3;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5D29;&#x89E3; sub-endothelial &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5916;&#x6E17;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x56FA;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6D41;&#x901A;&#xFF0C;&#x9003;&#x79BB;&#x3002;EC &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7531;&#x9AD8;&#x67B6;&#x80DE;&#x5185;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x6C34;&#x5E73;&#x89E6;&#x53D1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x9700;&#x8981;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;ECs &#x6CBB;&#x7597;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#xFF0C;&#x5982;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x548C; N-&#x4E59;&#x9170;-L-&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x524D;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x62EF;&#x6551;&#x4ECE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1; ECs &#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x8DE8;&#x5185;&#x76AE;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;NAD (P) H &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x88AB;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x4E3A; ROS &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x751F;&#x4EA7;&#x5728;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4EE5;&#x6765;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x548C;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x9176;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E9F;&#x9664;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x751F;&#x4EA7;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4E5F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x80BF;&#x7624;&#x4E0E;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x80DE;&#x5185; Ca (2 +) &#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C &#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4; NAD (P) H &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; p47 (phox) &#x4E9A;&#x57FA;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x963B;&#x6B62;&#x80BF;&#x7624;&#x8BF1;&#x5BFC; EC &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x9632;&#x6B62;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;J.&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8; &copy; 2010&#x5E74;&#x5A01;&#x5229;&#x65AF;&#x6709;&#x9650;&#x516C;&#x53F8;

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF1A; NAD (P) H-&#x6D3E;&#x751F;&#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Many tumor cells are capable of migrating through endothelial cell (EC) junctions and disintegrating sub-endothelial extracellular matrix to achieve extravasation. We demonstrate in this study that certain solid tumor cells can induce EC apoptosis to facilitate their escape from the circulation. The EC apoptosis is triggered by elevated intracellular reactive oxygen species (ROS) levels and direct contacts with tumor cells are required. Treating ECs with antioxidants, such as ascorbate and N-acetyl-L-cysteine, and a glutathione precursor can rescue the ECs from tumor-induced apoptosis and reduce the number of tumor cells migrating across endothelial barriers. NAD(P)H oxidase was identified as the major ROS producer in the event since inhibitors and small interference RNA specific to the enzyme could abrogate the tumor-induced ROS production and hence EC death. This study also provides evidence showing that the interaction between tumor and EC increases intracellular Ca(2+)concentration and activates protein kinase C activity, which leads to NAD(P)H oxidase activation through the serine-phosphorylation of p47(phox)subunit. These findings suggest that blocking the tumor-induced EC apoptosis is a potential way to prevent tumor metastasis. J. Cell. Physiol. Â© 2010 Wiley-Liss, Inc.

Tumor-induced endothelial cell apoptosis: roles of NAD(P)H oxidase-derived reactive oxygen species.

Nombreuses cellules tumorales sont capables de migrer &agrave; travers les jonctions des cellules endoth&eacute;liales (EC) et de d&eacute;sagr&eacute;gation de la matrice extracellulaire sub-endothelial pour atteindre l&#39;extravasation. Dans cette &eacute;tude, nous montrons que certaines cellules de tumeur solide peuvent induire l&#39;apoptose d&#39;EC pour faciliter leur fuite de la circulation. L&#39;EC apoptose est d&eacute;clench&eacute;e par des niveaux &eacute;lev&eacute;s intracellulaire r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne (DRO) et des contacts directs avec les cellules tumorales sont n&eacute;cessaires. Le traitement ECs avec antioxydants, tels que l&#39;ascorbate et N-ac&eacute;tyl-L-cyst&eacute;ine et un pr&eacute;curseur de glutathion peuvent sauver l&#39;ECs de l&#39;apoptose induite par la tumeur et r&eacute;duire le nombre de cellules tumorales migrant barri&egrave;res endoth&eacute;liales. Oxydase de NAD (P) H a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; comme le principal producteur ROS &agrave; l&#39;&eacute;v&eacute;nement depuis inhibiteurs et sp&eacute;cifiques d&#39;ARN d&#39;interf&eacute;rence &agrave; l&#39;enzyme pourrait abroger la production de ROS induite par la tumeur et donc mort d&#39;EC. Cette &eacute;tude fournit &eacute;galement des indications montrant que l&#39;interaction entre ce et la tumeur augmente la concentration intracellulaire de Ca (2 +) et active l&#39;activit&eacute; prot&eacute;ine kinase C, ce qui conduit &agrave; l&#39;activation de NAD (P) H oxydase gr&acirc;ce &agrave; la s&eacute;rine-phosphorylation du p47 sous-unit&eacute; (phox). Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que le blocage de l&#39;apoptose induite par la tumeur d&#39;EC est un moyen potentiel de pr&eacute;venir les m&eacute;tastases tumorales. J. cell. Physiol. &copy; 2010 Wiley-Liss, Inc.

L&#39;apoptose induite par la tumeur des cellules endoth&eacute;liales : r&ocirc;les de NAD (P) H oxydase d&eacute;riv&eacute;e reactive oxygen species.

Viele Tumorzellen sind der Migration durch Endothelzellen (EG) Kreuzungen und zerfallen sub-endothelial extrazellul&auml;ren Matrix Paravasation zu erreichen. Wir zeigen in dieser Studie, dass bestimmte solider Tumor-Zellen EG Apoptosis ihre Flucht aus dem Blutkreislauf zu erleichtern hervorrufen k&ouml;nnen. Die EG-Apoptose durch erh&ouml;hten intrazellul&auml;ren reaktive Sauerstoff-Spezies (ROS)-Spiegel ausgel&ouml;st wird und direkte Kontakte mit Tumorzellen sind erforderlich. Behandlung von ECs mit Antioxidantien, wie Ascorbat und N-Acetyl-L-Cystein und Glutathion Vorl&auml;ufer die ECs von Tumor-induzierte Apoptose retten und reduzieren die Anzahl der Tumorzellen in endothelialen Barrieren migrieren k&ouml;nnen. NAD (P) H Oxydase wurde identifiziert als der Hauptproduzent von ROS im Ereignis seit Inhibitoren und kleiner Eingriff RNA spezifisch auf das Enzym konnte die Tumor-induzierte ROS-Produktion aufzuheben und damit auch EG-Tod. Diese Studie liefert auch Beweise daf&uuml;r, dass die Interaktion zwischen Tumor und EG steigert die intrazellul&auml;re Ca (2 +) Konzentration und aktiviert die Protein-Kinase C-Aktivit&auml;t, NAD (P) H-Oxydase-Aktivierung durch die Serin-Phosphorylierung von p47 f&uuml;hrt (Phox) Untereinheit. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass der Tumor-induzierte EG Apoptosis blockieren eine potenzielle M&ouml;glichkeit ist, Metastasierung zu verhindern. J. Zelle. Physiol. &copy; 2010 Wiley-Liss, Inc.

Endothelial Zelle Tumor-induzierte Apoptose: Rollen von NAD (P) H Oxydase abgeleitete reaktive Sauerstoffspezies.

Molte cellule tumorali sono capaci di migrare attraverso le giunzioni delle cellule endoteliali (CE) e disintegrando sub-endothelial matrice extracellulare per raggiungere stravaso. In questo studio dimostriamo che alcune cellule tumorali solide possono indurre il apoptosis CE per facilitare la loro fuga dalla circolazione. L&#39;apoptosi CE sono innescato da livelli di ossigeno reattivo intracellulari elevati specie (ROS) e contatti diretti con le cellule tumorali sono richiesti. ECs nel trattamento con antiossidanti, come ascorbato e N-acetil-L-cisteina e un precursore del glutatione pu&ograve; salvare la ECs dall&#39;apoptosi indotta da tumore e ridurre il numero di cellule tumorali la migrazione attraverso le barriere endoteliali. Ossidasi di NAD (P) H &egrave; stato identificato come il principale produttore ROS nell&#39;evento dal inibitori e specifiche piccola interferenza RNA all&#39;enzima potrebbe abolire la produzione di ROS indotta da tumore e quindi morte EC. Questo studio fornisce anche prove che dimostrano che l&#39;interazione tra tumore e CE aumenta la concentrazione intracellulare di Ca (2++) e attiva l&#39;attivit&agrave; della chinasi C della proteina, che conduce a di NAD (P) H ossidasi attivazione attraverso la serina-fosforilazione di p47 subunit&agrave; (phox). Questi risultati suggeriscono che bloccando l&#39;apoptosi indotta da tumore di CE &egrave; un modo potenziale per prevenire le metastasi del tumore. J. cell. Pneumologia &copy; 2010 Wiley-Liss, Inc.

Apoptosi delle cellule endoteliali indotta da tumore: ruoli di NAD (P) H ossidasi-derivato specie reattive dell&#39;ossigeno.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (EC) &#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7D4C;&#x7531;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x5D29;&#x58CA;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5916;&#x6F0F;&#x51FA;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B; sub-endothelial &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x56FA;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5FAA;&#x74B0;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8131;&#x51FA;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B; EC &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;EC &#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x9AD8;&#x67B6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3055;&#x308C;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x304A;&#x3088;&#x3073; N &#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;-L-&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;, &#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x816B;&#x760D;&#x8A98;&#x767A;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; ECs &#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x306E;&#x57A3;&#x6839;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x79FB;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x306A;&#x3069;&#x3001;ECs &#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x6B62;&#x5264;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x3002;NAD (P) H &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x8B58;&#x5225;&#x4E3B;&#x8981; ROS &#x30D7;&#x30ED;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x4EE5;&#x6765;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5E72;&#x6E09; RNA &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x816B;&#x760D;&#x8A98;&#x767A; ROS &#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x7834;&#x68C4;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3086;&#x3048; EC &#x6B7B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x816B;&#x760D;&#x3068; EC &#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; Ca (2++) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;NAD (P) H &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; p47 &#x306B;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; C &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B; (phox) &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3002;EC &#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x816B;&#x760D;&#x8EE2;&#x79FB;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;J. &#x30BB;&#x30EB;&#x3002;&#x751F;&#x7406; &copy; 2010&#x5E74;&#x30EF;&#x30A4;&#x30EA;&#x30FC; Lis &#x793E;

&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;: NAD (P) H &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x7531;&#x6765;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (EC) &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xB118;&#xCCD0; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; sub-endothelial &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC744; &#xBD84;&#xD574; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; EC apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. EC apoptosis &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC18;&#xC751; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;) &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC9C1;&#xC811; &#xC811;&#xCD09;&#xC740; &#xD544;&#xC694;. Ascorbate &#xBC0F; N-&#xC544; &#xC138; &#xD2F8;-L-&#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;, glutathione &#xC804;&#xC870; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; apoptosis&#xC5D0;&#xC11C; Ecs&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xAC04;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654;, Ecs&#xB97C; &#xCE58;&#xB8CC;. &#xC0AC;&#xB824;&#xACE0; &#xD588;&#xB358; NAD (P) H &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xC774;&#xD6C4; &#xC8FC;&#xC694; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xD504;&#xB85C;&#xB4C0;&#xC11C;&#xB85C; &#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588; &#xACE0; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA &#xAD00;&#xB828; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD30C;&#xAE30; &#xC218; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; EC &#xC8FD;&#xC74C;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC885;&#xC591; &#xBC0F; EC &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca (2 +) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xB9AC;&#xB4DC; p47 &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; NAD (P) H &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; kinase C &#xD65C;&#xB3D9; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; (phox) &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; EC apoptosis&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC885;&#xC591; &#xC804;&#xC774; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC774; &#xC140;. &#xB144; &copy; 2010&#xC640; &#xC77C;&#xB9AC; Liss, &#xC8FC;&#xC2DD;&#xD68C;&#xC0AC;

&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; apoptosis: &#xC0AC;&#xB824;&#xACE0; &#xD588;&#xB358; NAD (P) H &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Muchas c&eacute;lulas del tumor son capaces de migrar a trav&eacute;s de uniones de c&eacute;lulas endoteliales (CE) y la desintegraci&oacute;n de la matriz extracelular sub-endothelial para lograr la extravasaci&oacute;n. Lo demostramos en este estudio que ciertas c&eacute;lulas de tumor s&oacute;lido pueden inducir apoptosis CE para facilitar su escape de la circulaci&oacute;n. La apoptosis de CE es accionada por los niveles de ox&iacute;geno reactivo intracelular elevado especies (ROS) y contacto directo con las c&eacute;lulas del tumor es necesario. Tratamiento de ECs con antioxidantes, tales como ascorbato y N-acetyl-L-ciste&iacute;na y un precursor de glutati&oacute;n puede rescatar las ECs de apoptosis inducida por el tumor y reducir el n&uacute;mero de las c&eacute;lulas tumorales que migran a trav&eacute;s de barreras endoteliales. Oxidasa de NAD (P) H fue identificada como el principal productor ROS en el evento desde inhibidores y espec&iacute;ficas de ARN de interferencia peque&ntilde;os a la enzima podr&iacute;an derogar la producci&oacute;n de ROS inducida por el tumor y por lo tanto la muerte de la CE. Este estudio tambi&eacute;n proporciona evidencias que demuestran que la interacci&oacute;n entre el tumor y EC aumenta la concentraci&oacute;n intracelular de Ca (2 +) y activa la actividad de prote&iacute;na quinasa C, que conduce a NAD (P) H oxidasa activaci&oacute;n a trav&eacute;s de la fosforilaci&oacute;n de serina de p47 subunidad (phox). Estos resultados sugieren que bloquea la apoptosis inducida por el tumor de la CE es una potencial forma de evitar la met&aacute;stasis del tumor. J. cell. Physiol &copy; 2010 Wiley-Liss, Inc.

Apoptosis de la c&eacute;lula endotelial inducida por el tumor: papeles de especies de NAD (P) H oxidasa derivados reactivos del ox&iacute;geno.

&#x8D77;&#x6E90;&#x57FA;&#x672C;&#x79FB;&#x52A8;&#x7535;&#x8BDD;&#x548C;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x5BF9;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x80CE;&#x513F;&#x5FC3;&#x808C;&#x4E0E;&#x51A0;&#x72B6;&#x52A8;&#x8109;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x8D77;&#x6E90;&#x5177;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x5E76;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x5FC3;&#x4ECD;&#x7136;&#x795E;&#x79D8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#x6620;&#x5C04;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x4EA7;&#x540E;&#x5FC3;&#x9759;&#x6B62;&#x3002;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x589E;&#x52A0;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x7EC6;&#x80DE; (EPDCs)&#xFF0C;&#x7559;&#x5728;&#x5FC3;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x52A0;&#x539A;&#x5C42;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;EPDCs &#x6CA1;&#x6709;&#x901A;&#x8FC7;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x51A0;&#x72B6;&#x52A8;&#x8109; EC &#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x800C;&#x662F;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CA;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8868;&#x660E; EPDCs &#x5206;&#x6CCC;&#x5927;&#x529B;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;EPDC &#x57F9;&#x517B;&#x6DB2;&#x51CF;&#x5C11;&#x6897;&#x6B7B;&#x9762;&#x79EF;&#xFF0C;&#x6539;&#x5584;&#x5FC3;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8D77;&#x6E90;&#x8C03;&#x8282;&#x5FC3;&#x810F;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8C03;&#x7406;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x4E0B;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x7B56;&#x7565;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5FC3;&#x810F;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;

&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8D77;&#x6E90;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x56E0;&#x5B50;&#x8C03;&#x8282;&#x5FC3;&#x808C;&#x635F;&#x4F24;&#x3002;

The epicardium makes essential cellular and paracrine contributions to the growth of the fetal myocardium and the formation of the coronary vasculature. However, whether the epicardium has similar roles postnatally in the normal and injured heart remains enigmatic. Here, we have investigated this question using genetic fate-mapping approaches in mice. In uninjured postnatal heart, epicardial cells were quiescent. Myocardial infarction increased epicardial cell proliferation and stimulated formation of epicardium-derived cells (EPDCs), which remained in a thickened layer on the surface of the heart. EPDCs did not adopt cardiomyocyte or coronary EC fates, but rather differentiated into mesenchymal cells expressing fibroblast and smooth muscle cell markers. In vitro and in vivo assays demonstrated that EPDCs secreted paracrine factors that strongly promoted angiogenesis. In a myocardial infarction model, EPDC-conditioned medium reduced infarct size and improved heart function. Our findings indicate that epicardium modulates the cardiac injury response by conditioning the subepicardial environment, potentially offering a new therapeutic strategy for cardiac protection.

Adult mouse epicardium modulates myocardial injury by secreting paracrine factors.

L&#x26;#39;&#xE9;picarde fait essentiels contributions cellulaires et paracrine &#xE0; la croissance de la foetal myocarde et la formation de l&#x26;#39;syst&#xE8;me vasculaire coronaire. Toutefois, si l&#x26;#39;&#xE9;picarde a des r&#xF4;les similaires apr&#xE8;s la naissance dans le c&#x153;ur normal et le bless&#xE9; demeure &#xE9;nigmatique. Ici, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; cette question en utilisant le sort de cartographie g&#xE9;n&#xE9;tique chez la souris des approches. Au coeur postnatale indemne, les cellules &#xE9;picardiques &#xE9;taient au repos. L&#x26;#39;infarctus du myocarde a augment&#xE9; la prolif&#xE9;ration des cellules &#xE9;picardiques et stimul&#xE9; la formation de l&#x26;#39;&#xE9;picarde des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de (EPDCs), qui sont rest&#xE9;s dans un &#xE9;paississement de la couche sur la surface du c&#x153;ur. EPDCs n&#x26;#39;a pas adopt&#xE9; de cardiomyocytes ou coronarienne destins de la CE, mais plut&#xF4;t diff&#xE9;renci&#xE9;es en cellules m&#xE9;senchymateuses exprimant des fibroblastes et des cellules musculaires lisses des marqueurs. In vitro et in vivo ont d&#xE9;montr&#xE9; que EPDCs s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e facteurs paracrines qui a fortement favoris&#xE9; l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se. Dans un mod&#xE8;le d&#x26;#39;infarctus du myocarde, EPDC milieu conditionn&#xE9; r&#xE9;duit la taille de l&#x26;#39;infarctus et l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de la fonction cardiaque. Nos r&#xE9;sultats indiquent que &#xE9;picarde module la r&#xE9;ponse l&#xE9;sion cardiaque par le conditionnement de l&#x26;#39;environnement sous-&#xE9;picardique, offrant potentiellement une nouvelle strat&#xE9;gie th&#xE9;rapeutique pour la protection cardiaque.

&#xC9;picarde souris adultes Modulation de l&#xE9;sion myocardique en s&#xE9;cr&#xE9;tant des facteurs paracrines

Das Epikard macht wesentliche zellul&auml;re und parakrine Beitr&auml;ge f&uuml;r das Wachstum der fetalen Myokard und die Bildung der koronaren Gef&auml;&szlig;system. Ob das Epikard &auml;hnliche Rollen postnatal im normalen und verletzten Herzen hat bleibt jedoch r&auml;tselhaft. Hier haben wir diese Frage mit genetische Schicksal-Zuordnung-Ans&auml;tzen in den M&auml;usen untersucht. Epikardialem Zellen waren unverletzt postnatale Herz Ruhezustand. Myokardinfarkt epikardialem Zellproliferation erh&ouml;ht und stimuliert die Bildung von Epikard gewonnenen Zellen (EPDCs), die in einer dickeren Schicht auf der Oberfl&auml;che des Herzens geblieben. EPDCs nicht beschlossen, Cardiomyocyte oder koronare EG-Schicksale, sondern vielmehr differenziert in Mesenchymale Zellen, Fibroblasten und glatten Muskel Zelle Marker zum Ausdruck zu bringen. In vitro und in-vivo-Tests gezeigt, dass EPDCs parakrine Faktoren abgesondert, die Angiogenese mit Nachdruck gef&ouml;rdert. In einem Myokardinfarkt-Modell EPDC konditionierten Medium reduziert Infarktgr&ouml;&szlig;e und verbessert Herzfunktion. Unsere Befunde zeigen, dass das Epikard die kardialen Sch&auml;digung Antwort moduliert durch Konditionierung der Subepicardial Umgebung, m&ouml;glicherweise eine neue therapeutische Strategie zur kardialen Schutz bietet.

Adulten Maus Epikard moduliert myokardialen Sch&auml;digung durch sezernierende parakrine Faktoren.

L&#39;epicardio rende essenziali cellulare e paracrina contributi alla crescita del miocardio fetale e la formazione del sistema vascolare coronarico. Tuttavia, se l&#39;epicardio ha ruoli simili postnatale nel cuore normale e ferito rimane enigmatico. Qui, abbiamo studiato questa domanda utilizzando approcci destino-mappatura genetici nei topi. Nel cuore illeso postnatale, cellule epicardici erano quiescente. Infarto miocardico aumentata proliferazione cellulare epicardici e stimolato la formazione di cellule derivate da epicardio (EPDCs), che &egrave; rimasto in uno strato addensato sulla superficie del cuore. EPDCs non ha fatto adottare cardiomyocyte o coronariche CE Parche, ma piuttosto differenziate in cellule mesenchimali che esprimono i marcatori delle cellule dei fibroblasti e muscolo liscio. Analisi in vitro e in vivo hanno dimostrato che EPDCs secreta fattori di paracrina che ha fortemente promosso l&#39;angiogenesi. In un modello di infarto del miocardio, condizionata EPDC medio ridotto di infarct e migliorato la funzione del cuore. I nostri risultati indicano che epicardio modula la risposta di lesioni cardiache dal condizionamento dell&#39;ambiente subepicardica, potenzialmente offrendo una nuova strategia terapeutica per protezione cardiaca.

Epicardio topo adulto modula la ferita del miocardio di secrezione fattori di paracrina.

&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x306F;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x51A0;&#x52D5;&#x8108;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x6B20;&#x304B;&#x305B;&#x306A;&#x3044;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x3084;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x90E8;&#x306B;&#x51FA;&#x751F;&#x5F8C;&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x8B0E;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x904B;&#x547D;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7121;&#x50B7;&#x751F;&#x5F8C;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x3001;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x9759;&#x6B62;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x539A;&#x819C;&#x306B;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;EPDCs&#xFF09;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x3002; EPDCs&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x51A0;&#x52D5;&#x8108;EC&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;EPDCs&#x304C;&#x5F37;&#x304F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x5206;&#x6CCC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6E90;&#x958B;&#x767A;-&#x99B4;&#x5316;&#x57F9;&#x5730;&#x306F;&#x3001;&#x6897;&#x585E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x6539;&#x826F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5FC3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x304C;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x5FC3;&#x81D3;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x7A7A;&#x8ABF;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x4E0B;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5FC3;&#x81D3;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x3092;&#x5206;&#x6CCC;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

Epicardium &#xD0DC;&#xC544; &#xC2EC;&#xADFC;&#xACFC; &#xAD00;&#xC0C1;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xD734;&#xB300; &#xBC0F; paracrine &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xAC8C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC5EC;&#xBD80;&#xB294; epicardium &#xC5ED;&#xD560;&#xC774; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; postnatally &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xB2E4;&#xCE5C; &#xB9C8;&#xC74C;&#xC5D0; &#xC218;&#xC218;&#xAED8;&#xB07C;&#xC758; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC950;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC6B4;&#xBA85; &#xB9E4;&#xD551; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC774; &#xC9C8;&#xBB38; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC190;&#xC0C1; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC0B0; &#xD6C4; &#xC2EC;&#xC7A5; epicardial &#xC140; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2EC;&#xADFC; &#xACBD;&#xC0C9; &#xC99D;&#xAC00; epicardial &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xBC0F; epicardium &#xD30C;&#xC0DD; &#xC140; (EPDCs), &#xC2EC;&#xC7A5;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xAD75;&#xC740; &#xACC4;&#xCE35;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;. EPDCs cardiomyocyte &#xB610;&#xB294; &#xAD00;&#xC0C1; &#xB3D9;&#xB9E5; EC &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xCC44;&#xD0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC624;&#xD788;&#xB824; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0; EPDCs &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xCD94;&#xC9C4; paracrine &#xC694;&#xC778; &#xBD84; &#xBE44;. &#xC2EC;&#xADFC; &#xACBD;&#xC0C9; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; EPDC &#xC870;&#xC808; &#xB9E4;&#xCCB4; &#xACBD;&#xC0C9; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; epicardium &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xBCF4;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; subepicardial &#xD658;&#xACBD; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xBD80;&#xC0C1; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC778; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; epicardium paracrine &#xC694;&#xC778; &#xC740;&#xB2C9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2EC;&#xADFC; &#xC0C1;&#xD574;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870; &#xD55C;&#xB2E4;.

El epicardio hace esenciales contribuciones celulares y paracrina al crecimiento del miocardio fetal y la formaci&#xF3;n de la vasculatura coronaria. Sin embargo, si el epicardio tiene un papel similar tras el nacimiento en el coraz&#xF3;n normal y heridos sigue siendo enigm&#xE1;tica. En este sentido, han investigado esta cuesti&#xF3;n con el destino de mapeo gen&#xE9;tico de enfoques en los ratones. En el coraz&#xF3;n sano despu&#xE9;s del parto, las c&#xE9;lulas epic&#xE1;rdicas eran inactivos. El infarto de miocardio aumento de la proliferaci&#xF3;n celular epic&#xE1;rdica y estimulado la formaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas derivadas del epicardio (EPDCs), que se mantuvieron en una capa de espesor en la superficie del coraz&#xF3;n. EPDCs no adopt&#xF3; los destinos de la CE cardiomiocitos o coronaria, sino m&#xE1;s bien diferenciadas en c&#xE9;lulas mesenquimales que expresan los fibroblastos y c&#xE9;lulas musculares lisas marcadores. In vitro y en ensayos in vivo demostraron que EPDCs secretada factores paracrinos que fuertemente promovido la angiog&#xE9;nesis. En un modelo de infarto de miocardio, CDEP medio acondicionado reduce el tama&#xF1;o del infarto y mejora la funci&#xF3;n cardiaca. Nuestros resultados indican que el epicardio modula la respuesta lesi&#xF3;n card&#xED;aca por el condicionamiento del medio ambiente subepic&#xE1;rdica, que podr&#xED;a ofrecer una nueva estrategia terap&#xE9;utica para la protecci&#xF3;n cardiaca.

Epicardio rat&#xF3;n adulto modula da&#xF1;o mioc&#xE1;rdico por la secretar factores paracrinos

&#x8BB8;&#x591A;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (EC) &#x8DEF;&#x53E3;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x5D29;&#x89E3; sub-endothelial &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x5916;&#x6E17;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x56FA;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6D41;&#x901A;&#xFF0C;&#x9003;&#x79BB;&#x3002;EC &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7531;&#x9AD8;&#x67B6;&#x80DE;&#x5185;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) &#x6C34;&#x5E73;&#x89E6;&#x53D1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x9700;&#x8981;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;ECs &#x6CBB;&#x7597;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#xFF0C;&#x5982;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x548C; N-&#x4E59;&#x9170;-L-&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178; (NAC) &#x548C;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x524D;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5;&#x62EF;&#x6551;&#x4ECE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1; ECs &#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x8DE8;&#x5185;&#x76AE;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;NAD (P) H &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x88AB;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x4E3A; ROS &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x751F;&#x4EA7;&#x5728;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4EE5;&#x6765;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x548C;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x9176;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E9F;&#x9664;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x751F;&#x4EA7;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4E5F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x8BC1;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x80BF;&#x7624;&#x4E0E;&#x6559;&#x7EDF;&#x4F1A;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x7ECF;&#x80DE;&#x5185;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; C (PKC) &#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4; NAD (P) H &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; p47(phox) &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x963B;&#x6B62;&#x80BF;&#x7624;&#x8BF1;&#x5BFC; EC &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x9632;&#x6B62;&#x80BF;&#x7624;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;

Many tumor cells are capable of migrating through endothelial cell (EC) junctions and disintegrating sub-endothelial extracellular matrix to achieve extravasation. We demonstrate in this study that certain solid tumor cells can induce EC apoptosis to facilitate their escape from the circulation. The EC apoptosis is triggered by elevated intracellular reactive oxygen species (ROS) levels and direct contacts with tumor cells are required. Treating ECs with antioxidants, such as ascorbate and N-acetyl-L-cysteine (NAC), and a glutathione precursor can rescue the ECs from tumor-induced apoptosis and reduce the number of tumor cells migrating across endothelial barriers. NAD(P)H oxidase was identified as the major ROS producer in the event since inhibitors and small interference RNA specific to the enzyme could abrogate the tumor-induced ROS production and hence EC death. This study also provides evidence showing that the interaction between tumor and EC increases intracellular Ca(2+) concentration and activates protein kinase C (PKC) activity, which leads to NAD(P)H oxidase activation through the serine-phosphorylation of p47(phox) subunit. These findings suggest that blocking the tumor-induced EC apoptosis is a potential way to prevent tumor metastasis.

Nombreuses cellules tumorales sont capables de migrer &agrave; travers les jonctions des cellules endoth&eacute;liales (EC) et de d&eacute;sagr&eacute;gation de la matrice extracellulaire sub-endothelial pour atteindre l&#39;extravasation. Dans cette &eacute;tude, nous montrons que certaines cellules de tumeur solide peuvent induire l&#39;apoptose d&#39;EC pour faciliter leur fuite de la circulation. L&#39;EC apoptose est d&eacute;clench&eacute;e par des niveaux &eacute;lev&eacute;s intracellulaire r&eacute;actives de l&#39;oxyg&egrave;ne (DRO) et des contacts directs avec les cellules tumorales sont n&eacute;cessaires. Le traitement ECs avec antioxydants, tels que l&#39;ascorbate et N-ac&eacute;tyl-L-cyst&eacute;ine (NAC) et un pr&eacute;curseur de glutathion peuvent sauver l&#39;ECs de l&#39;apoptose induite par la tumeur et r&eacute;duire le nombre de cellules tumorales migrant barri&egrave;res endoth&eacute;liales. Oxydase de NAD (P) H a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; comme le principal producteur ROS &agrave; l&#39;&eacute;v&eacute;nement depuis inhibiteurs et sp&eacute;cifiques d&#39;ARN d&#39;interf&eacute;rence &agrave; l&#39;enzyme pourrait abroger la production de ROS induite par la tumeur et donc mort d&#39;EC. Cette &eacute;tude fournit &eacute;galement des indications montrant que l&#39;interaction entre ce et la tumeur augmente la concentration intracellulaire de Ca(2+) et active la prot&eacute;ine kinase activit&eacute; C (PKC), ce qui conduit &agrave; l&#39;activation de la NAD (P) H oxydase gr&acirc;ce &agrave; la s&eacute;rine-phosphorylation de la sous-unit&eacute; de p47(phox). Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que le blocage de l&#39;apoptose induite par la tumeur d&#39;EC est un moyen potentiel de pr&eacute;venir les m&eacute;tastases tumorales.

Viele Tumorzellen sind der Migration durch Endothelzellen (EG) Kreuzungen und zerfallen sub-endothelial extrazellul&auml;ren Matrix Paravasation zu erreichen. Wir zeigen in dieser Studie, dass bestimmte solider Tumor-Zellen EG Apoptosis ihre Flucht aus dem Blutkreislauf zu erleichtern hervorrufen k&ouml;nnen. Die EG-Apoptose durch erh&ouml;hten intrazellul&auml;ren reaktive Sauerstoff-Spezies (ROS)-Spiegel ausgel&ouml;st wird und direkte Kontakte mit Tumorzellen sind erforderlich. Behandlung von ECs mit Antioxidantien, wie Ascorbat und N-Acetyl-L-Cystein (NAC) und eine Glutathion-Vorstufe die ECs von Tumor-induzierte Apoptose retten und reduzieren die Anzahl der Tumorzellen in endothelialen Barrieren migrieren k&ouml;nnen. NAD (P) H Oxydase wurde identifiziert als der Hauptproduzent von ROS im Ereignis seit Inhibitoren und kleiner Eingriff RNA spezifisch auf das Enzym konnte die Tumor-induzierte ROS-Produktion aufzuheben und damit auch EG-Tod. Diese Studie liefert auch Beweise daf&uuml;r, dass die Interaktion zwischen Tumor und EG steigert die intrazellul&auml;re Ca(2+) Konzentration und aktiviert die Proteinkinase C (PKC) Aktivit&auml;t, die zu NAD (P) H-Oxydase-Aktivierung durch die Serin-Phosphorylierung des p47(phox) Untereinheit f&uuml;hrt. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass der Tumor-induzierte EG Apoptosis blockieren eine potenzielle M&ouml;glichkeit ist, Metastasierung zu verhindern.

Molte cellule tumorali sono capaci di migrare attraverso le giunzioni delle cellule endoteliali (CE) e disintegrando sub-endothelial matrice extracellulare per raggiungere stravaso. In questo studio dimostriamo che alcune cellule tumorali solide possono indurre il apoptosis CE per facilitare la loro fuga dalla circolazione. L&#39;apoptosi CE sono innescato da livelli di ossigeno reattivo intracellulari elevati specie (ROS) e contatti diretti con le cellule tumorali sono richiesti. ECs nel trattamento con antiossidanti, come ascorbato e N-acetil-L-cisteina (NAC) e un precursore del glutatione pu&ograve; salvare la ECs dall&#39;apoptosi indotta da tumore e ridurre il numero di cellule tumorali la migrazione attraverso le barriere endoteliali. Ossidasi di NAD (P) H &egrave; stato identificato come il principale produttore ROS nell&#39;evento dal inibitori e specifiche piccola interferenza RNA all&#39;enzima potrebbe abolire la produzione di ROS indotta da tumore e quindi morte EC. Questo studio fornisce anche prove che dimostrano che l&#39;interazione tra tumore e CE aumenta la concentrazione intracellulare di Ca(2+) e attiva la chinasi di proteina attivit&agrave; C (PKC), che conduce a di NAD (P) H ossidasi attivazione attraverso la serina-fosforilazione della subunit&agrave; p47(phox). Questi risultati suggeriscono che bloccando l&#39;apoptosi indotta da tumore di CE &egrave; un modo potenziale per prevenire le metastasi del tumore.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (EC) &#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7D4C;&#x7531;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x5D29;&#x58CA;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5916;&#x6F0F;&#x51FA;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B; sub-endothelial &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x56FA;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5FAA;&#x74B0;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x8131;&#x51FA;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B; EC &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;EC &#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x9AD8;&#x67B6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E; (ROS) &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3055;&#x308C;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x3068; N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;-L-&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; &#xFF08;NAC&#xFF09; &#x3068;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x816B;&#x760D;&#x8A98;&#x767A;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; ECs &#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x306E;&#x57A3;&#x6839;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x79FB;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x306A;&#x3069;&#x3001;ECs &#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x9632;&#x6B62;&#x5264;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x3002;NAD (P) H &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x8B58;&#x5225;&#x4E3B;&#x8981; ROS &#x30D7;&#x30ED;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x4EE5;&#x6765;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5E72;&#x6E09; RNA &#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x816B;&#x760D;&#x8A98;&#x767A; ROS &#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x7834;&#x68C4;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3086;&#x3048; EC &#x6B7B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x3068; EC &#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; NAD (P) H &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; p47(phox) &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B; C (PKC) &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3082;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;EC &#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x816B;&#x760D;&#x8EE2;&#x79FB;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (EC) &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xB118;&#xCCD0; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; sub-endothelial &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC744; &#xBD84;&#xD574; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC815; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xC21C;&#xD658;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; EC apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. EC apoptosis &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC18;&#xC751; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885; (&#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8;) &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC9C1;&#xC811; &#xC811;&#xCD09;&#xC740; &#xD544;&#xC694;. Ascorbate &#xBC0F; N-&#xC544; &#xC138; &#xD2F8;-L-&#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; (NAC), glutathione &#xC804;&#xC870; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; apoptosis&#xC5D0;&#xC11C; Ecs&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xAC04;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD558;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218;&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xD56D; &#xC0B0;&#xD654;, Ecs&#xB97C; &#xCE58;&#xB8CC;. &#xC0AC;&#xB824;&#xACE0; &#xD588;&#xB358; NAD (P) H &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC800; &#xD574;&#xC81C; &#xC774;&#xD6C4; &#xC8FC;&#xC694; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xD504;&#xB85C;&#xB4C0;&#xC11C;&#xB85C; &#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588; &#xACE0; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA &#xAD00;&#xB828; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; &#xC120;&#xC0DD;&#xB2D8; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD30C;&#xAE30; &#xC218; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; EC &#xC8FD;&#xC74C;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC885;&#xC591; EC&#xC758; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; C (PKC) &#xD65C;&#xB3D9;, &#xC0AC;&#xB824;&#xACE0; &#xD588;&#xB358; NAD (P) H &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; p47(phox) &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C; EC apoptosis&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC885;&#xC591; &#xC804;&#xC774; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Muchas c&eacute;lulas del tumor son capaces de migrar a trav&eacute;s de uniones de c&eacute;lulas endoteliales (CE) y la desintegraci&oacute;n de la matriz extracelular sub-endothelial para lograr la extravasaci&oacute;n. Lo demostramos en este estudio que ciertas c&eacute;lulas de tumor s&oacute;lido pueden inducir apoptosis CE para facilitar su escape de la circulaci&oacute;n. La apoptosis de CE es accionada por los niveles de ox&iacute;geno reactivo intracelular elevado especies (ROS) y contacto directo con las c&eacute;lulas del tumor es necesario. Tratamiento de ECs con antioxidantes, tales como ascorbato y N-acetyl-L-ciste&iacute;na (NAC) y un precursor de glutati&oacute;n puede rescatar las ECs de apoptosis inducida por el tumor y reducir el n&uacute;mero de las c&eacute;lulas tumorales que migran a trav&eacute;s de barreras endoteliales. Oxidasa de NAD (P) H fue identificada como el principal productor ROS en el evento desde inhibidores y espec&iacute;ficas de ARN de interferencia peque&ntilde;os a la enzima podr&iacute;an derogar la producci&oacute;n de ROS inducida por el tumor y por lo tanto la muerte de la CE. Este estudio tambi&eacute;n proporciona evidencias que demuestran que la interacci&oacute;n entre el tumor y EC aumenta la concentraci&oacute;n de CA intracelular y activa kinase de prote&iacute;na actividad C (PKC), que conduce a NAD (P) H oxidasa activaci&oacute;n a trav&eacute;s de la serina-fosforilaci&oacute;n de la subunidad p47(phox). Estos resultados sugieren que bloquea la apoptosis inducida por el tumor de la CE es una potencial forma de evitar la met&aacute;stasis del tumor.

Infarto del miocardio (MI) &egrave; una delle principali cause di morbilit&agrave; e mortalit&agrave; in tutto il mondo. Se riparazione endogena e capacit&agrave; rigenerativa potrebbe essere aumentate dalla somministrazione del farmaco &egrave; una questione importante per la generazione del nuovo approccio terapeutico. Recentemente &egrave; stato riportato che nei topi pretrattati con beta Timosina 4 (TB4) e successivamente sottoposti a MI sperimentale, un sottoinsieme delle cellule epicardici differenziato in cardiomiociti. In situazioni cliniche, adescamento epicardio con TB4 prima MI &egrave; impraticabile. Qui abbiamo testato se TB4 trattamento dopo MI potrebbe riprogrammare epicardio in cardiomiociti e aumentare la risposta lesione dell&#39;epicardio. Utilizzando epicardio lignaggio genetico traccia Wt1(CreERT2/+) e reporter doppia linea Rosa26(mTmG/+), abbiamo trovato post-MI TB4 trattamento significativamente aumentato lo spessore dell&#39;epicardio e densit&agrave; capillare coronarica. Tuttavia, le cellule derivate da epicardio non adottarono cardiomyocyte destino, n&eacute; fatto migrano nel miocardio per diventare cellule endoteliali coronariche. Il nostro risultato cos&igrave; indica che il trattamento TB4 dopo MI non altera fato epicardici cella per includere il lignaggio del cardiomyocyte, fornendo sia Avvertenze e intuizioni per l&#39;esplorazione completa dei benefici potenziali di TB4 nelle regolazioni cliniche. Questo articolo fa parte di un numero speciale intitolato &#39;Possibile editoriale&#39;.

Trattamento di Timosina beta 4 dopo infarto miocardico non riprogrammare le cellule epicardici in cardiomiociti.

&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B; &#xFF08;MI&#xFF09; &#x662F;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x4E16;&#x754C;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x539F;&#x56E0;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x662F;&#x5426;&#x7531;&#x98DF;&#x54C1;&#x836F;&#x54C1;&#x76D1;&#x7763;&#x7BA1;&#x7406;&#x5C40;&#x589E;&#x52A0;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x4FEE;&#x590D;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x4E00;&#x4EE3;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x636E;&#x62A5;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F8;&#x817A;&#x7D20; beta 4 &#xFF08;TB4) &#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x906D;&#x53D7;&#x5B9E;&#x9A8C; MI &#x5B50;&#x96C6;&#x7684;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x9884;&#x5145;&#x7684;&#x524D; MI TB4 &#x662F;&#x4E0D;&#x5207;&#x5B9E;&#x9645;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5982;&#x679C; TB4 &#x6CBB;&#x7597; MI &#x540E;&#x7684;&#x80FD;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x4E3A;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x5FC3;&#x7684;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D77;&#x6E90;&#x9057;&#x4F20;&#x8C31;&#x7CFB;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x884C; Wt1(CreERT2/+) &#x548C; Rosa26(mTmG/+) &#x53CC;&#x8BB0;&#x8005;&#x4E00;&#x884C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; TB4 &#x6CBB;&#x7597; MI &#x540E;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x539A;&#x5EA6;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x548C;&#x51A0;&#x72B6;&#x52A8;&#x8109;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8D77;&#x6E90;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CA1;&#x6709;&#x901A;&#x8FC7;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x6CA1;&#x6709;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5230;&#x5FC3;&#x808C;&#x6210;&#x4E3A;&#x51A0;&#x5FC3;&#x75C5;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x56E0;&#x6B64;&#x6307;&#x793A;&#x8BE5; TB4 &#x6CBB;&#x7597;&#x540E; MI &#x5E76;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBF;&#x88AD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5145;&#x5206;&#x63A2;&#x7D22; TB4 &#x4E34;&#x5E8A;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x597D;&#x5904;&#x7684;&#x6CE8;&#x610F;&#x4E8B;&#x9879;&#x548C;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x662F;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7279;&#x522B;&#xFF0C;&#x9898;&#x4E3A; &#39;&#x53EF;&#x80FD;&#x7F16;&#x8F91;&#39; &#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

&#x80F8;&#x817A;&#x7D20; beta 4 &#x6CBB;&#x7597;&#x5FC3;&#x808C;&#x6897;&#x6B7B;&#x540E;&#x7684;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x6210;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x91CD;&#x65B0;&#x7F16;&#x7A0B;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of morbidity and mortality world-wide. Whether endogenous repair and regenerative ability could be augmented by drug administration is an important issue for generation of novel therapeutic approach. Recently it was reported that in mice pretreated with thymosin beta 4 (TB4) and subsequently subjected to experimental MI, a subset of epicardial cells differentiated into cardiomyocytes. In clinical settings, epicardial priming with TB4 prior to MI is impractical. Here we tested if TB4 treatment after MI could reprogram epicardium into cardiomyocytes and augment the epicardium's injury response. Using epicardium genetic lineage trace line Wt1(CreERT2/+) and double reporter line Rosa26(mTmG/+), we found post-MI TB4 treatment significantly increased the thickness of epicardium and coronary capillary density. However, epicardium-derived cells did not adopt cardiomyocyte fate, nor did they migrate into myocardium to become coronary endothelial cells. Our result thus indicates that TB4 treatment after MI does not alter epicardial cell fate to include the cardiomyocyte lineage, providing both cautions and insights for the full exploration of the potential benefits of TB4 in the clinical settings. This article is part of a Special Issue entitled 'Possible Editorial'.

Thymosin beta 4 treatment after myocardial infarction does not reprogram epicardial cells into cardiomyocytes.

L&#x26;#39;infarctus du myocarde (MI) est une des principales causes de morbidit&#xE9; et de mortalit&#xE9; dans le monde entier. Que ce soit endog&#xE8;ne capacit&#xE9; de r&#xE9;paration et de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration pourrait &#xEA;tre augment&#xE9;e par l&#x26;#39;administration du m&#xE9;dicament est un enjeu important pour la g&#xE9;n&#xE9;ration de l&#x26;#39;approche th&#xE9;rapeutique nouvelle. R&#xE9;cemment, il a &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9; que chez les souris pr&#xE9;trait&#xE9;es avec la thymosine b&#xEA;ta 4 (TB4) et par la suite soumis &#xE0; exp&#xE9;rimentation MI, un sous-ensemble de cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es en cardiomyocytes &#xE9;picardiques. Dans les milieux cliniques, l&#x26;#39;amor&#xE7;age &#xE9;picardique avec TB4 avant MI n&#x26;#39;est pas pratique. Ici, nous avons test&#xE9; si TB4 traitement apr&#xE8;s un IM pourrait reprogrammer &#xE9;picarde en cardiomyocytes et d&#x26;#39;augmenter la r&#xE9;ponse des blessures de l&#x26;#39;&#xE9;picarde. Utilisation de la lign&#xE9;e g&#xE9;n&#xE9;tique &#xE9;picarde trace de la ligne Wt1 (CreERT2 / +) et la ligne rapporteur double Rosa26 (mTmG / +), nous avons trouv&#xE9; post-IM TB4 traitement augment&#xE9; de fa&#xE7;on significative l&#x26;#39;&#xE9;paisseur de l&#x26;#39;&#xE9;picarde et la densit&#xE9; capillaire coronarienne. Toutefois, &#xE9;picarde des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de ne pas adopter le sort des cardiomyocytes, et ils n&#x26;#39;ont pas migrer dans le myocarde pour devenir les cellules endoth&#xE9;liales coronaires. Notre r&#xE9;sultat indique donc que le traitement TB4 apr&#xE8;s un IM ne modifie pas le destin des cellules &#xE9;picardiques afin d&#x26;#39;inclure la lign&#xE9;e des cardiomyocytes, fournissant &#xE0; la fois mises en garde et des id&#xE9;es pour l&#x26;#39;exploration de tous les avantages potentiels de TB4 dans les milieux cliniques. Cet article fait partie d&#x26;#39;un num&#xE9;ro sp&#xE9;cial intitul&#xE9; &#xAB;&#xE9;ditorial possible&#xBB;.

Thymosin Beta 4 Traitement apr&#xE8;s infarctus du myocarde ne pas reprogrammer des cellules &#xE9;picardiques en cardiomyocytes

Myokardinfarkt (MI) ist eine der f&uuml;hrenden Ursachen von Morbidit&auml;t und Mortalit&auml;t weltweit. Ob endogene Reparatur und regenerative F&auml;higkeit durch ARZNEIMITTELAPPLIKATION erg&auml;nzt werden k&ouml;nnte, ist ein wichtiges Thema f&uuml;r die Generierung von neuen therapeutischen Ansatz. Vor kurzem wurde berichtet, dass bei M&auml;usen mit Thymosine Beta 4 (TB4) vorbehandelt und anschlie&szlig;end experimentelle MI ausgesetzt, eine Teilmenge der epikardialem Zellen in Cardiomyocytes unterschieden. In den klinischen Einstellungen ist epikardialem Grundierung mit TB4 vor MI nicht praktikabel. Hier haben wir getestet, wenn TB4 Behandlung nach MI Epikard in Cardiomyocytes umprogrammieren und die Epikard Verletzungen Antwort erg&auml;nzen k&ouml;nnte. Mit Epikard genetischen Linie Spur Wt1(CreERT2/+) und doppelte Reporter Linie Rosa26(mTmG/+), fanden wir, dass Post-MI TB4 Behandlung die Dicke Epikard und koronare Kapillar Dichte deutlich erh&ouml;ht. Jedoch Epikard abgeleitete Zellen nicht Cardiomyocyte Schicksal zu eigen, noch hat sie in Myokard koronaren Endothelzellen zu migrieren. Unser Ergebnis deutet somit, dass TB4-Behandlung nach MI bietet Hinweise und Erkenntnisse f&uuml;r die vollst&auml;ndige Erforschung der potenziellen Nutzen der TB4 in den klinischen Einstellungen nicht epikardialem Zelle Schicksal ver&auml;ndert um die Cardiomyocyte-Linie erweitert. Dieser Artikel ist Teil einer Spezial-Ausgabe mit dem Titel &#39;M&ouml;gliche redaktionelle&#39;.

Thymosine Beta 4 Behandlung nach Myokardinfarkt wird in Cardiomyocytes nicht epikardialem Zellen umzuprogrammieren.

&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#xFF08;MI&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7F79;&#x60A3;&#x7387;&#x3068;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306F;&#x4E16;&#x754C;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3068;&#x518D;&#x751F;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x6295;&#x4E0E;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6CBB;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8AB2;&#x984C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3067;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30E2;&#x30B7;&#x30F3;&#x3B2;4&#xFF08;TB4&#xFF09;&#x3067;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#x3001;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MI&#x524D;&#x306B;TB4&#x3068;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; MI&#x5F8C;TB4&#x51E6;&#x7F6E;&#x306F;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x306B;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3057;&#x3001;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x306E;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308C;&#x3070;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;WT1&#xFF08;CreERT2 / +&#xFF09;&#x3068;&#x4E8C;&#x91CD;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;ROSA26&#xFF08;mTmG / +&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;TB4&#x51E6;&#x7F6E;&#x304C;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x53CA;&#x3073;&#x51A0;&#x72B6;&#x52D5;&#x8108;&#x6BDB;&#x7D30;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x539A;&#x3055;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;MI&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x51A0;&#x52D5;&#x8108;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x306B;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;MI&#x5F8C;TB4&#x51E6;&#x7F6E;&#x306E;&#x6CE8;&#x610F;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x73FE;&#x5834;&#x3067;&#x306E;TB4&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5229;&#x70B9;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x63A2;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8CC7;&#x6599;&#x3067;&#x306F;&#x3001; &#x26;quot;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7DE8;&#x96C6;&#x26;quot;&#x3068;&#x984C;&#x3057;&#x305F;&#x7279;&#x96C6;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x5FC3;&#x7B4B;&#x6897;&#x585E;&#x5F8C;&#x306E;&#x30C1;&#x30E2;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;4&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x306B;&#x5FC3;&#x5916;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#xC2EC;&#xADFC; &#xACBD;&#xC0C9; (MI) &#xBCD1; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC640; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; &#xC804;&#xC138;&#xACC4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC6D0;&#xC778; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC758;&#xC57D;&#xD488; &#xC548;&#xC804; &#xCCAD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB0B4; &#xC0DD; &#xC218;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB2A5;&#xB825; &#xC218; &#xC99D;&#xAC15; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC811;&#xADFC;&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBB38;&#xC81C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xC950; pretreated thymosin &#xBCA0;&#xD0C0; 4 (TB4) &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBBF8; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xC11C;&#xB294; epicardial &#xC140;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; cardiomyocytes&#xC5D0; &#xCC28;&#xBCC4; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC784;&#xC0C1; &#xC124;&#xC815; epicardial &#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C; TB4 &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xC640; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBBF8; &#xD6C4; TB4 &#xCE58;&#xB8CC; epicardium cardiomyocytes&#xC5D0; &#xC7AC; &#xC124; &#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xBA74; epicardium&#xC758; &#xBD80;&#xC0C1; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;. Epicardium &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xACC4;&#xBCF4; &#xCD94;&#xC801; &#xC120; Wt1(CreERT2/+), &#xC774;&#xC911; &#xAE30;&#xC790; &#xC120; Rosa26(mTmG/+) &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xBBF8; TB4 &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; &#xD06C;&#xAC8C; epicardium &#xAD00;&#xC0C1; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xB450;&#xAED8; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; epicardium &#xD30C;&#xC0DD; &#xC140; cardiomyocyte &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xCC44;&#xD0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xAD00;&#xC0C1; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xC2EC;&#xADFC;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xD560; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBBF8; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; cardiomyocyte &#xD608;&#xD1B5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; epicardial &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85; tb4&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xC784;&#xC0C1; &#xC124;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; &#xD0D0;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC; &#xBC0F; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xD6C4; TB4 &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xB294; &#xD2B9;&#xC9D1; &#39; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC124; &#39; &#xAD8C;&#xB9AC;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2EC;&#xADFC; &#xACBD;&#xC0C9; &#xD6C4; thymosin &#xBCA0;&#xD0C0; 4 &#xCE58;&#xB8CC; epicardial &#xC140;&#xC744; &#xC7AC; &#xC124; &#xC815;&#xD560; cardiomyocytes&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El infarto de miocardio (IM) es una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en todo el mundo. Si la capacidad end&#xF3;gena de reparaci&#xF3;n y regeneraci&#xF3;n podr&#xED;a ser aumentada por la administraci&#xF3;n de f&#xE1;rmacos es un tema importante para la generaci&#xF3;n de nueva forma terap&#xE9;utica. Recientemente se inform&#xF3; de que en los ratones tratados previamente con timosina beta 4 (TB4) y, posteriormente, sometido a experimentaci&#xF3;n, MI, un subconjunto de las c&#xE9;lulas epic&#xE1;rdicas diferenciadas a cardiomiocitos. En el &#xE1;mbito cl&#xED;nico, el cebado epic&#xE1;rdica con TB4 antes de la MI es poco pr&#xE1;ctico. Aqu&#xED; hemos probado si TB4 el tratamiento despu&#xE9;s de un IM puede reprogramar epicardio en cardiomiocitos y aumentar la respuesta del epicardio de la lesi&#xF3;n. Usando epicardio linaje gen&#xE9;tico traza de la l&#xED;nea WT1 (CreERT2 / +) y la l&#xED;nea de doble reportero Rosa26 (mTmG / +), encontramos post-IAM TB4 el tratamiento aument&#xF3; significativamente el espesor del epicardio y la densidad capilar coronaria. Sin embargo, c&#xE9;lulas derivadas del epicardio no adopt&#xF3; el destino de cardiomiocitos, ni se desplazan hacia el miocardio para convertirse en c&#xE9;lulas endoteliales coronarias. Nuestro resultado indica que por lo tanto TB4 el tratamiento despu&#xE9;s de un IM no altera el destino de c&#xE9;lulas epic&#xE1;rdicas para incluir el linaje de los cardiomiocitos, proporcionando las precauciones y conocimientos para la exploraci&#xF3;n completa de los beneficios potenciales de TB4 en los entornos cl&#xED;nicos. Este art&#xED;culo es parte de un n&#xFA;mero especial titulado &#x26;quot;Editorial posible&#x26;quot;.

La timosina beta 4 Despu&#xE9;s del tratamiento del infarto de miocardio No reprogramar las c&#xE9;lulas epic&#xE1;rdicas en cardiomiocitos

&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x6765;&#xFF0C;&#x4E8B;&#x540E;&#x4F53;&#x5185;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x81EA;&#x4F53;&#x5047;&#x5B9A;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x529E;&#x6CD5;&#x80A0;&#x5916;&#x884C;&#x653F;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6709;&#x6548;&#x7EC6;&#x80DE;&#x690D;&#x5165;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x4EE5;&#x524D;&#x68C0;&#x7D22;&#x7684;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x5177;&#x6709;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x7684;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x5E08;&#x4F53;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5DF2;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x8BF4;&#x660E;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5141;&#x8BB8;&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x56E0;&#x4FEE;&#x6539;&#x751F;&#x6210;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x4EBA;&#x8840;&#x6E90;&#x6027;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE; (ECFCs) &#x8868;&#x8FBE;&#x4FC3;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7D20; (EPO) &#x56DB;&#x73AF;&#x7D20;&#x8C03;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x76AE;&#x4E0B;&#x8840;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x80FD;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x7684; EPO &#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E0B;&#x886C;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x5F62;&#x6210;&#x9F20;&#x6807;&#x8109;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4EBA; EPO &#x5230;&#x8840;&#x6DB2;&#x91CC;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x529F;&#x80FD;&#x543B;&#x5408;&#x3002;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x7684; EPO &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x8D2B;&#x8840;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x51CF;&#x8F7B;&#x75C5;&#x4EBA;&#x4ECE;&#x9891;&#x7E41;&#x7684; EPO &#x6CE8;&#x5C04;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x8D2B;&#x8840;&#x7684;&#x7BA1;&#x7406;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x533B;&#x7597;&#x8D39;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x4E0B;&#x57FA;&#x4E8E;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F20;&#x9012;&#x6218;&#x7565;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6280;&#x672F;&#x65F6;&#x9700;&#x8981;&#x91CD;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x65E5;&#x5E38;&#x7BA1;&#x7406;&#x3002;

&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x4F7F;&#x7528;&#x53D7;&#x63A7;&#x4FC3;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7D20;&#x91CA;&#x653E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8840;&#x7BA1;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x3002;

For decades, autologous ex vivo gene therapy has been postulated as a potential alternative to parenteral administration of recombinant proteins. However, achieving effective cellular engraftment of previously retrieved patient cells is challenging. Recently, our ability to engineer vasculature in vivo has allowed for the introduction of instructions into tissues by genetically modifying the vascular cells that build these blood vessels. In the present study, we genetically engineered human blood-derived endothelial colony-forming cells (ECFCs) to express erythropoietin (EPO) under the control of a tetracycline-regulated system, and generated subcutaneous vascular networks capable of systemic EPO release in immunodeficient mice. These ECFC-lined vascular networks formed functional anastomoses with the mouse vasculature, allowing direct delivery of recombinant human EPO into the bloodstream. After activation of EPO expression, erythropoiesis was induced in both normal and anemic mice, a process that was completely reversible. This approach could relieve patients from frequent EPO injections, reducing the medical costs associated with the management of anemia. We propose this ECFC-based gene-delivery strategy as a viable alternative technology when routine administration of recombinant proteins is needed.

Induction of erythropoiesis using human vascular networks genetically engineered for controlled erythropoietin release.

Pendant des d&#xE9;cennies, autologue th&#xE9;rapie g&#xE9;nique ex vivo a &#xE9;t&#xE9; postul&#xE9;e comme une alternative potentielle &#xE0; l&#x26;#39;administration parent&#xE9;rale de prot&#xE9;ines recombinantes. Toutefois, la r&#xE9;alisation effective greffe cellulaire de cellules de patients pr&#xE9;c&#xE9;demment r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;s est difficile. R&#xE9;cemment, notre capacit&#xE9; &#xE0; concevoir le syst&#xE8;me vasculaire in vivo a permis l&#x26;#39;introduction d&#x26;#39;instructions dans les tissus en modifiant g&#xE9;n&#xE9;tiquement les cellules vasculaires qui construisent ces vaisseaux sanguins. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous avons modifi&#xE9; g&#xE9;n&#xE9;tiquement de l&#x26;#39;homme d&#xE9;riv&#xE9;s du sang endoth&#xE9;liales formant colonie (CPEF cellules) &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;rythropo&#xEF;&#xE9;tine express (OEB) sous le contr&#xF4;le d&#x26;#39;un syst&#xE8;me de t&#xE9;tracycline-r&#xE9;glement&#xE9;, et a g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; des r&#xE9;seaux vasculaires sous-cutan&#xE9;es capables de l&#x26;#39;EPO lib&#xE9;ration syst&#xE9;mique chez des souris immunod&#xE9;ficientes. Ces r&#xE9;seaux ECFC fourr&#xE9;es vasculaires form&#xE9; anastomoses fonctionnelles &#xE0; la vascularisation de la souris, permettant la livraison directe d&#x26;#39;EPO recombinante dans la circulation sanguine. Apr&#xE8;s activation de l&#x26;#39;expression OEB, l&#x26;#39;&#xE9;rythropo&#xEF;&#xE8;se a &#xE9;t&#xE9; induite chez la souris &#xE0; la fois normaux et an&#xE9;miques, un processus qui est compl&#xE8;tement r&#xE9;versible. Cette approche pourrait soulager les patients de fr&#xE9;quentes injections d&#x26;#39;EPO, ce qui r&#xE9;duit les frais m&#xE9;dicaux li&#xE9;s &#xE0; la gestion de l&#x26;#39;an&#xE9;mie. Nous proposons cette ECFC bas&#xE9;e d&#xE9;livrance g&#xE9;nique strat&#xE9;gie comme une technologie alternative viable lorsque l&#x26;#39;administration de routine de prot&#xE9;ines recombinantes est n&#xE9;cessaire.

L&#x26;#39;induction de l&#x26;#39;&#xE9;rythropo&#xEF;&#xE8;se &#xE0; l&#x26;#39;aide de l&#x26;#39;homme des r&#xE9;seaux vasculaires obtenus par g&#xE9;nie g&#xE9;n&#xE9;tique pour la lib&#xE9;ration contr&#xF4;l&#xE9;e &#xE9;rythropo&#xEF;&#xE9;tine

Jahrzehntelang hat autologe ex Vivo Gentherapie als m&ouml;gliche Alternative zur parenteralen Verabreichung von rekombinanten Proteinen postuliert worden. Jedoch ist es schwierig, effektive zellul&auml;re Verteilung der zuvor abgerufenen Patienten Zellen zu erreichen. Vor kurzem hat unsere F&auml;higkeit, Gef&auml;&szlig;system in-vivo-Ingenieur f&uuml;r die Einf&uuml;hrung von Anweisungen in das Gewebe durch genetisch &auml;ndern die vaskul&auml;ren Zellen, die diese Blutgef&auml;&szlig;e zu bauen erlaubt. In der vorliegenden Studie wir genetisch menschliche Blut abgeleitete kolonienbildende Endothelzellen (ECFCs), Erythropoetin (EPO) auszudr&uuml;cken unter der Kontrolle eines Tetracyclin geregelten Systems entwickelt, und subkutane vaskul&auml;re Netzwerken systemische EPO Version f&auml;hig in immungeschw&auml;chte M&auml;use generiert. Diese ECFC ges&auml;umten vaskul&auml;rer Netzwerke gebildet funktionale Anastomoses mit der Maus-Gef&auml;&szlig;system, erm&ouml;glicht direkte &Uuml;bermittlung von rekombinanten menschlichen EPO in den Blutkreislauf. Nach Aktivierung des EPO-Ausdruck wurde Erythropoese im Normal- und an&auml;mischen M&auml;usen, einen Prozess ausgel&ouml;st, die vollst&auml;ndig reversibel war. Dieser Ansatz k&ouml;nnte Patienten aus h&auml;ufigen EPO-Injektionen, Reduzierung der medizinischen Kosten im Zusammenhang mit der Verwaltung von An&auml;mie lindern. Wir schlagen diese ECFC basierende gen-Lieferung-Strategie als tragf&auml;hige alternative Technologie, wenn ordentlichen Verwaltung von rekombinanten Proteinen ben&ouml;tigt wird.

Induktion der Erythropoese mit menschliche vaskul&auml;re Netzwerken gentechnisch f&uuml;r kontrollierte Erythropoetin Release.

Per decenni, autologhe ex vivo gene therapy &egrave; stata postulata come una potenziale alternativa alla somministrazione parenterale di proteine ricombinanti. Tuttavia, il raggiungimento efficacia attecchimento cellulare delle cellule di pazienti precedentemente recuperate &egrave; impegnativo. Recentemente, la nostra capacit&agrave; di vascolarizzazione in vivo l&#39;ingegnere ha permesso l&#39;introduzione delle istruzioni nei tessuti modificando geneticamente le cellule vascolari che costruire questi vasi sanguigni. Nel presente studio, siamo geneticamente ingegnerizzato emoderivati endoteliali formanti cellule umane (ECFCs) per esprimere l&#39;eritropoietina (EPO) sotto il controllo di un sistema regolato da tetraciclina e generato reti vascolari sottocutanei capace di sistemica rilascio EPO in topi immunodeficienti. Queste reti vascolari ECFC-allineati formano anastomosi funzionale con il sistema vascolare del mouse, che consente la consegna diretta di EPO umana ricombinante nel flusso sanguigno. Dopo l&#39;attivazione dell&#39;espressione di EPO, l&#39;eritropoiesi &egrave; stata indotta in topi normali e anemici, un processo che &egrave; stato completamente reversibile. Questo approccio potrebbe alleviare i pazienti da frequenti iniezioni di EPO, riducendo i costi medici associati alla gestione dell&#39;anemia. Vi proponiamo questa strategia basata su ECFC gene-consegna come una tecnologia alternativa valida quando &egrave; necessaria l&#39;ordinaria amministrazione di proteine ricombinanti.

Induzione dell&#39;eritropoiesi utilizzando reti vascolari umani geneticamente ingegnerizzati per il rilascio controllato di eritropoietina.

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&#xC720;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4; erythropoietin &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xC778;&#xAC04; &#xD608;&#xAD00; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC758;.

Ruei-Zeng Lin

Department of Cardiac Surgery,
Children's Hospital Boston,
Department of Cardiac Surgery, Children's Hospital Boston

Harvard Medical School

Bioengineering Human Microvascular Networks in Immunodeficient Mice

Ruei-Zeng Lin

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Cardiac Surgery,Children's Hospital Boston,Department of Cardiac Surgery, Children's Hospital Boston

Harvard Medical School

Bioengineering Human Microvascular Networks in Immunodeficient Mice

Department of Cardiac Surgery,
Children's Hospital Boston,
Department of Cardiac Surgery, Children's Hospital Boston