analyzing-cellular-internalization-nanoparticles-bacteria-multi

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

Iowa State University

Haemophilus parasuis is a swine pathogen of significant industry concern, but little is known about how the organism causes disease. A related human pathogen, Haemophilus influenzae, has been better studied, and many of its virulence factors have been identified. Two of these, outer membrane proteins P2 and P5, are known to have important virulence properties. The goals of this study were to identify, analyze, and compare the genetic relatedness of orthologous genes encoding P2 and P5 proteins in a diverse group of 35 H. parasuis strains. Genes encoding P2 and P5 proteins were detected in all H. parasuis strains evaluated. The predicted amino acid sequences for both P2 and P5 proteins exhibit considerable heterogeneity, particularly in regions corresponding to predicted extracellular loops. Twenty-five variants of P2 and 17 variants of P5 were identified. The P2 proteins of seven strains were predicted to contain a highly conserved additional extracellular loop compared to the remaining strains and to H. influenzae P2. Antigenic-site predictions coincided with predicted extracellular loop regions of both P2 and P5. Neighbor-joining trees constructed using P2 and P5 sequences predicted divergent evolutionary histories distinct from those predicted by a multilocus sequence typing phylogeny based on partial sequencing of seven housekeeping genes. Real-time reverse transcription-PCR indicated that both genes are expressed in all of the strains.

Characterization and comparative analysis of the genes encoding Haemophilus parasuis outer membrane proteins P2 and P5.

&#x57FA;&#x4E8E;&#x5C06;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x7684;&#x9F20;&#x75AB;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x9F20;&#x75AB;&#x83CC;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x805A;&#x9178;&#x9150;&#x7684;&#x53EF;&#x751F;&#x7269;&#x964D;&#x89E3;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x8FD0;&#x8F7D;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x662F;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5168;&#x957F; Y.&#x9F20;&#x75AB;&#x83CC;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (F1-V) &#x6216;&#x91CD;&#x7EC4; Y.&#x9F20;&#x75AB;&#x83CC;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (F1(B2T1)-V10) &#x662F;&#x5C01;&#x88C5;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4ECE;&#x57FA;&#x4E8E; 1&#xFF0C;6-bis(p-carboxyphenoxy) &#x6B63;&#x5DF1;&#x70F7; (CPH) &#x548C;&#x7678;&#x4E8C;&#x9178; (SA) &#x5171;&#x805A;&#x7269;&#x548C; 1&#xFF0C;8-bis(p-carboxyphenoxy)-3&#xFF0C;6-dioxaoctane (CPTEG) &#x548C; CPH &#x5171;&#x805A;&#x7269;&#x4F4E;&#x6E29;&#x96FE;&#x5316;&#x634F;&#x9020;&#x7684;&#x5FAE;&#x7C92;&#x4E2D;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;&#x9176;&#x8054;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x5728;&#x91CA;&#x653E;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684; F1 (B2T1)-V10 &#x662F;&#x4ECE;&#x758F;&#x6C34; CPH:SA &#x5FAE;&#x7C92;&#xFF0C;&#x83B7;&#x91CA;&#x540E;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x53CC;&#x4EB2; CPTEG:CPH &#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x5168;&#x957F; F1-V &#x7A33;&#x5B9A;&#x91CA;&#x653E;&#x4E86; CPH:SA &#x548C; CPTEG:CPH &#x5FAE;&#x7C92;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x9178;&#x9150;&#x5355;&#x4F53;&#x5BF9;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x5B66;&#x3001; &#x4E2D;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x548C; SA&#x3001; CPH &#x548C; CPTEG &#x9178;&#x9150;&#x5355;&#x4F53;&#x4E0B;&#x9971;&#x548C;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x5B75;&#x5316;&#x540E;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x4E09;&#x7EA7;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; Y.&#x9F20;&#x75AB;&#x83CC;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x63D0;&#x4F9B; CPTEG &#x5355;&#x4F53;&#x7684;&#x4EB2;&#x73AF;&#x5883;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x900F;&#x5F7B;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9610;&#x660E;&#x4EE5;&#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x53EF;&#x751F;&#x7269;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x8F93;&#x9001;&#x88C5;&#x7F6E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x86CB;&#x767D;&#x8F7D;&#x4F53;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x75AB;&#x82D7;&#x4F50;&#x5242;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x5C01;&#x88C5;&#x5230;&#x53CC;&#x4EB2;&#x9178;&#x9150;&#x5FAE;&#x7C92;&#x7A33;&#x5B9A;&#x9F20;&#x75AB;&#x8036;&#x5C14;&#x68EE;&#x6C0F;&#x9F20;&#x75AB;&#x83CC;&#x6297;&#x539F;&#x3002;

The design of biodegradable polymeric delivery systems based on polyanhydrides that would provide for improved structural integrity of Yersinia pestis antigens was the main goal of this study. Accordingly, the full-length Y. pestis fusion protein (F1-V) or a recombinant Y. pestis fusion protein (F1(B2T1)-V10) was encapsulated and released from microparticles based on 1,6-bis(p-carboxyphenoxy)hexane (CPH) and sebacic acid (SA) copolymers and 1,8-bis(p-carboxyphenoxy)-3,6-dioxaoctane (CPTEG) and CPH copolymers fabricated by cryogenic atomization. An enzyme-linked immunosorbent assay was used to measure changes in the antigenicity of the released proteins. The recombinant F1(B2T1)-V10 was unstable upon release from the hydrophobic CPH:SA microparticles, but maintained its structure and antigenicity in the amphiphilic CPTEG:CPH system. The full-length F1-V was stably released by both CPH:SA and CPTEG:CPH microparticles. In order to determine the effect of the anhydride monomers on the protein structure, changes in the primary, secondary, and tertiary structure, as well as the antigenicity of both Y. pestis antigens, were measured after incubation in the presence of saturated solutions of SA, CPH, and CPTEG anhydride monomers. The results indicated that the amphiphilic environment provided by the CPTEG monomer was important to preserve the structure and antigenicity of both proteins. These studies offer an approach by which a thorough understanding of the mechanisms governing antigenic instability can be elucidated in order to optimize the in vivo performance of biodegradable delivery devices as protein carriers and/or vaccine adjuvants.

Encapsulation into amphiphilic polyanhydride microparticles stabilizes Yersinia pestis antigens.

La conception de vecteurs polym&egrave;res biod&eacute;gradables, bas&eacute; sur les polyanhydrides qui permettrait de financer la meilleure int&eacute;grit&eacute; structurale des antig&egrave;nes de Yersinia pestis a &eacute;t&eacute; le principal objectif de cette &eacute;tude. Par cons&eacute;quent, la prot&eacute;ine de fusion de pleine longueur Y. pestis (F1-V) ou une Y. pestis fusion prot&eacute;ine recombinante (F1(B2T1)-V10), encapsul&eacute;s et lib&eacute;r&eacute; de microparticules, bis(p-carboxyphenoxy) 1, 6 hexane (CPH) et de copolym&egrave;res de l&#39;acide s&eacute;bacique (SA) et de 1, 8-bis(p-carboxyphenoxy)-3, 6-dioxaoctane (CPTEG) et de copolym&egrave;res CPH fabriqu&eacute;es par atomisation cryog&eacute;nique. Un enzyme-linked immunosorbent assay servait &agrave; mesurer les changements dans l&#39;antig&eacute;nicit&eacute; des prot&eacute;ines lib&eacute;r&eacute;es. La F1 recombinante (B2T1)-V10 &eacute;tait instable d&egrave;s parution des microparticules CPH:SA hydrophobes, mais maintenu sa structure et son antig&eacute;nicit&eacute; dans le syst&egrave;me CPTEG:CPH d&#39;amphiphiles. La F1-V album sortit stablement fois CPH:SA et microparticules de cpteg:CPH. Afin de d&eacute;terminer l&#39;effet des monom&egrave;res anhydride sur la structure des prot&eacute;ines, des changements du niveau primaire, secondaire, et la structure tertiaire, ainsi que l&#39;antig&eacute;nicit&eacute; des deux antig&egrave;nes d&#39;y. pestis, ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e apr&egrave;s incubation en pr&eacute;sence de solutions satur&eacute;es de monom&egrave;res de l&#39;anhydride SA, CPH et CPTEG. Les r&eacute;sultats indiquent que l&#39;environnement amphiphiles fournie par le monom&egrave;re CPTEG est important de pr&eacute;server la structure et l&#39;antig&eacute;nicit&eacute; des deux prot&eacute;ines. Ces &eacute;tudes offrent une approche par laquelle une compr&eacute;hension approfondie des m&eacute;canismes qui r&eacute;gissent l&#39;instabilit&eacute; antig&eacute;nique peut &ecirc;tre &eacute;lucid&eacute;e afin d&#39;optimiser la performance in vivo des dispositifs biod&eacute;gradables comme les prot&eacute;ines transporteurs et/ou adjuvants des vaccins.

Encapsulation dans amphiphiles polyanhydride microparticules stabilise les antig&egrave;nes de Yersinia pestis.

Das Design des biologisch abbaubaren Polymeren-Delivery-Systeme basierend auf Polyanhydrides, die f&uuml;r verbesserte strukturelle Integrit&auml;t von Yersinia Pestis-Antigenen bereitstellen w&uuml;rde war das Hauptziel dieser Studie. Entsprechend der in Y. Pestis-Fusionsprotein (F1-V) oder ein rekombinantes Y. Pestis-Fusionsprotein (F1(B2T1)-V10) war gekapselt und Mikropartikel basierend auf 1,6-Bis(p-carboxyphenoxy) Hexan (CPH) und CPH-Copolymere hergestellt von kryogenen Atomisierung, Sebacins&auml;ure (SA)-Copolymere und 1,8-Bis(p-carboxyphenoxy)-3, 6-Dioxaoctane (Westwood) entbunden. Ein Enzym-Immunassay wurde verwendet, um &Auml;nderungen in die Antigenit&auml;t der ver&ouml;ffentlichten Proteine zu messen. Die rekombinanten F1 (B2T1)-V10 war nach Entlassung aus der hydrophobe CPH:SA Mikropartikel instabil, aber gepflegt, seine Struktur und Antigenit&auml;t in der AMPHIPHILE CPTEG:CPH System. Das in F1-V wurde von CPH:SA und CPTEG:CPH Mikropartikel stabil ver&ouml;ffentlicht. Um die Auswirkungen der Anhydrid-Monomere auf die Proteinstruktur zu bestimmen &auml;ndert sich in der prim&auml;ren, sekund&auml;ren und Terti&auml;rstruktur sowie die Antigenit&auml;t der beiden Y. Pestis Antigene, wurden nach der Inkubation in Anwesenheit von ges&auml;ttigten L&ouml;sungen von SA, CPH und Westwood Anhydrid Monomeren gemessen. Die Ergebnisse zeigten, dass bereitgestellte durch die Westwood-Monomer AMPHIPHILE Umwelt wichtig, die Struktur und die Antigenit&auml;t der beiden Proteine zu erhalten war. Diese Studien bieten einen Ansatz, mit dem ein gr&uuml;ndliches Verst&auml;ndnis der Mechanismen, die EZB Antigene Instabilit&auml;t gekl&auml;rt werden kann, um die in-vivo Leistung biologisch abbaubare Lieferung Ger&auml;te als Protein Luftfahrtunternehmen und/oder Impfstoff Hilfsstoffe zu optimieren.

Kapselung in AMPHIPHILE Polyanhydride Mikropartikel stabilisiert Yersinia Pestis Antigene.

La progettazione di sistemi di consegna polimerici biodegradabili basato su polyanhydrides che avrebbe fornito una migliore integrit&agrave; strutturale degli antigeni di Yersinia pestis &egrave; stato l&#39;obiettivo principale di questo studio. Di conseguenza, il full-length proteina di fusione di Y. pestis (F1-V) o una Y. pestis fusione proteina ricombinante (F1(B2T1)-V10) era incapsulato e pubblicato da microparticelle basate su bis(p-carboxyphenoxy) 1,6 esano (CPH) e copolimeri acido sebacico (SA) e 1,8-bis(p-carboxyphenoxy)-3,6-dioxaoctane (CPTEG) e copolimeri CPH fabbricate da atomizzazione criogenico. Un enzyme-linked immunosorbent assay &egrave; stato utilizzato per misurare le variazioni nell&#39;antigenicit&agrave; delle proteine rilasciate. La F1 ricombinante (B2T1)-V10 era instabile dopo il rilascio dalle microparticelle CPH:SA idrofobico, ma mantenuto la sua struttura e antigenicit&agrave; in anfifili CPTEG:CPH sistema. Il full-length F1-V stabile &egrave; stato rilasciato da CPH:SA e da CPTEG:CPH le microparticelle. Al fine di determinare l&#39;effetto dei monomeri anidride acetica sulla struttura della proteina, modifiche in primario, secondario, e la struttura terziaria, come pure l&#39;antigenicit&agrave; di entrambi antigeni di Y. pestis, sono stato misurato dopo incubazione in presenza di soluzioni sature di monomeri anidride acetica SA, CPH e CPTEG. I risultati hanno indicato che l&#39;ambiente anfifili fornito dal monomero CPTEG era importante preservare la struttura e l&#39;antigenicit&agrave; di entrambe le proteine. Questi studi offrono un approccio che pu&ograve; essere chiarita una conoscenza approfondita dei meccanismi che regolano antigenica instabilit&agrave; al fine di ottimizzare le prestazioni in vivo dei dispositivi di consegna biodegradabili come vettori di proteine e/o coadiuvanti vaccino.

Incapsulamento in microparticelle polyanhydride anfifili stabilizza gli antigeni di Yersinia pestis.

Yersinia &#x30DA;&#x30B9;&#x30C8;&#x83CC;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x4E0A;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B; polyanhydrides &#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x751F;&#x5206;&#x89E3;&#x6027;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x914D;&#x4FE1;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x76EE;&#x6A19;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9; Y. &#x30DA;&#x30B9;&#x30C8;&#x83CC;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (F1-V) &#x307E;&#x305F;&#x306F; (F1(B2T1)-V10) &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3001;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F; 1, 6-bis(p-carboxyphenoxy) &#x30D8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3; (CPH) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30D0;&#x30B7;&#x30F3;&#x9178; (SA) &#x5171;&#x91CD;&#x5408;&#x4F53;&#x3068; 1, 8-bis(p-carboxyphenoxy)-3, 6-dioxaoctane (CPTEG) &#x3068;&#x6975;&#x4F4E;&#x6E29;&#x9727;&#x5316;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F; CPH &#x5171;&#x91CD;&#x5408;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x306F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E; Y. &#x30DA;&#x30B9;&#x30C8;&#x83CC;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3002;Elisa &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E; F1 (B2T1)-V10 &#x758E;&#x6C34;&#x6027; CPH:SA &#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6642;&#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x4E21;&#x89AA;&#x5A92;&#x6027; CPTEG:CPH &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E; F1 V &#x306F; CPH:SA &#x3068; CPTEG:CPH &#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3001;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x3001;&#x7121;&#x6C34;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x304C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3001;&#x4E09;&#x6B21;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E21;&#x65B9; Y. &#x30DA;&#x30B9;&#x30C8;&#x83CC;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x306E; SA&#x3001;CPH&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; CPTEG &#x306E;&#x7121;&#x6C34;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x98FD;&#x548C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x5F8C;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;.CPTEG &#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E21;&#x89AA;&#x5A92;&#x6027;&#x74B0;&#x5883;&#x304C;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x4E21;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306E;&#x30A2;&#x30B8;&#x30A7;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x5206;&#x89E3;&#x6027;&#x914D;&#x4FE1;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x4E21;&#x89AA;&#x5A92;&#x6027; polyanhydride &#x5FAE;&#x7C92;&#x5B50;&#x306B; Yersinia &#x30DA;&#x30B9;&#x30C8;&#x83CC;&#x6297;&#x539F;&#x3092;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Yersinia pestis &#xD56D; &#xC6D0;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; polyanhydrides&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0DD; &#xBD84;&#xD574;&#xC131; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC124;&#xACC4;&#xB294;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294;. &#xC774; &#xB530;&#xB77C; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; Y. pestis &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (F1-V) &#xB610;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Y. pestis &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (F1(B2T1)-V10)&#xB294; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8; 1, 6-bis(p-carboxyphenoxy) &#xD5E5; (CPH) &#xBC0F; sebacic &#xC0B0; (SA) &#xACF5;&#xC911; &#xD569;&#xCCB4; &#xBC0F; 1, 8-bis(p-carboxyphenoxy)-3, 6-dioxaoctane (CPTEG) &#xBC0F; &#xADF9;&#xC800;&#xC628; &#xC6D0;&#xC790;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC791; CPH &#xACF5;&#xC911; &#xD569;&#xCCB4; &#xAE30;&#xBC18;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xD45C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; immunosorbent &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; antigenicity &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;. &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; F1 (B2T1)-v 10&#xC740; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; CPH:SA &#xB4A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC548;&#xC815; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; antigenicity amphiphilic CPTEG:CPH &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; F1 V cph:sa&#xC640; CPTEG:CPH &#xB4A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; anhydride &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; 1 &#xCC28;, 2 &#xCC28;, &#xBCC0;&#xD654;&#xC640; 3 &#xCC28; &#xAD6C;&#xC870; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB450; Y. pestis &#xD56D; &#xC6D0; antigenicity SA, CPH, &#xBC0F; CPTEG anhydride &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4;&#xC758; &#xD3EC;&#xD654; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xBD80; &#xD654; &#xD6C4; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; CPTEG &#xBAA8;&#xB178; &#xBA38;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; amphiphilic &#xD658;&#xACBD; &#xAD6C;&#xC870; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; antigenicity&#xC744; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790; &#xBC0F;/&#xB610;&#xB294; &#xBC31;&#xC2E0; adjuvants &#xC0DD; &#xBD84;&#xD574;&#xC131; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xD558;&#xB824;&#xBA74;&#xC5D0; antigenic &#xBD88;&#xC548;&#xC815; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xCCA0;&#xC800; &#xD55C; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD574;&#xBA85; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Amphiphilic polyanhydride &#xB4A4;&#xC5D0; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xC548;&#xC815;&#xD654; Yersinia pestis &#xD56D; &#xC6D0;.

El dise&ntilde;o de sistemas polim&eacute;ricos biodegradables basado en polyanhydrides que proporcionen la integridad estructural mejorada de ant&iacute;genos de Yersinia pestis fue el objetivo principal de este estudio. Por consiguiente, la prote&iacute;na integral Y. pestis fusi&oacute;n (F1-V) o una Y. pestis fusi&oacute;n prote&iacute;na recombinante (F1(B2T1)-V10) fue encapsulado y de micropart&iacute;culas basado en copol&iacute;meros de &aacute;cido seb&aacute;cico (SA), 1,6-bis(p-carboxyphenoxy) hexano (CPH) y copol&iacute;meros CPH fabricados por atomizaci&oacute;n criog&eacute;nica y 1,8-bis(p-carboxyphenoxy)-3, 6-dioxaoctane (CPTEG). Un enzyme-linked immunosorbent assay fue utilizado para medir los cambios en la antigenicidad de las prote&iacute;nas liberadas. La F1 recombinante (B2T1)-V10 era inestable sobre el lanzamiento de las micropart&iacute;culas CPH:SA hidrof&oacute;bico, pero mantuvo su estructura y la antigenicidad de la anfif&iacute;licas CPTEG:CPH sistema. El largometraje F1-V estable fue lanzado por CPH:SA y micropart&iacute;culas de cpteg:CPH. Con el fin de determinar el efecto de los monomers del anh&iacute;drido en la estructura de la prote&iacute;na, cambios en la primaria, secundaria, y la estructura terciaria, as&iacute; como la antigenicidad de ambos ant&iacute;genos de Y. pestis, fueron medida despu&eacute;s de la incubaci&oacute;n en presencia de soluciones saturadas de mon&oacute;meros de anh&iacute;drido SA, CPH y CPTEG. Los resultados indicaron que el entorno de anfif&iacute;licas proporcionado por el mon&oacute;mero CPTEG importante para preservar la estructura y la antigenicidad de ambas prote&iacute;nas. Estos estudios ofrecen un enfoque mediante el cual una profunda comprensi&oacute;n de los mecanismos que regulan la inestabilidad antig&eacute;nica puede ser aclarada con el fin de optimizar el rendimiento in vivo de dispositivos de entrega biodegradables como portadores de la prote&iacute;na o adyuvantes de la vacuna.

Gregory J. Phillips

Department of Veterinary Microbiology and Preventive Medicine

Iowa State University

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Gregory J. Phillips

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Veterinary Microbiology and Preventive Medicine

Iowa State University

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Department of Veterinary Microbiology and Preventive Medicine