live-cell-imaging-migrating-cells-expressing-fluorescently-tagged

Live-cell Imaging of Migrating Cells Expressing Fluorescently-tagged Proteins in a Three-dimensional Matrix

Traditionally, cell migration has been studied on two-dimensional, stiff plastic surfaces. However, during important biological processes such as wound ...

University of California, Davis

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x662F;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F;&#x4E0E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x4F46;&#x6700;&#x4E0D;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x662F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x52A8;&#x529B;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x72B6;&#x9886;&#x5148;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x524D;&#x540E;&#x6536;&#x7F29;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x3002;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65BD;&#x52A0;&#x7684;&#x7275;&#x5F15;&#x90E8;&#x961F;&#x4E24;&#x4E2A;&#x524D;&#x540E;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x53D8;&#x5F62;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x524D;&#x7F18;&#x5C55;&#x51FA;&#x4E8C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9006;&#x884C;&#x6D41;&#x52A8;&#x7684;&#x89C4;&#x6A21;&#x548C;&#x65B9;&#x5411;&#x7B26;&#x5408;&#x56F4;&#x7F51;&#x7EDC;&#x53D8;&#x5F62;&#x4E0E;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#xFF0C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7F3A;&#x9677; IIA &#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x901F;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728; 3D &#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x7F3A;&#x9677; IIA &#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x7136;&#x5149;&#x548C;&#x4E0D;&#x52A8;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x53CD;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; IIB &#x7F3A;&#x9677;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7387;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981; 3D &#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x56FD;&#x9645;&#x6295;&#x8D44;&#x534F;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; IIB&#xFF0C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; IIA &#x4F9D;&#x8D56;&#x9006;&#x884C;&#x6D41;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668; 3D &#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;

Epithelial cell migration is an essential part of embryogenesis and tissue regeneration, yet their migration is least understood. Using our three-dimensional (3D) motility analysis, migrating epithelial cells formed an atypical polarized cell shape with the nucleus leading the cell front and a contractile cell rear. Migrating epithelial cells exerted traction forces to deform both the anterior and posterior extracellular matrix toward the cell body. The cell leading edge exhibited a myosin II-dependent retrograde flow with the magnitude and direction consistent with surrounding network deformation. Interestingly, on a two-dimensional substrate, myosin IIA-deficient cells migrated faster than wild-type cells, but in a 3D gel, these myosin IIA-deficient cells were unpolarized and immobile. In contrast, the migration rates of myosin IIB-deficient cells were similar to wild-type cells. Therefore, myosin IIA, not myosin IIB, is required for 3D epithelial cell migration.

Myosin IIA dependent retrograde flow drives 3D cell migration.

Migration des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales est une partie essentielle de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des tissus, mais leur migration est moins bien compris. Gr&#xE2;ce &#xE0; notre analyse en trois dimensions la motilit&#xE9; (3D), la migration des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales form&#xE9; une forme atypique des cellules polaris&#xE9;es avec le noyau dirigeant du front de cellules et un arri&#xE8;re de cellules contractiles. Migration des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales des forces de traction exerc&#xE9;e pour d&#xE9;former la fois la matrice extracellulaire ant&#xE9;rieure et post&#xE9;rieure vers le corps cellulaire. La cellule de pointe pr&#xE9;sentaient une myosine II-d&#xE9;pendante flux r&#xE9;trograde avec la grandeur et la direction compatible avec entourant la d&#xE9;formation du r&#xE9;seau. Int&#xE9;ressant, sur un substrat &#xE0; deux dimensions, la myosine IIA cellules d&#xE9;ficientes migr&#xE9; plus rapide que cellules de type sauvage, mais dans un gel 3D, ces myosine IIA cellules d&#xE9;ficientes sont non polaris&#xE9;e et immobile. En revanche, les taux de migration de la myosine II B-cellules d&#xE9;ficientes &#xE9;taient semblables &#xE0; cellules de type sauvage. Par cons&#xE9;quent, la myosine IIA, IIB pas la myosine, est n&#xE9;cessaire pour la migration des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales 3D.

Myosine IIA tributaire des flux de migration des cellules r&#xE9;trograde Disques 3D

Epithelzellen Migration ist ein wesentlicher Bestandteil der Embryogenese und Geweberegeneration, doch ihre Migration am wenigsten verstanden wird. Mithilfe unserer dreidimensionalen (3D) Motilit&auml;t-Analyse, Migration von Epithelzellen gebildet eine atypische polarisierten Zelle Form der f&uuml;hrende Zelle vorne und eine hintere KONTRAKTILER Zelle Kern. Migrieren von Epithelzellen ausge&uuml;bte Zugkraft Kr&auml;fte, um sowohl im Front- und Seitenzahnbereich extrazellul&auml;re Matrix in Richtung Zellk&ouml;rper zu deformieren. Die Zelle-Vorderkante ausgestellt ein Myosin-II-abh&auml;ngige retrograde Str&ouml;mung mit Betrag und Richtung konsistent mit den umliegenden Netzwerk Verformung. Interessanterweise auf einem zweidimensionalen Substrat, Myosin IIA-defizienten Zellen schneller als Wildtyp Zellen migriert, aber in einem 3D Gel, waren diese Myosin IIA-defizienten Zellen unpolarisiertes und unbeweglich. Im Gegensatz dazu waren die bei Migration von Myosin IIB-defizienten Zellen angegebenen Preise verstehen sich als Wildtyp Zellen &auml;hnlich. Myosin IIA, nicht Myosin IIB, ist daher f&uuml;r 3D Epithelzellen Migration erforderlich.

Myosin IIA abh&auml;ngige retrograde Str&ouml;mung treibt 3D Zellmigration.

Migrazione delle cellule epiteliali &egrave; parte essenziale della rigenerazione del tessuto e l&#39;embriogenesi, eppure loro migrazione &egrave; almeno capito. Utilizzando la nostra analisi di motilit&agrave; tridimensionale (3D), la migrazione di cellule epiteliali formano una forma atipica delle cellule polarizzate con il nucleo che porta la cella anteriore e posteriore una cellula contrattile. Trazione esercitata di migrazione delle cellule epiteliali forze di deformazione sia anteriore e posteriore matrice extracellulare verso il corpo cellulare. Il bordo d&#39;attacco delle cellule esposte una miosina flusso retrogrado II-dipendente con la grandezza e la direzione coerente con le circostanti la deformazione della rete. &Egrave; interessante notare che, su un substrato bidimensionale, cellule di miosina IIA-carenti migrarono pi&ugrave; veloce di selvaggio-tipo celle, ma in un gel 3D, queste cellule IIA-carenti di miosina erano polarizzata e immobile. Al contrario, il tasso di migrazione delle cellule di miosina IIB-carenti era simile a cellule wild-type. Miosina miosina non IIB, IIA &egrave; pertanto, necessaria per la migrazione delle cellule epiteliali 3D.

Flusso retrogrado dipendente di miosina IIA unit&agrave; migrazione cellulare 3D.

&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x305D;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x904B;&#x52D5;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x9762;&#x3068;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F8C;&#x90E8;&#x3092;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x6838;&#x3068;&#x975E;&#x5B9A;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x504F;&#x5149;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x524D;&#x90E8;&#x3068;&#x5F8C;&#x90E8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x5909;&#x5F62;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x727D;&#x5F15;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A8;&#x30C3;&#x30B8;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3068;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5909;&#x5F62;&#x3092;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x9006;&#x884C;&#x6027;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x306E;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x306B;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;IIA-&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x901F;&#x304F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x79FB;&#x884C;&#x304C;&#x3001;3D&#x30B2;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;IIA-&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x504F;&#x3068;&#x52D5;&#x304B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;IIB&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;IIA&#x3001;IIB&#x306A;&#x3044;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;3D&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;IIA&#x4F9D;&#x5B58;&#x9006;&#x6D41;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;3D&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;

&#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; embryogenesis &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC758; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xBD84;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC544;&#xC9C1; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC774;&#xB3D9;&#xC740; &#xC774;&#xD574; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4;. 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xCD95; &#xC140; &#xB9AC;&#xC5B4; &#xC140; &#xC55E;&#xBA74; &#xC120;&#xB3C4; &#xD575; &#xBE44;&#xC815;&#xD615; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC140; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xD615;&#xC131;. &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB07C;&#xCCE4;&#xB2E4; &#xACAC;&#xC778; &#xB450;&#xB294; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xD6C4; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC140; &#xBC14;&#xB514; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD615; &#xC138;&#xB825;. &#xC140; &#xCCA8;&#xB2E8; &#xC804;&#xC2DC; myosin &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xBCC0;&#xD615; &#xC77C;&#xCE58; II &#xC885;&#xC18D; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xD750;&#xB984;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; myosin IIA &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC140; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xBE68;&#xB9AC; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; 3D &#xC824;&#xC774; myosin IIA &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD588;&#xB2E4; unpolarized &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC774;&#xAE30; &#xD798; &#xB4DC;&#xB294;. &#xBC18;&#xBA74;, myosin IIB &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; myosin IIA, IIB, myosin &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; 3D &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Myosin IIA &#xC885;&#xC18D; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xD750;&#xB984; 3D &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;.

La migraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas epiteliales es una parte esencial de la embriog&#xE9;nesis y la regeneraci&#xF3;n del tejido, sin embargo, su migraci&#xF3;n se entiende por lo menos. Usando nuestro de tres dimensiones (3D) el an&#xE1;lisis de la movilidad, la migraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas epiteliales forman una forma at&#xED;pica de c&#xE9;lulas polarizadas con el n&#xFA;cleo celular que lleva al frente y una parte trasera de c&#xE9;lulas contr&#xE1;ctiles. Migraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas epiteliales fuerzas de tracci&#xF3;n ejercida para deformar tanto la matriz extracelular anterior y posterior hacia el cuerpo de la c&#xE9;lula. La c&#xE9;lula de punta exhibi&#xF3; una miosina II-dependiente flujo retr&#xF3;grado con la magnitud y direcci&#xF3;n coherente con rodea deformaci&#xF3;n de la red. Curiosamente, sobre un sustrato de dos dimensiones, miosina IIA c&#xE9;lulas deficientes migr&#xF3; m&#xE1;s r&#xE1;pido que c&#xE9;lulas de tipo salvaje, pero en un gel de 3D, estos miosina IIA c&#xE9;lulas deficientes eran no polarizada e inm&#xF3;vil. En contraste, las tasas de migraci&#xF3;n de la miosina II B de c&#xE9;lulas deficientes fueron similares a las c&#xE9;lulas de tipo salvaje. Por lo tanto, la miosina IIA no, la miosina II B, se requiere para la migraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas epiteliales en 3D.

La miosina II retr&#xF3;grada flujo dependiente de Unidades de migraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas en 3D

&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x8C03;&#x63A7;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x7C98;&#x7740;&#x86CB;&#x767D; zyxin &#x6210;&#x4E3A;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A; zyxin &#x65B0;&#x5175;&#x542F;&#x7528;&#x8840;&#x7BA1;&#x6269;&#x5F20;&#x523A;&#x6FC0;&#x78F7;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;Ena/VASP) &#x4FC3;&#x8FDB;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;Zyxin &#x8FD8;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x4FC3;&#x8FDB; Ena/VASP &#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x9488;&#x5BF9; zyxin &#x7684; shRNA&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86; zyxin &#x5728;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;Zyxin &#x7F3A;&#x9677;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9ECF;&#x7740;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x662F;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x4F46;&#x5176;&#x8FC1;&#x79FB;&#x901F;&#x7387;&#x662F;&#x4E0D;&#x53D8;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42;&#x8868;&#x9762;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x7FA4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x94FA;&#x5C55;&#x4E86; zyxin &#x7F3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F83;&#x6162;&#x3002;&#x7531;&#x70E7;&#x8680;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x5C42;&#x5185;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CF;&#x5316;&#x4F24;&#x53E3;&#x95ED;&#x5408;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x73AF;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x73AF;&#x7684;&#x7387;&#x3002;Zyxin &#x7F3A;&#x9677;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672A;&#x80FD;&#x8058;&#x8BF7;&#x5230;&#x4F24;&#x53E3;&#x8FB9;&#x7F18;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8DEF;&#x53E3; VASP &#x548C;&#x4F24;&#x53E3;&#x5173;&#x95ED;&#x7387;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F88;&#x6162;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x62DB;&#x52DF; VASP&#x3001; zyxin &#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x5730;&#x70B9;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x529B;&#x683C;&#x3002;

&#x9700;&#x8981;&#x9AD8;&#x6548;&#x7684;&#x4F24;&#x53E3;&#x95ED;&#x5408; Zyxin &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5927;&#x4F1A;&#x3002;

Cytoskeletal regulation of cell adhesion is vital to the organization of multicellular structures. The focal adhesion protein zyxin emerged as a key regulator of actin assembly because zyxin recruits Enabled/vasodilator-stimulated phospho-proteins (Ena/VASP) to promote actin assembly. Zyxin also localizes to the sites of cell-cell adhesion and is thought to promote actin assembly with Ena/VASP. Using shRNA targeted to zyxin, we analyzed the roles of zyxin at adhesive contacts. In zyxin-deficient cells, the actin assembly at both focal adhesion and cell-cell adhesion was limited, but their migration rate was unchanged. Cell spreading on E-cadherin-coated surfaces and the formation of cell clusters were slower for zyxin-deficient cells than wild type cells. By ablating a single cell within a cell monolayer, we quantified the rate of wound closure driven by a contractile circumferential actin ring. Zyxin-deficient cells failed to recruit VASP to cell-cell junctions at the wound edge and had a slower wound closure rate than wild type cells. Our results suggest that, by recruiting VASP, zyxin regulates actin assembly at the sites of force-bearing cell-cell adhesion.

Zyxin-mediated actin assembly is required for efficient wound closure.

R&#xE9;gulation du cytosquelette de l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire est essentielle &#xE0; l&#x26;#39;organisation des structures multicellulaires. La zyxine prot&#xE9;ines d&#x26;#39;adh&#xE9;sion focale apparue comme un r&#xE9;gulateur cl&#xE9; de l&#x26;#39;actine de montage, car les recrues zyxine Activ&#xE9; / vasodilatateur stimul&#xE9;e par phospho-prot&#xE9;ines (Ena / VASP) afin de promouvoir ensemble l&#x26;#39;actine. Zyxine localise &#xE9;galement les sites de adh&#xE9;rence cellule-cellule et l&#x26;#39;on pense &#xE0; promouvoir ensemble l&#x26;#39;actine avec Ena / VASP. Utilisation de shRNA cibl&#xE9;e &#xE0; la zyxine, nous avons analys&#xE9; les r&#xF4;les de la zyxine au niveau des contacts adh&#xE9;sifs. Dans la zyxine des cellules d&#xE9;ficientes, l&#x26;#39;assemblage d&#x26;#39;actine &#xE0; la fois d&#x26;#39;adh&#xE9;sion focale et adh&#xE9;sion cellule-cellule a &#xE9;t&#xE9; limit&#xE9;e, mais leur taux de migration est rest&#xE9; inchang&#xE9;. &#xC9;talement cellulaire sur la E-cadh&#xE9;rine surfaces rev&#xEA;tues et la formation d&#x26;#39;amas cellulaires ont &#xE9;t&#xE9; plus lents pour zyxine des cellules d&#xE9;ficientes que les cellules de type sauvage. Par l&#x26;#39;ablation d&#x26;#39;une seule cellule dans une monocouche de cellules, nous avons quantifi&#xE9; le taux de fermeture de la plaie entra&#xEE;n&#xE9;e par un anneau d&#x26;#39;actine p&#xE9;riph&#xE9;rique contractile. Zyxine des cellules d&#xE9;ficientes pas r&#xE9;ussi &#xE0; recruter VASP &#xE0; jonctions cellule-cellule au bord de la plaie et a eu un taux plus lent de fermeture de plaie que les cellules de type sauvage. Nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que, par VASP recrutement, zyxine r&#xE9;glemente assemblage d&#x26;#39;actine sur les sites de la force portante adh&#xE9;sion cellule-cellule.

Assembl&#xE9;e actine zyxine-d&#xE9;pendante est requise pour les fermer des plaies efficace

Zytoskelett Regulierung der Zelladh&auml;sion ist entscheidend f&uuml;r die Organisation der vielzelligen Strukturen. Die fokale Adh&auml;sion Protein Zyxin entstand als wichtiger Regulator der Aktin-Versammlung, weil Zyxin Enabled/Vasodilatator-stimuliert Phosphoproteine (Ena/VASP) zur F&ouml;rderung der Aktin-Versammlung Rekruten. Zyxin auch zu den Websites der Zell-Zell-Adh&auml;sion lokalisiert und wird zur F&ouml;rderung der Aktin-Assembly mit Ena/VASP gedacht. Mit ShRNA auf Zyxin ausgerichtet, analysiert wir die Rollen von Zyxin Klebstoff Kontakte. Klicken Sie im Zyxin-defizienten Zellen die Aktin-Assembly im fokale Adh&auml;sion und Zell-Zell-Adh&auml;sion begrenzt war, aber ihre Migrationsrate war unver&auml;ndert. Verbreitung &uuml;ber E-Cadherin-beschichtete Oberfl&auml;chen und die Bildung von Clustern Zelle Zelle waren f&uuml;r Zyxin-defizienten Zellen als Wildtyp Zellen langsamer. Mit eine einzige Zelle innerhalb einer Zelle Monolage Abtragen, quantifiziert wir die Rate der Wunde Schlie&szlig;ung getrieben von einem kontraktilen umlaufende Aktin-Ring. Zyxin-defizienten Zellen konnte VASP zu Zell-Zell-Verbindungen am Rande Wunde zu rekrutieren und hatte eine Wunde Verschluss langsamer als Wildtyp Zellen. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass durch die Einstellung von VASP, Zyxin Aktin Versammlung an den Standorten der Kraft-Lager Zell-Zell-Adh&auml;sion regelt.

Zyxin-vermittelte Aktin-Baugruppe ist f&uuml;r effiziente Wunde Schlie&szlig;ung erforderlich.

Citoscheletriche regolamento di adesione delle cellule &egrave; di vitale importanza per l&#39;organizzazione di strutture pluricellulari. La zyxin proteina di adesione focale &egrave; emerso come un regolatore chiave di assemblaggio dell&#39;actina perch&eacute; zyxin reclute Enabled/vasodilatatore-stimolato fosfoproteine (Ena/VASP) per promuovere l&#39;assemblaggio dell&#39;actina. Zyxin inoltre si localizza ai siti di adesione cellula-cellula ed &egrave; pensato per favorire l&#39;assemblaggio dell&#39;actina con Ena/VASP. Utilizzando shRNA mirato a zyxin, abbiamo analizzato i ruoli di zyxin a contatti adesivi. Nelle cellule zyxin-carenti, l&#39;Assemblea di actina sia adesione focale e adesione cellula-cellula era limitato, ma loro tasso di migrazione era invariato. Cella diffusione su superfici verniciate E-caderina e la formazione di ammassi di cellule era pi&ugrave; lento per cellule zyxin con deficit di cellule di tipo selvatico. Di ablazione di una singola cella all&#39;interno di un monostrato cellulare, abbiamo quantificato il tasso di chiusura ferita guidato da un anello contrattile di actina circonferenziale. Zyxin-con deficit di cellule non &egrave; riuscito a reclutare VASP per giunzioni cellula-cellula al bordo della ferita e avevano un tasso pi&ugrave; lento di chiusura di ferita di cellule di tipo selvatico. I nostri risultati suggeriscono che, con l&#39;assunzione di VASP, zyxin regola assemblaggio dell&#39;actina presso i siti di adesione cellula-cellula di forza-cuscinetto.

Assemblaggio dell&#39;actina Zyxin-mediata &egrave; richiesto per la chiusura della ferita efficace.

&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002; zyxin&#x306E;&#x65B0;&#x5175;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x52B9;/&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;&#x6075;&#x90A3;/ VASP&#xFF09;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x62E1;&#x5F35;&#x85AC;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x63A5;&#x7740;&#x6591;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;zyxin&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Zyxin&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x6075;&#x90A3;/ VASP&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x96C6;&#x5408;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; zyxin&#x3092;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x305F;shRNA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x63A5;&#x7740;&#x5264;&#x63A5;&#x70B9;&#x3067;zyxin&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002; zyxin&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7126;&#x70B9;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306F;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x5909;&#x308F;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;zyxin&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x9045;&#x304F;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x5C64;&#x5185;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5207;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x5468;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5275;&#x50B7;&#x9589;&#x9396;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Zyxin&#x6B20;&#x640D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5275;&#x50B7;&#x306E;&#x7E01;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x306B;VASP&#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9045;&#x3044;&#x50B7;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x7387;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x63A1;&#x7528;VASP&#x3067;&#x3001;zyxin&#x306F;&#x529B;&#x6709;&#x5229;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Zyxin&#x5A92;&#x4ECB;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x5275;&#x7E2B;&#x5408;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

Cytoskeletal &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xC810; &#xC811;&#xCC29; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; zyxin zyxin &#xC2E0;&#xBCD1; &#xC0AC;&#xC6A9;/vasodilator &#xC790;&#xADF9; &#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC6F9;&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, / VASP) &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xD64D;&#xBCF4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC758; &#xD0A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xB4F1;&#xC7A5;. Zyxin&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB85C; localizes &#xD558; &#xACE0; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC6F9;&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, / VASP&#xC640; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. ShRNA zyxin&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC811;&#xCC29;&#xC81C; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xC5D0;&#xC11C; zyxin&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. Zyxin-&#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC81C;&#xD55C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xC140; &#xC140; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; E cadherin &#xCF54;&#xD305; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; zyxin &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB290;&#xB9B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC140; &#xB2E8;&#xCE35; &#xB0B4;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140;&#xC744; ablating&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC0C1;&#xCC98; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xC218;&#xCD95; &#xC6D0;&#xC8FC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xB9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815;&#xD560;. Zyxin &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xCC98; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC140; &#xC811;&#xD569;&#xC5D0; VASP&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558; &#xACE0; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD0C0;&#xC785; &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB290;&#xB9B0; &#xC0C1;&#xCC98; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;, VASP&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558; &#xC5EC; zyxin &#xC870;&#xC808; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xAC15;&#xC81C; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zyxin &#xC911;&#xC7AC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xCC98; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Regulaci&#xF3;n del citoesqueleto de la adhesi&#xF3;n celular es vital para la organizaci&#xF3;n de las estructuras multicelulares. La prote&#xED;na de adhesi&#xF3;n focal zyxin surgi&#xF3; como un regulador clave de la actina asamblea porque los reclutas zyxin Habilitado / vasodilatador estimulada por fosfo-prote&#xED;nas (ENA / VASP) para promover el ensamblaje de actina. Zyxin tambi&#xE9;n se localiza en los sitios de adhesi&#xF3;n c&#xE9;lula-c&#xE9;lula y se cree que promover el ensamblaje de actina con Ena / VASP. Usando shRNA dirigido a zyxin, se analizaron las funciones de zyxin en los contactos adhesivos. En zyxin las c&#xE9;lulas deficientes, el conjunto de la actina, tanto de adhesi&#xF3;n focal y la adhesi&#xF3;n c&#xE9;lula-c&#xE9;lula era limitado, pero su tasa de migraci&#xF3;n se mantuvo sin cambios. La propagaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas de la E-cadherina superficies recubiertas y la formaci&#xF3;n de grupos de c&#xE9;lulas eran m&#xE1;s lentos para zyxin d&#xE9;ficit de las c&#xE9;lulas que las c&#xE9;lulas de tipo salvaje. Por la ablaci&#xF3;n de una sola c&#xE9;lula dentro de una monocapa de c&#xE9;lulas, se cuantific&#xF3; la tasa de cierre de la herida impulsado por un anillo circunferencial actina contr&#xE1;ctil. Zyxin las c&#xE9;lulas deficientes en no contratar a la VASP uniones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula en el borde de la herida y ten&#xED;a una tasa de cierre de la herida m&#xE1;s lento que las c&#xE9;lulas de tipo salvaje. Nuestros resultados sugieren que, por la VASP de reclutamiento, zyxin regula conjunto de actina en los sitios de la c&#xE9;lula-c&#xE9;lula la fuerza de soporte de la adhesi&#xF3;n.

Zyxin mediada por la Asamblea actina es necesaria para el cierre de heridas eficiente

Mantenendo la corretta adesione fra cellule adiacenti dipende dalla capacit&agrave; delle cellule di rispondere meccanicamente alle tensioni nelle giunzioni cellula-cellula attraverso il citoscheletro di actina. Pertanto, identificare le molecole coinvolte nella risposta alla tensione di cella fornirebbe spaccato la manutenzione, il regolamento e la ripartizione delle giunzioni cellula-cellula nel corso di vari processi biologici. Vinculin, una proteina actina che associa la caderina complesso, viene reclutato per contatti cellula-cellula sotto tensionamento aumentato in una maniera di miosina II-dipendente. Tuttavia, il ruolo preciso del vinculin a giunzioni di forza-cuscinetto cellula-cellula e come attivit&agrave; di miosina II altera l&#39;assunzione del vinculin a contatti cellula-cellula quiescente non sono state dimostrate.

Miosina II attivit&agrave; dipendenti e indipendenti vinculin reclutamento per i siti di adesione cellula-cellula E-caderina-mediata.

&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x9593;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x306E;&#x5F35;&#x529B;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F35;&#x529B;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x8ABF;&#x6574;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3002;&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x30D3;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x5F35;&#x529B;&#x4E0B;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x306B;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x529B;&#x6709;&#x5229;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x5408;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x9759;&#x6B62;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x89E6;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D3;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x30D3;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;II E-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3078;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30D3;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x52DF;&#x96C6;

&#x7EF4;&#x6301;&#x9002;&#x5F53;&#x76F8;&#x90BB;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x673A;&#x68B0;&#x5730;&#x56DE;&#x5E94;&#x8DEF;&#x53E3;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x65F6;&#x901A;&#x8FC7;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x5F20;&#x529B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5E94;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F20;&#x529B;&#x5206;&#x5B50;&#x4F1A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x3001; &#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x5206;&#x9879;&#x6570;&#x5B57;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8DEF;&#x53E3;&#x5404;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7EBD;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x9499;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8054;&#x7CFB;&#x4EBA;&#x4E0B;&#x589E;&#x52A0;&#x7D27;&#x5F20;&#x5C40;&#x52BF;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D; II &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x8BC1;&#x660E;&#x529B;&#x683C;&#x8DEF;&#x53E3;&#x548C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5982;&#x4F55;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x7EBD;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x9759;&#x6B62;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x62DB;&#x8058;&#x7EBD;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x4E8C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4ECE;&#x5C5E;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7EBD;&#x86CB;&#x767D;&#x62DB;&#x52DF;&#x5230;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684; E-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;-&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x3002;

Maintaining proper adhesion between neighboring cells depends on the ability of cells to mechanically respond to tension at cell-cell junctions through the actin cytoskeleton. Thus, identifying the molecules involved in responding to cell tension would provide insight into the maintenance, regulation, and breakdown of cell-cell junctions during various biological processes. Vinculin, an actin-binding protein that associates with the cadherin complex, is recruited to cell-cell contacts under increased tension in a myosin II-dependent manner. However, the precise role of vinculin at force-bearing cell-cell junctions and how myosin II activity alters the recruitment of vinculin at quiescent cell-cell contacts have not been demonstrated.

Myosin II activity dependent and independent vinculin recruitment to the sites of E-cadherin-mediated cell-cell adhesion.

Maintenir une bonne adh&#xE9;rence entre les cellules voisines d&#xE9;pend de la capacit&#xE9; des cellules &#xE0; r&#xE9;pondre &#xE0; la tension m&#xE9;canique &#xE0; jonctions cellule-cellule par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du cytosquelette d&#x26;#39;actine. Ainsi, l&#x26;#39;identification des mol&#xE9;cules impliqu&#xE9;es dans la r&#xE9;ponse &#xE0; la tension de cellule serait donner un aper&#xE7;u de l&#x26;#39;entretien, la r&#xE9;glementation et la r&#xE9;partition des jonctions cellule-cellule au cours de divers processus biologiques. Vinculine, une prot&#xE9;ine liant l&#x26;#39;actine qui s&#x26;#39;associe avec le complexe cadh&#xE9;rine, est recrut&#xE9; pour des contacts cellule-cellule sous tension a augment&#xE9; dans une myosine II-d&#xE9;pendante. Cependant, le r&#xF4;le pr&#xE9;cis de vinculine &#xE0; la force porteurs jonctions cellule-cellule et la fa&#xE7;on dont la myosine II modifie l&#x26;#39;activit&#xE9; du recrutement de vinculine au repos cellule-cellule contacts n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9;es.

La myosine II Activit&#xE9; vinculine Recrutement d&#xE9;pendante et ind&#xE9;pendante sur les sites de E-cadh&#xE9;rine-m&#xE9;diation adh&#xE9;sion cellule-cellule

Pflege ordnungsgem&auml;&szlig;e Haftung zwischen benachbarten Zellen h&auml;ngt von der F&auml;higkeit der Zellen, mechanisch auf Spannung bei Zell-Zell-Verbindungen durch die Aktin-Zytoskeletts zu reagieren. Somit w&uuml;rde identifizieren die Molek&uuml;le beteiligt sind, reagieren auf Zelle Spannung Einblick in die Wartung, die Verordnung und die Aufschl&uuml;sselung der Zell-Zell-Verbindungen w&auml;hrend verschiedene biologische Prozesse bieten. Vinculin, ein Aktin-verbindliches Protein, das die komplexe, Cadherin zuordnet ist f&uuml;r Zell-Zell-Kontakte unter erh&ouml;hter Spannung Myosin II-abh&auml;ngigen Weise angeworben. Jedoch die genaue Rolle der Vinculin an Kraft-Lager Zell-Zell-Verbindungen und wie Myosin-II-Aktivit&auml;t &auml;ndert die Einstellung von Vinculin Ruhezustand Zell-Zell-Kontakte sind nicht erprobt.

Myosin II T&auml;tigkeit abh&auml;ngige und unabh&auml;ngige Vinculin Einstellung zu den Seiten von E-Cadherin-vermittelten Zell-Zell-Adh&auml;sion.

&#xC778;&#xC811; &#xC140; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xC811;&#xCC29; &#xB825;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC811;&#xD569;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC140; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xADDC;&#xC815;&#xACFC; &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xACE0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. Vinculin, cadherin &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; myosin II&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xC544;&#xB798; &#xC140; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xAC15;&#xC81C; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xC140; &#xC811;&#xD569;&#xACFC; myosin II &#xD65C;&#xB3D9; &#xBB34;&#xBD80;&#xD558; &#xC140; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xC5D0;&#xC11C; vinculin&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; vinculin&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC99D;&#xBA85; &#xB418;&#xC9C0; &#xC788;&#xB2E4;.

Myosin II &#xD65C;&#xB3D9; &#xC885;&#xC18D; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xB9BD; vinculin &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9; &#xC804;&#xC790; cadherin &#xC911;&#xC7AC; &#xC140; &#xC811;&#xCC29;.

El mantenimiento de una adhesi&#xF3;n adecuada entre las c&#xE9;lulas vecinas depende de la capacidad de las c&#xE9;lulas para responder a la tensi&#xF3;n mec&#xE1;nica en las uniones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula a trav&#xE9;s del citoesqueleto de actina. Por lo tanto, la identificaci&#xF3;n de las mol&#xE9;culas implicadas en la respuesta a la tensi&#xF3;n de c&#xE9;lulas que proporcionar informaci&#xF3;n sobre el mantenimiento, regulaci&#xF3;n y distribuci&#xF3;n de las uniones c&#xE9;lula-c&#xE9;lula en diversos procesos biol&#xF3;gicos. Vinculina, una prote&#xED;na de uni&#xF3;n actina-que se asocia con el complejo cadherina, se reclut&#xF3; a los contactos c&#xE9;lula-c&#xE9;lula en aumento de la tensi&#xF3;n en la miosina II-dependiente. Sin embargo, el papel preciso de vinculina en la celda de c&#xE9;lulas portadoras de fuerza de los cruces y la forma en la actividad miosina II altera la contrataci&#xF3;n de vinculina en reposo contactos c&#xE9;lula-c&#xE9;lula no se han demostrado.

La miosina II Actividad vinculina dependiente e independiente de la captaci&#xF3;n de los Sitios de E-cadherina mediada por la c&#xE9;lula de adhesi&#xF3;n celular

Wenting Shih

University of California, Davis

Live-cell Imaging of Migrating Cells Expressing Fluorescently-tagged Proteins in a Three-dimensional Matrix