Zu Beginn legen Sie eine acht bis zehn Wochen anästhesierte schwarze C57-Maus mit sechs Männchen auf die Operationsbank. Ziehen Sie mit einer stumpfen Pinzette die Zunge heraus und halten Sie sie mit den Fingern fest. Führen Sie ein Laryngoskop in den Mund ein und visualisieren Sie das Stimmband.
Stabilisieren Sie das Mauskinn auf dem Laryngoskop und halten Sie den 20-Gauge-Katheter intravenös oder intravenös mit einem eingeführten Führungsdraht fest. Führen Sie dann den Führungsdraht leicht in das Stimmband ein und schieben Sie den 20-Gauge-IV-Katheter langsam in die Luftröhre, bis sein Flügelteil auf gleicher Höhe mit der Nasenspitze ist. Sobald die Maus an das Beatmungsgerät angeschlossen ist, halten Sie sie in einer seitlichen Position mit dem rechten Schläfenbereich nach oben.
Halten Sie die rektale Temperatur mit einem Heizkissen und einer Wärmelampe bei 37 Grad Celsius. Nachdem Sie den Jochbogen lokalisiert und den Schläfenmuskel geschnitten haben, verwenden Sie zwei Pinzetten, um den darunter liegenden Jochbogen zu präparieren und das Gelenk zwischen Oberkiefer und Jochbein freizulegen. Schneiden Sie dann mit einer Schere einen drei Millimeter großen Teil des Jochbogens ab und entfernen Sie ihn.
Zum Schluss trennst du den Kaumuskel von der Schädelbasis. Positionieren Sie vier kleine Retraktoren in verschiedene Richtungen und legen Sie die Schädelbasis frei, wobei ein Retraktor die Äste des Trigeminusnervs seitlich zieht. Tragen Sie einen Kochsalztropfen auf den Schädel oberhalb der mittleren Hirnarterie oder des MCA-Stammes und proximal des rhinalen Kortexastes auf.
Verwende eine elektrische Schleifmaschine, um den Schädel zu verdünnen, bis ein kleiner Bruch sichtbar ist. Und mit der Spitze der Pinzette den dünnen Schädel entfernen. Lege eine einsträngige Schlaufe aus schwarzer, geflochtener Seide auf den MCA.
Setzen Sie dann einen 8-O ein mikrochirurgische Nadel, um den MCA-Stamm anzuheben und die Naht unter der Nadel zu binden, wobei die beiden Enden der Nadel auf dem Knoten der Seidenfadenschlaufe belassen werden. Bei einem vorübergehenden Verschluss der mittleren Hirnarterie (MCAO) ziehen Sie den Seidenfadenknoten unter der Nadel leicht fest, um den arteriellen Blutfluss zu blockieren, der den Beginn des MCAO darstellt. Verwenden Sie die Pinzette, um die Naht zu halten, und entfernen Sie langsam die Nadel am Ende der Ischämie.
Die Laser-Speckle-Kontrast-Bildgebung bestätigte die reduzierte Blutversorgung im rechten MCA. Bei transientem MCAO nach Nahtentfernung war die zerebrale Durchblutungsreperfusion offensichtlich und verbesserte sich nach 24 Stunden weiter. Die TTC-Färbung des Gehirns nach 24 Stunden Schlaganfall zeigte die Bildung von Infarktgewebe sowohl im kortikalen als auch im lateralen Striatum bei jungen und älteren Mäusen.
Die Infarktgröße war im Vergleich zum Filament MCAO moderat.
