Halten Sie zunächst den Kopf der euthanasierten neugeborenen Mäuse sicher an Ort und Stelle. Öffnen Sie mit einer Mikro-OP-Schere die Kopfhaut entlang der sagittalen Naht. Trennen und immobilisieren Sie dann die Kopfhaut bilateral mit den Fingern.
Verwende eine Schere, um den Schädel zu durchtrennen und nach vorne zu drehen, um an den Schädel zu gelangen. Verwenden Sie einen kleinen Periostlifter, um das Gehirn zu extrahieren, und verwenden Sie dann die Spitze der Schere, um das Gehirn vorsichtig abzukratzen, um die Schädelbasis freizulegen. Untersuchen Sie nun die bilateralen Schläfenknochen an der Schädelbasis.
Verwende eine Schere, um die Schädelbasis entlang der Mittellinie einzuschneiden. Kratzen Sie dann die Haut ab und entfernen Sie unnötigen Knochen. Konservieren und übertragen Sie die Schläfenknochen in sterile 35-Millimeter-Petrischalen, die mit frischem HBSS gefüllt sind.
Verwenden Sie als Nächstes eine Pinzette mit 5 Zahlen, um die Bola und das umgebende Gewebe aus dem petrosen Teil des Schläfenbeins zu entfernen. Halten Sie die Pinzette mit einer Hand fest, um den halbkreisförmigen Teil des Schläfenbeins zu stabilisieren. Mit der anderen Hand führen Sie die untere Spitze der Pinzette in die runde Fensternische ein und trennen so den seitlichen Knochen der Cochlea von der Schuppe des Vestibulums.
Entfernen Sie vorsichtig den petrosen Teil des Schläfenbeins, ohne das Epithel des Organs Corti zu berühren. Lösen und extrahieren Sie dann sorgfältig das knöcherne Labyrinth der Cochlea, beginnend vom basalen bis zum apikalen Ende. Mit einer 5 züngigen Pinzette das sensorische Epithel des Corti-Organs vorsichtig vom Modiolus isolieren.
Als nächstes hältst du das Spiralband mit einer Mikrozange fest und trennst es vorsichtig von der Stria vascularis. Das saubere Hörepithel wird mit einer 200-Mikroliter-Pipette in eine drei Millimeter große sterile Kulturschale mit HBSS überführt. Legen Sie das isolierte Hörepithel für die nachfolgenden Zubereitungsschritte in eine 100 Millimeter sterile, mit HBSS gefüllte Petrischale.
