On-Plant Method to Deliver Dye or Biomolecules Using VACNFs in a Rigid Substrate

Entfernen Sie zunächst den Fotolack von den VACNFs, indem Sie ihn fünf Minuten lang mit 100 % Aceton waschen, gefolgt von einer fünfminütigen Wäsche mit 100 % IPA und dann fünf Minuten lang mit doppelt destilliertem Wasser. Legen Sie dann das Pflanzengewebe, das aufgespießt werden soll, zur Unterstützung auf eine harte Oberfläche. Geben Sie ein Mikroliter Farbstofftröpfchen auf die Oberfläche des Pflanzengewebes.

Platzieren Sie einen VACNF-Chip mit einem starren Substrat auf der Oberseite des Tröpfchens, wobei die Fasern so ausgerichtet sind, dass sie mit dem Tröpfchen in Kontakt kommen. Klopfen Sie mit der flachen Seite einer Pinzette auf den Chip und markieren Sie den Bereich der Pflanze, mit dem der Chip in Berührung gekommen ist, mit einem weichen Marker. Entfernen Sie die VACNF-Chips nach der Lieferung.

Wiederholen Sie diese Schritte für Steuerelemente, z. B. das Auftragen von Farbstoff auf die faserlose Seite einer Folie, die Verwendung der Folie ohne Farbstoff und die Verwendung der faserlosen Seite einer Folie. Lagern Sie intakte Pflanzen oder entfernte Pflanzenorgane in feuchten Kammern unter langen Tagesbedingungen. Verwenden Sie für entfernte Organe eine Petrischale aus Kunststoff mit nassen Papiertüchern.

Mit dieser Methode wurde der Fluorescein-Farbstoff an die Arabidopsis-Blätter abgegeben. Bilder, die zu verschiedenen Zeitpunkten aufgenommen wurden, zeigten, dass der Fluorescein-Farbstoff unmittelbar nach der Entbindung beobachtet wurde. In ähnlicher Weise wurde die Verabreichung eines Plasmids, das gelb fluoreszierendes Protein enthielt, in Arabidopsis-Blättern erreicht.