Visualizing Single Molecular Complexes <em>In Vivo</em> Using Advanced Fluorescence Microscopy

Full insight into the mechanisms of living cells can be achieved only by investigating the key processes that elicit and direct events at a cellular ...

University of Oxford

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We looked for a feedback system in Escherichia coli that might sense the rotational bias of flagellar motors and regulate the activity of the chemotaxis receptor kinase. Our search was based on the assumption that any machinery that senses rotational bias will be perturbed if flagellar rotation stops. We monitored the activity of the kinase in swimming cells by bioluminescence resonance energy transfer (BRET) between Renilla luciferase fused to the phosphatase, CheZ, and yellow fluorescent protein fused to the response regulator, CheY. Then we jammed the flagellar motors by adding an antifilament antibody that crosslinks adjacent filaments in flagellar bundles. At steady state, the rate of phosphorylation of CheY is equal to the rate of dephosphorylation of CheY-P, which is proportional to the degree of association between CheZ and CheY-P, the quantity sensed by BRET. No changes were observed, even upon addition of an amount of antibody that stopped the swimming of >95% of cells within a few seconds. So, the kinase does not appear to be sensitive to motor output. The BRET technique is complementary to one based on FRET, described previously. Its reliability was confirmed by measurements of the response of cells to the addition of attractants.

Monitoring bacterial chemotaxis by using bioluminescence resonance energy transfer: absence of feedback from the flagellar motors.

Nous avons recherch&eacute; un syst&egrave;me de r&eacute;troaction dans Escherichia coli qui peut d&eacute;tecter le biais de rotation des moteurs flagellaires et r&eacute;guler l&#39;activit&eacute; de la kinase du r&eacute;cepteur de chimiotactisme. Notre recherche a &eacute;t&eacute; bas&eacute;e sur l&#39;hypoth&egrave;se que n&#39;importe quelle machine qui d&eacute;tecte la rotation partialit&eacute; sera perturb&eacute;e si flagellaire rotation s&#39;arr&ecirc;te. Nous avons mesur&eacute; l&#39;activit&eacute; de la kinase dans les cellules de natation par transfert d&#39;&eacute;nergie de bioluminescence resonance (BRET) entre Renilla lucif&eacute;rase fusionn&eacute;e &agrave; la phosphatase, CheZ et jaune fluorescent protein fusionn&eacute;s avec le r&eacute;gulateur de la r&eacute;ponse, CheY. Puis nous coincer les moteurs flagellaires en ajoutant un anticorps antifilament que filaments adjacents crosslinks en faisceaux flagellaire. &Agrave; l&#39;&eacute;tat stable, le taux de phosphorylation de CheY est &eacute;gal au taux de d&eacute;phosphorylation de CheY-P, qui est proportionnelle au degr&eacute; d&#39;association entre CheZ et CheY-P, la quantit&eacute; capt&eacute;e par BRET. Aucune modification n&#39;ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es, m&ecirc;me lors de l&#39;addition d&#39;une quantit&eacute; d&#39;anticorps qui s&#39;est arr&ecirc;t&eacute; &agrave; la nage des &gt; 95 % des cellules en quelques secondes. Ainsi, la kinase ne semble pas sensible &agrave; la sortie du moteur. La technique de BRET est compl&eacute;mentaire &agrave; celui bas&eacute; sur la frette, d&eacute;crit plus haut. Sa fiabilit&eacute; a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par des mesures de la r&eacute;ponse des cellules &agrave; l&#39;ajout de substances attractives.

Surveillance de la chimiotaxie bact&eacute;rienne &agrave; l&#39;aide de transfert d&#39;&eacute;nergie de bioluminescence resonance : absence de feedback des moteurs flagellaires.

Wir suchten ein Feedbacksystem in Escherichia coli, die m&ouml;glicherweise sp&uuml;ren die rotatorische Verschiebung des Flimmerband Motoren und regulieren die Aktivit&auml;t der Chemotaxis-Rezeptor-Kinase. Unsere Suche basierte auf der Annahme, dass alle Maschinen, die rotatorischen Voreingenommenheit sp&uuml;rt gest&ouml;rt, wenn Flimmerband Drehung beendet werden. Wir &uuml;berwachten die Aktivit&auml;t der Kinase in Zellen von Biolumineszenz-Resonanz-Energie-Transfer (BRET) schwimmen zwischen Renilla-Luciferase verschmolzen, die Phosphatase, CheZ, und gelb fluoreszierendes Protein zu der Antwort-Regler, CheY verschmolzen. Das gestaute wir dann der Flimmerband Motors durch Hinzuf&uuml;gen von einem antifilament Antik&ouml;rper, dass Querverbindungen angrenzenden Filamente in Flimmerband b&uuml;ndeln. Bei Steady-State, die Phosphorylierung von CheY liegt gleich um die Rate der Dephosphorylierung von CheY-P, die proportional zum Grad der Assoziation ist CheZ und CheY-P, die Menge von BRET sp&uuml;rte. Keine &Auml;nderungen wurden beobachtet, n&auml;mlich auf einer Menge von Antik&ouml;rpern, die das Schwimmen von gestoppt &gt; 95 % der Zellen innerhalb weniger Sekunden. Also scheint das Kinase nicht empfindlich auf Motorleistung. Die BRET-Technik ist eine Erg&auml;nzung zu einer FRET, zuvor beschriebenen. Seine Zuverl&auml;ssigkeit best&auml;tigte Messungen &uuml;ber die Reaktion der Zellen auf den Zusatz von Lockstoffe.

&Uuml;berwachung der bakteriellen Chemotaxis mithilfe von Biolumineszenz-Resonanz-Energie-Transfer: mangelnde Feedback von der Flimmerband Motoren.

Abbiamo cercato un sistema di feedback in Escherichia coli che regolano l&#39;attivit&agrave; della chinasi del recettore chemiotassi di e potrebbe percepire il bias di rotazione dei motori flagellari. La nostra ricerca &egrave; stato basato sul presupposto che ogni macchinario che i sensi di rotazione bias sar&agrave; turbato se flagellari rotazione fermate. Abbiamo monitorato l&#39;attivit&agrave; della chinasi in cellule di nuoto di bioluminescenza resonance energy transfer (BRET) tra Renilla luciferase fusi per la fosfatasi, CheZ e giallo fuso proteina fluorescente per il regolatore di risposta, CheY. Poi abbiamo inceppato i motori flagellari aggiungendo un anticorpo antifilament che filamenti adiacenti le reticolazioni in fasci flagellari. Allo stato stazionario, il tasso di fosforilazione di CheY &egrave; pari al tasso di defosforilazione di CheY-P, che &egrave; proporzionale al grado di associazione tra CheZ e CheY-P, la quantit&agrave; rilevata da BRET. Non sono stati osservati cambiamenti, anche con l&#39;aggiunta di una quantit&agrave; di anticorpo che ferm&ograve; il nuoto di &amp;gt; 95% delle cellule in pochi secondi. Cos&igrave;, la chinasi non sembra essere sensibile all&#39;uscita motore. La tecnica di BRET &egrave; complementare ad uno basato sul tasto, descritto in precedenza. L&#39;affidabilit&agrave; &egrave; stata confermata da misurazioni della risposta delle cellule per l&#39;aggiunta di attrattivi.

Monitoraggio chemiotassi batterica mediante il trasferimento di energia di risonanza di bioluminescenza: assenza di feedback da parte dei motori flagellari.

&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x3092;&#x611F;&#x3058;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x63A2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x691C;&#x7D22;&#x306F;&#x56DE;&#x8EE2;&#x30D0;&#x30A4;&#x30A2;&#x30B9;&#x611F;&#x899A;&#x4EFB;&#x610F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x5834;&#x5408;&#x6442;&#x52D5;&#x56DE;&#x8EE2;&#x306E;&#x505C;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x524D;&#x63D0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30B7;&#x30A7;&#x3001;&#x878D;&#x5408; Renilla &#x30EB;&#x30B7;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x9EC4;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;CheY &#x878D;&#x5408;&#x9593;&#x904A;&#x6CF3;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5; (&#x30D6;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;) &#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x305D;&#x306E;&#xFF78;&#xFF9B;&#xFF7D;&#xFF98;&#xFF9D;&#xFF78;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x306E;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x3067; antifilament &#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x8A70;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CheY &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x7387;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x5EA6;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B; CheY-P &#x306E;&#x8131;&#x71D0;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x306B;&#x7B49;&#x3057;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x30B7;&#x30A7; &#x30FB; &#x30D6;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x611F;&#x77E5;&#x6570;&#x91CF; CheY P&#x3002;&#x5909;&#x66F4;, &#x306E;&#x6CF3;&#x3044;&#x3067;&#x505C;&#x6B62;&#x3057;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x91CF;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x76EE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x6570;&#x79D2;&#x4EE5;&#x5185;&#x306E; 95 &#xFF05;&#x3002;&#x3060;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x51FA;&#x529B;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x306F;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30D6;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x8FF0;&#x306E;&#x30D5;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306F;&#x8A98;&#x5F15;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x7D30;&#x83CC;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x5171;&#x9CF4;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x79FB;&#x52D5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;: &#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; flagellar &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC9C0; chemotaxis &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD68C;&#xC804; &#xBC14;&#xC774;&#xC5B4;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xACC4; flagellar &#xACBD;&#xC6B0; &#xAD50;&#xB780;&#xB41C; &#xD68C;&#xC804; &#xC911;&#xC9C0; &#xB41C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC00;&#xC815; &#xD558;&#xC5D0; &#xAE30;&#xBC18; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; Renilla &#xB8E8;&#xC2DC;&#xD398;&#xB77C;&#xC544;&#xC81C; &#xCCB4; &#xC988;, &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C;, &#xC735;&#xD569;&#xACFC; &#xB178;&#xB780;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC735;&#xD569; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, CheY &#xC0AC;&#xC774; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xB2EC; (&#xBE0C; &#xB808;&#xD2B8;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC140; &#xC218;&#xC601;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC74C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; flagellar&#xC5D0;&#xC11C; antifilament &#xD56D; &#xCCB4; &#xADF8; crosslinks &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xB97C; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; flagellar &#xBAA8;&#xD130; &#xB07C; &#xC5C8; &#xC5B4;. &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; Chey&#xC758; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; CheY-P &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD00;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840; &#xD558;&#xB294; dephosphorylation&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB3D9;&#xC77C; &#xCCB4; &#xC988;&#xC640; &#xBE0C; &#xB808;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; &#xC218;&#xB7C9; CheY P. &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC218;&#xC601;&#xC744; &#xC911;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xAE08;&#xC561;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4; &amp;gt; &#xC140; &#xBA87; &#xCD08; &#xC774;&#xB0B4;&#xC5D0; 95%. &#xADF8;&#xB798;&#xC11C;, &#xBAA8;&#xD130; &#xCD9C;&#xB825;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC5EC; &#xB2C8; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE0C; &#xB808;&#xD2B8; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC;, &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xB8B0;&#xC131; attractants&#xC758; &#xCD94;&#xAC00;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;.

&#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11; &#xACF5;&#xBA85; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; chemotaxis &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;: flagellar &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;.

Buscamos un sistema de retroalimentaci&oacute;n en Escherichia coli que podr&iacute;a detectar el sesgo rotaci&oacute;n de motores flagelares y regular la actividad de la cinasa del receptor de quimiotaxis. Nuestra b&uacute;squeda se bas&oacute; en el supuesto de que cualquier maquinaria que detecta la rotaci&oacute;n sesgo ser&aacute; perturbado si flagelar tope. Supervisamos la actividad de la cinasa en nataci&oacute;n c&eacute;lulas por transferencia de energ&iacute;a de resonancia de bioluminiscencia (BRET) entre Renilla luciferasa fusionado a la fosfatasa, CheZ y amarillo prote&iacute;na fluorescente fusionada al regulador de la respuesta, CheY. Luego nos atasca los motores flagelares a&ntilde;adiendo un anticuerpo antifilament eso filamentos adyacentes de v&iacute;nculos cruzados en paquetes flagelares. En estado estacionario, es igual a la tasa de desfosforilaci&oacute;n de CheY-P, que es proporcional al grado de asociaci&oacute;n entre la tasa de fosforilaci&oacute;n de CheY CheZ y CheY-P, la cantidad detectada por BRET. No se observaron cambios, incluso con adici&oacute;n de una cantidad de anticuerpo que dej&oacute; la nataci&oacute;n de &gt; 95% de las c&eacute;lulas en unos segundos. Por lo tanto, la quinasa parece no ser sensibles a la salida del motor. La t&eacute;cnica de BRET es complementaria al traste, se ha descrito anteriormente. Su confiabilidad fue confirmada por las mediciones de la respuesta de las c&eacute;lulas a la adici&oacute;n de atrayentes.

Monitoreo chemotaxis bacterianos mediante el uso de transferencia de energ&iacute;a de resonancia de bioluminiscencia: ausencia de retroalimentaci&oacute;n de los motores flagelares.

&#x5F88;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x7531;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x673A;&#x5668;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5B9E;&#x65F6;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#x8BB8;&#x591A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x5E76;&#x4E0D;&#x56FA;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x67D0;&#x79CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x8FD9;&#x662F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9884;&#x6599;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x53F8;&#x914D;&#x5408;&#x5B9A;&#x4E49; mid-cell &#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6216;&#x8BB8;&#x5E26;&#x6709;&#x968F;&#x7740;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x60CA;&#x559C;&#x50CF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x951A;&#x673A;&#x3002;&#x5047;&#x8BBE;&#x5DF2;&#xFF0C;&#x4E00;&#x65E6;&#x4F5C;&#x51FA;&#x5B83;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x662F;&#x575A;&#x51B3;&#x652F;&#x6301;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7A3F;&#x4EF6;&#x4E2D;&#x3002;&#x5B9A;&#x5B50;&#x5355;&#x4F4D;&#x6784;&#x6210;&#x8F6C;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5468;&#x56F4;&#x7684; peptioglycan &#x5B9A;&#x4F4D;&#x73AF;&#x4EA7;&#x751F;&#x8F6C;&#x77E9;&#x54CD;&#x5E94;&#x79BB;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#xFF0C;&#x663E;&#x7136;&#x8131;&#x79BB;&#x5F53;&#x6761;&#x4EF6;&#x53D1;&#x751F;&#x53D8;&#x5316;&#x65F6;&#x3002;&#x9A7E;&#x9A76;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x662F;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5230;&#x8F6C;&#x5B50;&#x5B9A;&#x5B50;&#x548C;&#x5B9A;&#x5B50;&#x5355;&#x5143;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x7ED3;&#x679C;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x57FA;&#x7840;&#x8FD0;&#x52A8;&#x529F;&#x80FD;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8BF4;&#x660E;&#x9700;&#x8981;&#x8FC1;&#x79BB;&#x7684;&#x9759;&#x6001;&#x89C6;&#x56FE;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x914D;&#x4EF6;&#x4EA4;&#x6D41;&#xFF1A; &#x4F18;&#x5316;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x7535;&#x673A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9002;&#x5408;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Many cellular activities are driven by complex protein machines. By measuring the behaviour of fluorescent protein fusions in real time in living cells it has become apparent that many of these complexes are not fixed, but are dynamic. To some extent this might be expected, for example, for cell division complexes, as defining mid-cell is linked to growth and cell cycle, but perhaps comes as more of a surprise with a complex anchored machine like the bacterial flagellar motor. The assumption has been that once made it remains intact. However, the dynamics of this structure is strongly supported in two manuscripts in this issue of Molecular Microbiology. The stator units which form a peptioglycan anchored ring around the rotor, generating torque in response to the ion motive force, clearly disengage when conditions change. The driving ion is shown to be important in both engagement of the stator to the rotor and the selection of the type of stator unit. These new results provide an insight into the mechanisms underlying motor function, which might rely on dynamic processes, and clearly illustrate the need to move away from a static view of cellular structures.

Parts exchange: tuning the flagellar motor to fit the conditions.

Nombreuses activit&eacute;s cellulaires sont mues par des machines complexes de prot&eacute;ine. En mesurant le comportement des fusions de la prot&eacute;ine fluorescente en temps r&eacute;el dans les cellules vivantes, il est devenu &eacute;vident que beaucoup de ces complexes ne sont pas fixes, mais sont dynamiques. Dans une certaine mesure cela pourrait s&#39;attendre, par exemple, pour les complexes de la division cellulaire, d&eacute;finition mid-cell est li&eacute;e &agrave; la croissance et le cycle cellulaire, mais peut-&ecirc;tre vient en plus d&#39;une surprise avec une machine complexe ancr&eacute;e comme le moteur flagellaire bact&eacute;rienne. L&#39;hypoth&egrave;se a &eacute;t&eacute; qu&#39;une fois qu&#39;il reste intact. Toutefois, la dynamique de cette structure est fortement soutenue dans les deux manuscrits dans ce num&eacute;ro de Microbiologie mol&eacute;culaire. Les unit&eacute;s de stator qui forment un anneau peptioglycan ancr&eacute;e autour du rotor, g&eacute;n&eacute;ratrices de couple en r&eacute;ponse &agrave; la force motrice d&#39;ion, d&eacute;gager clairement lorsque les conditions changent. Le moteur ionique est indiqu&eacute; comme &eacute;tant importants dans les deux l&#39;engagement du stator au rotor et la s&eacute;lection du type d&#39;unit&eacute; de stator. Ces nouveaux r&eacute;sultats renseignent sur les m&eacute;canismes qui sous-tendent la fonction motrice, qui pourrait s&#39;appuyer sur les processus dynamiques et illustrent bien la n&eacute;cessit&eacute; de s&#39;&eacute;loigner d&#39;une vision statique des structures cellulaires.

&Eacute;change des pi&egrave;ces : mise au point du moteur flagellaire pour s&#39;adapter aux conditions.

Viele zellul&auml;re Aktivit&auml;ten werden durch komplexe Protein Maschinen angetrieben. Durch Messung des Verhaltens von fluoreszierenden Proteins Fusionen in Echtzeit in lebenden Zellen ist deutlich geworden, dass viele dieser komplexe sind nicht festgelegt, sondern sind dynamisch. In gewisser Weise k&ouml;nnte dies, z. B. f&uuml;r Zellteilung-komplexe, rechnen wie definierenden Mid-cell an Wachstum und Zellzyklus kn&uuml;pft, aber vielleicht mehr als eine &Uuml;berraschung mit einer komplexen verankerten Maschine wie der bakteriellen Flimmerband Motor kommt. Die Annahme war, dass wenn es intakt bleibt. Die Dynamik dieser Struktur ist jedoch stark in zwei Handschriften in dieser Ausgabe von Molekulare Mikrobiologie unterst&uuml;tzt. Die Stator-Einheiten bilden einen Peptioglycan verankert-Ring um den Rotor, Generieren von Drehmoment als Reaktion auf die Ion-Motor abzuziehen klar wenn sich Bedingungen &auml;ndern. Das treibende Ion zeigt in beiden Engagement des Stators am Rotor und die Auswahl des Typs der Statoreinheit wichtig sein. Diese neuen Ergebnisse geben einen Einblick in die Mechanismen Motorik, die m&ouml;glicherweise auf dynamische Prozesse verlassen, und verdeutlichen die Notwendigkeit, sich von eine statische Ansicht von Zellstrukturen.

Austausch-Teile: Optimierung des Flimmerband Motors an die Bedingungen angepasst.

Molte attivit&agrave; cellulari sono azionate da macchine di proteine complesse. Misurando il comportamento delle fusioni di proteina fluorescente in tempo reale nelle cellule viventi &egrave; diventato evidente che molti di questi complessi non sono fissi, ma sono dinamici. In una certa misura questo prevedibile, per esempio, per divisione cellulare complessi, come mid-cell definizione &egrave; legata alla crescita e ciclo cellulare, ma forse proviene come pi&ugrave; di una sorpresa con una macchina complessa ancorata come il motore flagellari batterica. L&#39;ipotesi &egrave; stata che una volta fatto rimane intatto. Tuttavia, la dinamica di questa struttura &egrave; fortemente sostenuta in due manoscritti in questo numero di microbiologia molecolare. Le unit&agrave; di statore che formano un anello peptioglycan ancorata intorno al rotore, generando la coppia in risposta alla forza motrice dello ione, disinnestare chiaramente quando le condizioni cambiano. Lo ione trainante &egrave; dimostrato di essere importante in entrambi impegno dello statore al rotore e la selezione del tipo di unit&agrave; di statore. Questi nuovi risultati forniscono un&#39;analisi approfondita dei meccanismi sottostanti la funzione motoria, che potrebbe contare su processi dinamici e illustrare chiaramente la necessit&agrave; di allontanarsi da una visione statica delle strutture cellulari.

Parti exchange: tuning del motore per adattarsi alle condizioni flagellari.

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Muchas actividades celulares son conducidas por m&aacute;quinas complejas de prote&iacute;nas. Midiendo el comportamiento de fusiones de la prote&iacute;na fluorescente en tiempo real en las c&eacute;lulas vivas se ha hecho evidente que muchos de estos complejos no son fijos, pero son din&aacute;micos. Hasta cierto punto esto cabr&iacute;a esperar, por ejemplo, para los complejos de la divisi&oacute;n celular, como define mid-cell est&aacute; relacionado con el crecimiento y el ciclo celular, pero tal vez viene como m&aacute;s de una sorpresa con una compleja m&aacute;quina anclada como el motor flagelar bacteriano. La Asunci&oacute;n ha sido que una vez hecho permanece intacto. Sin embargo, la din&aacute;mica de esta estructura se apoya fuertemente en dos manuscritos en esta edici&oacute;n de Microbiolog&iacute;a Molecular. Las unidades de estator que forman un anillo de peptioglycan anclado en el rotor, generando par en respuesta a la fuerza motriz de ion, claramente quitar&aacute;n cuando cambian las condiciones. El ion de conducci&oacute;n se muestra importante en tanto compromiso del estator del rotor y la selecci&oacute;n del tipo de unidad de estator. Estos nuevos resultados permiten conocer los mecanismos subyacentes de la funci&oacute;n motora, que puede confiar en procesos din&aacute;micos e ilustran claramente la necesidad de alejarse de una visi&oacute;n est&aacute;tica de las estructuras celulares.

Intercambio de piezas: ajuste el motor flagelar para adaptarse a las condiciones.

&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x751F;&#x7269;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x7531; multiprotein &#x914D;&#x5408;&#x6267;&#x884C;&#x3002;&#x4F20;&#x7EDF;&#x4E0A;&#x79F0;&#x4E3A;&#x9759;&#x6001;&#x5B9E;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x636E;&#x73B0;&#x5728;&#x65B0;&#x5174;&#x53CA;&#x5176;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x3001; &#x4E0D;&#x65AD;&#x4EA4;&#x6D41;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C60;&#x3002;&#x7EC6;&#x83CC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7535;&#x673A;&#x5305;&#x542B;&#x5927;&#x7EA6; 13 &#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x5236;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x7814;&#x7A76;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x5B50;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x7531;&#x73AF;&#x63A8;&#x8FDB;&#x4E2D;&#x592E;&#x8F6C;&#x5B50;&#x7684;&#x5B9A;&#x5B50;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x901A;&#x8FC7;&#x8DE8;&#x819C;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x91CF;&#x4F9B;&#x7535;&#x3002;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7535;&#x673A;&#x5F00;&#x5173;&#x65B9;&#x5411;&#x968F;&#x673A;&#x54CD;&#x5E94;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x8F6C;&#x5B50;&#x5F00;&#x5173;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7279;&#x5730;&#x5219;&#x53CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x3002;&#x5F88;&#x591A;&#x95FB;&#x540D;&#x7684;&#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x9759;&#x6001;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6211;&#x4EEC;&#x624D;&#x521A;&#x521A;&#x5F00;&#x59CB;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x5404;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x8BA1;&#x91CF;&#x5B66;&#x548C;&#x80F6;&#x7247;&#x4E2D;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x7684;&#x97AD;&#x6BDB;&#x9A6C;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x672F;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x8868;&#x8FBE; genomically &#x7F16;&#x7801;&#x7684; YPet &#x884D;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x5C42;&#x9762;&#x7684;&#x80F6;&#x7247;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7535;&#x673A;&#x6BCF;&#x5927;&#x7EA6; 30 &#x80F6;&#x7247;&#x5206;&#x5B50;&#x5B58;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x79BB;&#x6563;&#x79CD;&#x7FA4;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E0E;&#x7535;&#x673A;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x7684;&#x968F;&#x673A;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x7D27;&#x5BC6;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6B64;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x7684;&#x80F6;&#x7247;&#x5206;&#x5B50;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5219;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x7535;&#x52A8;&#x673A;&#x5207;&#x6362;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x65B9;&#x9762;&#x7EC6;&#x83CC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7535;&#x673A;&#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x539F;&#x578B;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x5927;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5468;&#x8F6C;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x5927;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

&#x7EC6;&#x83CC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x5207;&#x6362;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Most biological processes are performed by multiprotein complexes. Traditionally described as static entities, evidence is now emerging that their components can be highly dynamic, exchanging constantly with cellular pools. The bacterial flagellar motor contains approximately 13 different proteins and provides an ideal system to study functional molecular complexes. It is powered by transmembrane ion flux through a ring of stator complexes that push on a central rotor. The Escherichia coli motor switches direction stochastically in response to binding of the response regulator CheY to the rotor switch component FliM. Much is known of the static motor structure, but we are just beginning to understand the dynamics of its individual components. Here we measure the stoichiometry and turnover of FliM in functioning flagellar motors, by using high-resolution fluorescence microscopy of E. coli expressing genomically encoded YPet derivatives of FliM at physiological levels. We show that the approximately 30 FliM molecules per motor exist in two discrete populations, one tightly associated with the motor and the other undergoing stochastic turnover. This turnover of FliM molecules depends on the presence of active CheY, suggesting a potential role in the process of motor switching. In many ways the bacterial flagellar motor is as an archetype macromolecular assembly, and our results may have further implications for the functional relevance of protein turnover in other large molecular complexes.

Signal-dependent turnover of the bacterial flagellar switch protein FliM.

La plupart des processus biologiques sont r&#xE9;alis&#xE9;es par des complexes multiprot&#xE9;iques. Traditionnellement d&#xE9;crit comme des entit&#xE9;s statiques, la preuve est en train d&#x26;#39;&#xE9;merger que leurs composants peuvent &#xEA;tre tr&#xE8;s dynamique, d&#x26;#39;&#xE9;changer en permanence avec des piscines cellulaires. Le moteur flagellaire des bact&#xE9;ries contient environ 13 prot&#xE9;ines diff&#xE9;rentes et fournit un syst&#xE8;me id&#xE9;al pour l&#x26;#39;&#xE9;tude fonctionnelle des complexes mol&#xE9;culaires. Il est aliment&#xE9; par un flux d&#x26;#39;ions transmembranaire &#xE0; travers un anneau de stator complexes qui poussent sur un rotor central. Le moteur Escherichia coli commute la direction stochastiquement en r&#xE9;ponse &#xE0; la liaison du CheY r&#xE9;gulateur de r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;ment de commutation Flim rotor. Une grande partie est connue de la structure du moteur statique, mais nous commen&#xE7;ons tout juste &#xE0; comprendre la dynamique de ses composants individuels. Ici, nous mesurons la stoechiom&#xE9;trie et le chiffre d&#x26;#39;affaires de Flim dans le fonctionnement des moteurs flagellaires, en utilisant &#xE0; haute r&#xE9;solution de la microscopie &#xE0; fluorescence E. coli exprimant d&#xE9;riv&#xE9;s YPET g&#xE9;nomiquement cod&#xE9;es de Flim &#xE0; des niveaux physiologiques. Nous montrons que les mol&#xE9;cules Flim environ 30 par moteur existe en deux populations distinctes, l&#x26;#39;une associ&#xE9;e &#xE9;troitement avec le moteur et le chiffre d&#x26;#39;affaires stochastique autre objet. Ce chiffre d&#x26;#39;affaires de mol&#xE9;cules Flim d&#xE9;pend de la pr&#xE9;sence de CheY actif, ce qui sugg&#xE8;re un r&#xF4;le potentiel dans le processus de commutation de moteur. &#xC0; bien des &#xE9;gards le moteur flagellaire des bact&#xE9;ries est aussi un assemblage macromol&#xE9;culaire arch&#xE9;type, et nos r&#xE9;sultats peuvent avoir des implications pour la pertinence fonctionnelle de renouvellement des prot&#xE9;ines dans les autres grands complexes mol&#xE9;culaires.

Signal-d&#xE9;pendante Chiffre d&#x26;#39;affaires du Flim bact&#xE9;rienne commutateur flagellaire prot&#xE9;ines

Die meisten biologischen Prozesse werden von multiprotein komplexe ausgef&uuml;hrt. Traditionell als statische Entit&auml;ten beschrieben, entsteht Beweise jetzt, dass ihre Komponenten hochdynamische, Austausch von st&auml;ndig mit zellul&auml;ren Pools sein k&ouml;nnen. Bakterielle Flimmerband Motor enth&auml;lt ca. 13 verschiedene Proteine und stellt ein ideales System, um funktionelle molekulare Komplexe zu studieren. Es ist powered by Transmembran Ionen-Fluss durch einen Ring von Stator-komplexe, die auf einem zentralen Rotor schieben. Der Escherichia-coli-Motor schaltet Richtung an die Rotor-Switch-Komponente FliM stochastisch als Reaktion auf die Bindung des Reglers Antwort CheY. Der statische motor Struktur ist wenig bekannt, aber wir stehen erst am Anfang, die Dynamik seiner einzelnen Komponenten zu verstehen. Hier messen wir die St&ouml;chiometrie und Umsatz von FliM in funktionierende Flimmerband Motoren, mit hochaufl&ouml;sende Fluoreszenzmikroskopie von E. Coli genomically codierten YPet Derivate flim auf physiologischer Ebene zum Ausdruck zu bringen. Wir zeigen, dass die etwa 30 FliM-Molek&uuml;le pro Motor in zwei getrennte Populationen, einer eng verbunden mit dem Motor und der andere eine stochastische Umsatz vorhanden. Dieser Umsatz von FliM Molek&uuml;le h&auml;ngt das Vorhandensein von aktiven CheY, was auf eine m&ouml;gliche Rolle im Prozess motor wechseln. Der bakterielle Flimmerband Motor ist in vielerlei Hinsicht als Archetyp Makromolekulare Assembly, und unsere Ergebnisse m&ouml;glicherweise weitere Auswirkungen auf die funktionelle Relevanz der Protein-Umsatz in andere gro&szlig;e molekulare Komplexe.

Signal-abh&auml;ngige Umsatz von der bakteriellen Flimmerband wechseln Protein FliM.

La maggior parte dei processi biologici vengono eseguiti dai complessi multiproteici. Tradizionalmente descritto come entit&agrave; statiche, prove ora sta emergendo che i componenti possono essere altamente dinamici, scambiando costantemente con piscine cellulare. Il motore flagellari batterico contiene circa 13 proteine differenti e fornisce un sistema ideale per lo studio funzionale molecolari complessi. &Egrave; alimentato dal flusso di ioni transmembrana attraverso un anello di complessi di statore che spingere su un rotore centrale. Escherichia coli motore interruttori direzione casualmente in risposta al grippaggio del regolatore di risposta CheY al componente interruttore rotore FliM. Si sa molto della struttura motore statica, ma stiamo appena cominciando a comprendere le dinamiche dei suoi singoli componenti. Qui misuriamo la stechiometria e un fatturato di FliM in funzionamento motori flagellari, utilizzando la microscopia di fluorescenza ad alta risoluzione di e. coli che esprimono genomically codificati YPet derivati di FliM a livelli fisiologici. Ci mostra che le molecole di FliM circa 30 per motore esistano in due popolazioni discrete, uno strettamente connesso con il motore e altri fatturato stocastico in corso. Questo fatturato di FliM molecole dipende dalla presenza di CheY attivo, suggerendo un ruolo potenziale in fase di accensione del motore. In molti modi il motore flagellari batterico &egrave; come un assemblaggio macromolecolare archetipo, e i nostri risultati possono avere ulteriori implicazioni per la rilevanza funzionale del fatturato della proteina in altri grandi complessi molecolari.

Segnale-dipendente fatturato il batterico flagellari passare proteine FliM.

&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306B;&#x9759;&#x7684;&#x306A;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x4ECA;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5E38;&#x306B;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52D5;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7D30;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;13&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x62BC;&#x3057;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30BF;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8CAB;&#x901A;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;FLIM&#x306B;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5D14;&#x4F1A;&#x9577;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x78BA;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x9759;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5358;&#x306B;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3057;&#x59CB;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;FLIM&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;YPet&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;FLIM&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x91CF;&#x8AD6;&#x3068;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x3054;&#x3068;&#x306B;&#x7D04;30 FLIM&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;&#x306A;&#x96C6;&#x56E3;&#x3001;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x78BA;&#x7387;&#x306E;&#x96E2;&#x8077;&#x7387;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; FLIM&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x5D14;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x70B9;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x578B;&#x306E;&#x9AD8;&#x5206;&#x5B50;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x56DE;&#x8EE2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;FLIM&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x58F2;&#x4E0A;&#x9AD8;

&#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; multiprotein &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC801; &#xC5D4;&#xD130;&#xD2F0;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85;, &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC2E0;&#xD765; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD480;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD50;&#xD658; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xADE0; flagellar &#xBAA8;&#xD130; &#xC57D; 13 &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xBD84;&#xC790; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC774;&#xC628; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xC911;&#xC559; &#xD68C;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xACE0;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBAA8;&#xD130;&#xB85C; &#xD130; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; Flim&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; Chey&#xC758;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; stochastically &#xBC29;&#xD5A5; &#xC804;&#xD658;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC815;&#xC801; &#xBAA8;&#xD130; &#xAD6C;&#xC870; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xBD80;&#xD488;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; FliM &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; genomically &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; YPet &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; stoichiometry &#xBC0F; &#xC791;&#xB3D9; flagellar &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; Flim&#xC758; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC744; &#xCE21;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xD130; &#xB2F9; &#xC57D; 30 FliM &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xD130;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xACAA;&#xACE0; stochastic &#xD68C;&#xC804;&#xC728; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. FliM &#xBD84;&#xC790;&#xC758;&#xC774; &#xD68C;&#xC804;&#xC728; &#xBAA8;&#xD130; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; &#xC81C;&#xC548; &#xD65C;&#xC131; Chey&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1; &#xACE0;&#xBD84;&#xC790; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC;&#xC640; &#xC138;&#xADE0; flagellar &#xBAA8;&#xD130; &#xC774;&#xBA70; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCD94;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8; &#xB2E4;&#xB978; &#xD070; &#xBD84;&#xC790; &#xB2E8;&#xC9C0;.

Flagellar &#xC138;&#xADE0;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xC885;&#xC18D; &#xD68C;&#xC804;&#xC728; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; FliM &#xC804;&#xD658;.

Mayor&#xED;a de los procesos biol&#xF3;gicos se llevan a cabo por los complejos multiproteicos. Tradicionalmente se describe como entidades est&#xE1;ticas, la evidencia est&#xE1; emergiendo ahora que sus componentes pueden ser altamente din&#xE1;mico, en constante intercambio con piscinas celulares. El motor flagelar bacteriana contiene aproximadamente 13 prote&#xED;nas diferentes y proporciona un sistema ideal para estudiar los complejos moleculares funcionales. Se alimenta por el flujo transmembrana de iones a trav&#xE9;s de un anillo de complejos del estator que empujan sobre un rotor central. El motor de Escherichia coli cambia estoc&#xE1;sticamente direcci&#xF3;n en respuesta a la uni&#xF3;n del CheY regulador de respuesta a la FliM interruptor componente del rotor. Se sabe mucho de la estructura del motor est&#xE1;tico, sino que estamos empezando a comprender la din&#xE1;mica de sus componentes individuales. Aqu&#xED; se mide la estequiometr&#xED;a y la rotaci&#xF3;n de los motores en funcionamiento FliM flagelos, mediante el uso de alta resoluci&#xF3;n de la microscop&#xED;a de fluorescencia de E. coli que expresan gen&#xF3;micamente codificados derivados YPet de FliM a niveles fisiol&#xF3;gicos. Se demuestra que las mol&#xE9;culas de Fli aproximadamente el 30 por motor de existir en dos poblaciones diferenciadas, una fuerza asociada con el motor y el otro el volumen de negocios sometidos a estoc&#xE1;stica. Esta rotaci&#xF3;n de las mol&#xE9;culas de Fli depende de la presencia activa de CheY, lo que sugiere un posible papel en el proceso de cambio de motor. En muchos sentidos, el motor flagelar bacteriano es como un ensamblaje macromolecular arquetipo, y nuestros resultados pueden tener implicaciones mayores para la relevancia funcional de la facturaci&#xF3;n de prote&#xED;nas en otros grandes complejos moleculares.

Funci&#xF3;n de las se&#xF1;ales El volumen de negocios de la prote&#xED;na bacteriana FliM flagelar interruptor

&#x6700;&#x8FD1;&#x5DF2;&#x53D1;&#x73B0;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x65CB;&#x8F6C;&#x7535;&#x673A;&#x8981;&#x6BD4;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x8BA4;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4EA4;&#x6362;&#x4E0E;&#x6C60;&#x86CB;&#x767D;&#x819C;/&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5173;&#x952E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x66F4;&#x6709;&#x6D3B;&#x529B;&#x3002;&#x4E5F;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#x9664;&#x4E86;&#x7B80;&#x5355;&#x5730;&#x54CD;&#x5E94;&#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x53D7;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5207;&#x6362;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x65CB;&#x8F6C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x51CF;&#x7F13;&#x6216;&#x8005;&#x505C;&#x6B62;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x79BB;&#x5408;&#x5668;&#x6216;&#x5236;&#x52A8;&#x5668;&#xFF0C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4ECE;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC6;&#x83CC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7535;&#x673A;&#x7684;&#x65CB;&#x8F6C;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

The proteins that make up the bacterial flagellar rotary motor have recently been shown to be more dynamic than previously thought, with some key proteins exchanging with pools of proteins in the membrane/cytoplasm. It has also become clear that in addition to simply switching in response to chemosensory signals, the rotation of the bacterial flagellar motor can be slowed or stopped, using a clutch or a brake, by signals from metabolism and growth state.

Protein dynamics and mechanisms controlling the rotational behaviour of the bacterial flagellar motor.

Les prot&eacute;ines qui composent le rotary flagelle bact&eacute;rien moteurs ont r&eacute;cemment d&eacute;montr&eacute;s d&#39;&ecirc;tre plus dynamique que l&#39;on croyait, avec certaines prot&eacute;ines cl&eacute;s en &eacute;changeant avec des piscines de prot&eacute;ines dans la membrane/cytoplasme. Il est &eacute;galement &eacute;vident qu&#39;en plus de passer simplement en r&eacute;ponse &agrave; des signaux chimiosensoriels, la rotation du moteur flagellaire bact&eacute;rienne peut &ecirc;tre ralentie ou arr&ecirc;t&eacute;e, &agrave; l&#39;aide d&#39;un embrayage ou un frein, en signaux d&#39;&eacute;tat de croissance et le m&eacute;tabolisme.

Dynamique des prot&eacute;ines et des m&eacute;canismes qui contr&ocirc;lent le comportement de rotation du moteur flagellaire bact&eacute;rien.

Die Proteine, aus denen die bakterielle Flimmerband Rotary motor wurden vor kurzem gezeigt, dynamischer als bisher angenommen, mit einige wichtige Proteine, die Austausch mit Pools Proteine in der Membran/Zytoplasma zu sein. Ist auch klar geworden, da&szlig; neben einfach als Reaktion auf chemosensory Signale schalten, die Drehrichtung des bakteriellen Flimmerband Motors verlangsamt oder gestoppt werden kann, signalisiert mit einer Kupplung oder Bremse, vom Stoffwechsel und Wachstum Zustand.

Protein-Dynamik und Mechanismen, die Steuerung des rotatorischen Verhaltens des bakteriellen Flimmerband Motors.

Le proteine che compongono il rotary flagellari batterica motore hanno recentemente dimostrate di essere pi&ugrave; dinamico di quanto si pensasse, con alcune proteine chiave lo scambio con piscine delle proteine di membrana/citoplasma. &Egrave; anche diventato chiaro che oltre alla commutazione semplicemente in risposta a segnali chemosensory, la rotazione del motore flagellari batterica pu&ograve; essere rallentata o fermata, utilizzando una frizione o un freno, di segnali dal metabolismo e la crescita dello stato.

Proteina dinamiche e meccanismi di controllo del comportamento rotazionale del motore flagellari batterico.

&#x7D30;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BF;&#x30EA;&#x30FC;&#x307E;&#x3067;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4F5C;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x819C;/&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3067;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x4EE5;&#x524D;&#x601D;&#x3063;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x52D5;&#x7684;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x8FD1;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5358;&#x306B;&#x5316;&#x5B66;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6B62;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x308A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AD;&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x304B;&#x3089;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x7D30;&#x83CC;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3002;

&#xCD5C;&#xADFC; &#xBAA8;&#xD130; &#xC138;&#xADE0; flagellar &#xB85C;&#xD0C0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9C9;/&#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC6C5;&#xB369;&#xC774;&#xC640; &#xAD50;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD588;&#xB358; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB3D9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; chemosensory &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE6D; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC138;&#xADE0; flagellar &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xC218; &#xB454;&#xD654; &#xB610;&#xB294; &#xC911;&#xC9C0; &#xCDE8;&#xC18C; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;, &#xD074;&#xB7EC;&#xCE58; &#xB610;&#xB294; &#xBE0C;&#xB808;&#xC774;&#xD06C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xC131;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC5ED;&#xD559; &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0; flagellar &#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

Las prote&iacute;nas que conforman el rotary flagelar bacteriano motores recientemente han demostrado ser m&aacute;s din&aacute;mico que se pensaba, con algunas prote&iacute;nas claves intercambiando con piscinas de prote&iacute;nas en la membrana/citoplasma. Tambi&eacute;n ha quedado claro que adem&aacute;s de simplemente cambiar en respuesta a se&ntilde;ales quimiosensoriales, la rotaci&oacute;n del motor flagelar bacteriano puede ser disminuida o detenida, mediante un embrague o freno, por se&ntilde;ales de estado de metabolismo y crecimiento.

Nicolas Delalez

Physics

University of Oxford

Visualizing Single Molecular Complexes In Vivo Using Advanced Fluorescence Microscopy

Nicolas Delalez

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University of Oxford

Visualizing Single Molecular Complexes In Vivo Using Advanced Fluorescence Microscopy

Physics