Unterstützt durch NIH R01 HL74082, der Hartwell-Stiftung und der Focused Ultrasound Surgery Foundation.

1. Mikroblasen Produktion <ol><li> Zur Vorbereitung Albumin Mikrobläschen (MBS), setzen Sie eine 1% ige Lösung von Albumin in physiologischer Kochsalzlösung in einen Kolben mit einer Decke aus Gas (Octafluorpropan) oberhalb der wässrigen Phase. Kurz beschallen die Lösung (30 sec) mit einem Ultraschall-Desintegrator mit einem erweiterten ½ &quot;Titan-Sonde ausgestattet. Diese Formulierung ist ähnlich Optison (GE Heathcare), die in einem Konzentrationsbereich von 0,5 bis 1,2 x 10 9 MB / ml versehen ist. Bestimmen Sie bedeuten MB Durchmesser mit einer Multisizer Coulter Counter. Das Albumin bedeuten MB Durchmesser in dieser Studie verwendet wurde 1.93um ± 1.63um. </li><li> Zur Herstellung Lipid MBs, bereiten eine wässrige Dispersion von 1 mg / ml Polyethylenglykol-40-stearat (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) und 2 mg / ml Distearoyl Phosphatidylcholin (Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL) und sonciate wie zuvor beschrieben (1,1) mit decafluorobutane Gas. Bestimmen Sie bedeuten MB Durchmesser mit einer Multisizer Coulter Counter. Die mittlere Lipid MB Durchmesser in dieser Studie verwendet wurde 2.01um ± 1.29um. </li></ol> 2. Nanopartikel Fabrication <ol><li> Diese Methoden wurden von angepassten Wasser-in-Öl-in-Wasser-Emulsion Lösungsmittelverdampfung Technik, die von Davda (2002) und Chappell (2008) beschrieben. </li><li> Bereiten Sie eine 2% Poly (vinylalkohol) PVA-Lösung durch Auflösen von 20 g PVA in 1000 ml deionisiertem Wasser (DI). Anschließend Lösung voll und ganz auf einer Rührplatte über Nacht auflösen. Centrifuge Lösung bei 1000 rpm für 10 Minuten und Filter mit einer 0,22 &amp;mgr; m Sterilfilter zu entfernen restliche ungelöste PVA. </li><li> Zur Herstellung von Rinderserumalbumin (BSA) geladen Poly (Milchsäure-co-Glykolsäure) (PLAGA)-Nanopartikel (NPs), lösen 180mg der nicht begrenzten 85:15 PLAGA in 6ml Methylenchlorid (MC) in einem Glasszintillationsröhrchen. Vortex die MC / PLAGA Lösung für 2 Minuten. </li><li> Lösen gewünschte Nutzlast (15mg BSA) in 1,5 ml PBS. Fügen Sie die PBS / BSA-Lösung in zwei Teile, die PLAGA / MC-Lösung mit Intervallschaltung Vortexen. Platzieren Lösung auf Eis für 5 Minuten und beschallen zu 45W für 120 Sekunden. </li><li> Fügen Sie die MC / PLAGA / Nutzlast / PBS Lösung 24ml von 2% PVA, in zwei Teile mit mittleren Vortexen. </li><li> Platzieren Sie die Lösung auf Eis für 5 Minuten und beschallen zu 45W für 120. </li><li> Rühren Sie die NP-Emulsion für 12 Stunden auf einer Rührplatte in einem Abzug der Verdunstung von MC und NP stabilisieren kann. </li><li> Die Suspension für 25 Minuten bei 20.000 rpm bei 4 ° C zweimal, um NPs zu isolieren und zu entfernen Rest PVA. Das Pellet in 8ml von DI-Wasser und Zentrifuge für 10 Minuten bei 1000 rmp bei 4 ° C, um die 100nm Bevölkerung von NPs zu isolieren. </li><li> Isolieren Sie den Überstand und Blitz einfrieren bei -80 ° C lyophilisiert die gefrorene Probe für 48 Stunden. Lagern Sie die lyophilisierte Partikel in einem Exsikkator bei -80 ° C bis zum Zeitpunkt der Nutzung. </li></ol> 3. Composite-Delivery Vehicle Fabrication (Protokoll vom VisEn Chemie Hinweise angepasst) <ol><li> Umwandlung von VivoTag680 zu Carboxy Oberfläche Funktionalität <ol><li> Kombinieren Sie eine Durchstechflasche VivoTag680 mit 50 ul 1,0 M HEPES, pH 7 und Bernsteinsäureanhydrid (2,5 mg, 25 ĩmol) in 25 ul DMSO. Dann werden 50 ul von 1,0 M NaOH zu dieser Lösung gründlich gemischt; ermöglichen Lösung für 2 Stunden bei Raumtemperatur vor Licht geschützt zu reagieren. Purify Partikel mit Bio-Rad BioGel (P100, Medium) Elution mit 0,1 M MES-Puffer, pH 6,0. Sammeln Sie die grüne Band. </li></ol></li><li> Die Aktivierung der Carboxy-modifizierte VivoTag680 <ol><li> Kombinieren Sie Carboxy-modifizierte VivoTag680 in 0,1 M MES-Puffer, pH 6 erhalten, mit 1 mg 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-Carbodiimid (EDC) und 2,2 mg N-Hydroxysulfosuccinimid (Sulfo-NHS). Nach 2 h bei Raumtemperatur reagieren. </li><li> Purify aktiviert Partikel von überschüssigem aktivierenden Agens (EDC) durch Gelfiltration unter Verwendung von Bio-Rad BioGel (P100, Medium) Elution mit 0,1 M MES-Puffer, pH 6,0 und sammeln die grünen Band. Unmittelbar Konjugat der aktivierten Partikel zu Amin-haltigen Molekülen (z. B. BSA-beladenen Nanopartikel). Lassen Sie die Lösung für 2 Stunden bei Raumtemperatur reagieren. Amine konjugierte NPs wurden aus mehr als EDC durch Zentrifugation bei 20.000 rpm für 60min bei 4 ° C, Abgießen des Überstandes nach Zentrifugation und Resuspendieren in 0,1 MES-Puffer gereinigt. </li></ol></li><li> Stoppen Sie hier, um VivoTag680 getaggt NPs für Drug-Delivery-Studien herzustellen. </li><li> Konjugation von Carboxy-modifizierten PLGA-BSA-VivoTag680 Nanopartikel (NP680) um Albumin Mikrobläschen <ol><li> Kombinieren Sie NP680 in 0,1 M MES-Puffer, pH 6 mit 1 mg 1-Ethyl-3-(3 dimethylaminopropyl)-Carbodiimid (EDC) und 2,2 mg N-Hydroxy-sulfosuccinimide (Sulfo-NHS) erhalten. Lassen Sie die Lösung für 1 Stunde bei Raumtemperatur reagieren. </li><li> Purify aktiviert Nanopartikel aus über EDC durch Zentrifugation bei 20.000 rpm für 60min bei 4 ° C, Abgießen des Überstandes nach Zentrifugation. Resuspendieren Nanopartikel in 0,1 MES-Puffer. </li><li> Wash Albumin MBs dreimal entgast PBS, um überschüssige BSA aus der Lösung zu entfernen. </li><li> Unmittelbar Konjugat der aktivierten Partikel zu Amin-haltigen Molekülen (z. B. Albumin Mikroblasen). Lassen NP680 Lösung für 2 Stunden bei Raumtemperatur reagieren. Purify NP680 konjugierte Mikrobläschen (MNCA) vom ungebundenen NP680s durch dreimaliges Waschen mit entgastem PBS. </li><li> Bestimmen Sie die Konzentration der MNCAs mit einem Coulter Counter. </li></ol></li></ol> 4. Tumor-Modell Alle Tierexperimente wurden in Übereinstimmung mit einem Tier-Protokoll von der University of Virginia Animal Care und Verwenden Committee genehmigt. <ol><li> C6 Giloma Ratte Tumor-Zelllinie wurde von Dr. Jason Sheehan von UVA (Charlottesville, VA) zur Verfügung gestellt. <ol><li> Cells Linie wurde getestet, um sicherzustellen Zellen wurden Mykoplasmen kostenlos. </li></ol></li><li> Pflegen Sie die Zelllinie in F-12K Nutrient Mixture mit 16% Pferdeserum, 3% fötalem Rinderserum (FBS) und 1% Pen-Strep (Gibco, USA) bei 37 ° C und 5% CO 2. Ergänzt </li><li> Impfen C57BLJ6/Rag1 Mäuse (Jackson) mit 3 x 10 6 C6 Giloma Tumorzellen in 300 ul PBS subkutan in die linke Hinterlauf aufgehängt. Lassen Tumor für 12 Tage wachsen, um einen maximalen Durchmesser von 8-10mm erreichen. </li></ol> 5. In Vivo Ultraschall-Anwendung <ol><li> Anesthetize Mäuse mit einer intraperitonealen (IP) Kombination Injektion von Ketamin-Hydrochlorid (60 mg / kg Körpergewicht) und Xylazin (0,1 mg / kg Körpergewicht) vor der Behandlung. </li><li> Bereiten Sie eine Wartung Betäubung von Ketamin-Hydrochlorid (20 mg / kg Körpergewicht) und Xylazin (0,3 mg / kg Körpergewicht). Verwalten, wie gebraucht. </li><li> Kanülieren die Schwanzvene jedes Tier für die intravenöse (IV) Verabreichung eines MB, MB / NP oder MNCA Lösung. </li><li> Tumor Perfusionsmessungen <ol><li> IV Infusion einer Lipid-MB-Lösung (1x10 8 MB ​​/ g Körpergewicht in 0,3 ml 0,9% iger Kochsalzlösung) mit einer Rate von 15μl/min mit einer kontinuierlichen Infusionspumpe (Harvard Apparatus PHD 2000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). </li><li> Ein Acuson Sequoia 512 Ultraschall-System (Siemens Medical Solutions, Mountain View, CA) mit einer 8 13 MHz linear 15L8 Sonde ausgerüstet war in dieser Studie verwendet, um den Kontrast verstärkt Tumorperfusion quantifizieren. Paar der 15L8-Sonde, um den Tumor mit einer Wasser-Ultraschall-Gel (Parker Laboratories Aquasonic 100; Parker Laboratories, Inc., Fairfield, NJ). Scan der Tumor in B-Mode, die beste Bildebene zu erhalten. </li><li> Im Gegensatz Pulssequenz (CPS)-Modus, erwerben einen kontinuierlichen Video-Capturing Mikrobläschen Signalintensität 5 Sekunden vor und 20 nach, die mit hoher Amplitude &quot;Burst&quot;-Puls bei einer Bildwiederholrate von 13Hz. Wiederholen Sie die Messungen in vier Bildebenen. </li><li> Warten Sie zehn Minuten an Albumin MBs einfließen und initiieren therapeutischen niederfrequenten Behandlung zu ermöglichen Lipid MBs aus dem Kreislauf zu löschen. </li></ol></li><li> Therapeutische Ultraschallbehandlung <ol><li> Zehn Minuten nach Tumorperfusion Messungen (5,3) Paar ein 0,75&#39;&#39;Durchmesser 1 MHz unfokussierten Wandler (A314S; Panametrics, Waltham, MA) auf die Haut über der Flanke Tumor. IV Infusion einer Albumin MB (1 x10 5 MB / g Körpergewicht in 0,3 ml 0,9% iger Kochsalzlösung), MB / NP (1 x10 5 MB / g und 0,2 ug NPs / g Körpergewicht in 0,3 ml 0,9% iger Kochsalzlösung) oder MNCA-Lösung (1 x10 5 MNCAs / g Körpergewicht in 0,3 ml 0,9% iger Kochsalzlösung). </li><li> Drug Delivery-Behandlung <ol><li> Insonate für 60 Minuten mit der &quot;1-Burst&quot;-Pulssequenz (5.4.2.2) während einer kontinuierlichen Infusion von NPs, eine Co-Injektion von MBs und NPs oder MNCAs (5.4.1). </li><li> Die &quot;1-Burst&quot; pulsierende Sequenz besteht aus 100 aufeinanderfolgenden 1 MHz Sinusoide (ED = 0,00002) jeweils von 1V Spitze-Spitze-Amplitude von einem Waveform-Generator (AFG-310; Tektronix, Inc., Beaverton, OR). Amplify die Wellenform-Signal durch einen 55 dB RF mit einem Leistungsverstärker (ENI 3100LA; Elektronische Navigation Industries, Richardson, TX). </li></ol></li><li> Ablative Behandlung <ol><li> Identisch mit 5.4.2.1, jedoch insonate mit dem &quot;5-Burst-Medium&quot; oder &quot;5-Burst - Extended&quot; Pulssequenz </li><li> Die &quot;5-Burst-Medium&quot; pulsierende Sequenz besteht aus 5000 1 MHz Sinusoide (duty cycle = 0,005) jeweils von 1V Spitze-Spitze-Amplitude. Die &quot;5-Burst-Exteneded&quot; pulsierende Sequenz besteht aus 10000 1 MHz Sinusoide (duty cycle = 0,01) jeweils von 1V Spitze-Spitze-Amplitude. </li><li> Während der Zeit Verlauf des Experiments überwachen Tumor Temperatur durch eine Nadel Thermoelementsonde (Omega T-Typ, HYP1-30-1/2-TG-60-SMPW-M) 2cm in den Tumor. Rekord Temperaturmessungen alle fünf Minuten. </li></ol></li></ol></li><li> Wiederholen Tumorperfusion Messungen in 5,3 10 Minuten nach therapeutischer Behandlung beschrieben. </li></ol> 6. Tumorperfusion Quantifizierung <ol><li> Mit dem CPS-Programm auf der Sequoia, geben Sie ACQ-Modus. Wählen the region of interest über den kompletten Tumorvolumen. Perfusion Erholung Kurven der Form generiert werden y = A (1 - e-βt) + C (Sadlowski 2002; Chromas 2001; Yeh 2004), die Anpassung an die CPS-Daten. Bewerten β, ein relatives Maß der roten Blutkörperchen Geschwindigkeit, Vorbehandlung und Nachbehandlung. </li><li> Export CPS-Dateien für die Offline-Analyse. Konvertieren von Daten in AVI-Dateien. Pause avi-Dateien in Frame-by-Frame-Bildsequenzen. Mit Compaq Visual Fortan oder eine ähnliche Software-Paket, erzeugen eine zeitlich gemittelte Bild aller Bilder von der zerstörerischen Impuls auf 8 Sekunden nach dem zerstörerischen Impuls. </li><li> Um festzustellen, perfundierten Tumor-Bereich, mit ImageJ-Software, gelten eine Schwelle von 247 um die 8-bite die Zeit gemittelt CPS Bild und Quantifizierung der Prozent verbesserte Pixel innerhalb des Tumorvolumens. Overlay den entsprechenden B-Bild mit der Zeit gemittelt Schwellenwert Bild genau zu definieren Tumor-Bereich. </li><li> Durchschnittliche die prozentuale perfundierten Bereich für ein Minimum von vier CPS-Clips, um eine endgültige perfundierten Gebiet zu einem bestimmten Zeitpunkt für einen bestimmten Tumor zu erhalten. </li><li> Nehmen Sie das Produkt Prozent perfundierten Bereich (6,4) und β (.1), relative Tumordurchblutung bestimmen. </li></ol> 7. Nanopartikel Bioverteilung in Tumor <ol><li> Zwölf Tage vor der Behandlung mit fluoreszenzmarkierten NPs Ort Mäuse auf einem niedrigen alfasprot Ernährung (Harlan, Indianapolis IN) zu reduzieren Autofluoreszenz durch normale Maus chow bei der Abbildung entstehen. </li><li> Shave der Imaging-Website (Flanke Leber), alle Haare zu entfernen. </li><li> Rückstände von Haaren mit einem chemischen Haarentfernung Mittel wie Nair. <ol><li> Spülen aller verbleibenden chemischen Haarentferner oder eine Verätzung auftreten. </li></ol></li><li> Bild Mäuse auf der FMT-System (VisEn Medical) vor der Behandlung und 0, 1, 4 und 24 Stunden nach der Behandlung wie in 5.4.2 beschrieben. </li><li> Vor Bildgebung betäuben Mäusen mit einer IP-Verbindung Injektion von Ketamin-Hydrochlorid (60 mg / kg Körpergewicht) und Xylazin (0,1 mg / kg Körpergewicht). Bewegen Sie die Maus auf dem Imaging-Kassette. Erwerben Reflexion Bilder in weißem Licht und fluoreszierende Modi. Führen Sie fluoreszierenden tomographischen Bildgebung in der VT680-Kanal. </li><li> Verwende den FMT Software 3D-Rekonstruktionen der Bilddaten unter Verwendung eines normierten Born-Gleichung zu erzeugen. Nach der Rekonstruktion, wählen Volumina von Interesse (VOI), indem Sie eine Region of Interest (ROI) in allen 3 Bildebenen (X, Y, Z). Eine mittlere Fluoreszenz-Wert und insgesamt VOI Volumen und Fluorochrom-Konzentration aufgrund fluoreszenzmarkierten BSA-Nanopartikeln, wird für VOI umfasst die Füße und in der Leber erzeugt werden. </li></ol> 8. Tumor Growth Rate <ol><li> Bewerten Tumorvolumen, indem sie täglich Messungen mit digitalen Kaliber. Berechnen Tumorvolumina mit einem Ellipsoid Annäherung; V = 1 / 6 π abc. Wo a, b und c sind die maximalen Durchmesser des Tumors in drei orthogonalen Ebenen gemessen. </li></ol> 9. Tumor Processing and Analysis <ol><li> Sieben Tage nach der Behandlung euthanize Tiere. Kanülieren des linken Ventrikels und exsanguinate Blut mit 10 ml 2% Heparinisiertes Tris CaCl 2-Puffer (0,68 mM) Perfusion von 10 ml Tris CaCl 2-Puffer (0,68 mM), jeweils für 10 Minuten bei 100 mmHg gefolgt. </li><li> Perfusion-fix Gewebe mit einer Infusion von 4% Paraformaldehyd in PBS (4 ° C) für 10 Minuten bei 100 mmHg. Lassen Sie Probe für 60 Minuten zu beheben. </li><li> Excise Proben in Paraffin eingebettet und geschnitten in 5-Mikron-Abschnitte. </li><li> Führen Sie Standard-Hämatoxylin-Eosin-Färbung zur histologischen Veränderungen, die als Ergebnis der Ultraschall-Aufnahmen entstanden sein könnten bewerten. </li><li> Zum Nachweis von apoptotischen Zellen, verwenden Sie ein Terminal Desoxynucleotidyltransferase vermittelten Desoxyuridintriphosphat nick end labeling (TUNEL)-Assay (ApoptTag Kit, Intergen Co., Norcross, GA, USA). </li></ol> 10. Repräsentative Ergebnisse 1. Nanopartikel Fabrication (2,0) <ol><li> Wenn dieses Protokoll korrekt vorgeformt ist NPs werden in Form sphärischer, wie Raster-Elektronen-Mikroskopie (SEM) bestimmt, und eine Gauß-Verteilung rund um 100nm, durch Lichtstreuung Techniken bestimmt. Repräsentative Ergebnisse sind in Abbildung 1 dargestellt. </li></ol> 2. Targeted Drug Delivery (5.4.1) <ol><li> Basierend auf den veröffentlichten Studien in unserem Labor (Song 2002, Chappell 2008) und unveröffentlichte Ergebnisse in Abbildung 2, Ultraschall-Mikrobläschen Zerstörung führt zu verbesserter Lieferung von intravaskulären Nanopartikel Tumorgewebe durchgeführt. Wir haben auch gezeigt, dass unsere MNCA Lieferung Technik führt zu erhöhten Nanopartikel Lieferung sofort nach der Behandlung. </li></ol> 3. Tumor Ablation (5.4.3) <ol><li> Wir haben das verlängerte Ultraschall Mikroblasen Zerstörung, bei relativ niedrigen Arbeitszyklen (0,005 bis 0,01), die Ergebnisse in mechanische Abtragung der gezeigtenTumor Mikrovaskulatur und Regression des Tumorwachstums. Wenn dieses Protokoll ordnungsgemäß durchgeführt wird sollte man erwarten, Änderungen in (i) Geschwindigkeit des Tumorwachstums (Abb. 3), (ii) Tumor Hämodynamik (Abbildung 4), (iii) nekrotischen Bereich, und (iv) die Apoptose. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2145/2145fig1.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1. Charakterisierung von Nanopartikeln PLAGA Lager BSA. (A) SEM-Bild korrekt hergestellt Nanopartikel. (B) REM-Aufnahme von unsachgemäß hergestellt Nanopartikel. <img src="/files/ftp_upload/2145/2145fig2.jpg" alt="Abbildung 2" /> Abbildung 2. (A) Fluoreszenz-vermittelte Tomographie (FMT) Bilder von Ultraschall behandelt (oben) und Kontrolle behandelt (unten) subkutane Gliome unmittelbar nach der Behandlung mit einem MNCAs, bei denen Nanopartikel (NPs) Lager 680 Fluoreszenz-Signale werden auf überlagert Graustufen planar Anregungslicht Bild. <img src="/files/ftp_upload/2145/2145fig3.jpg" alt="Abbildung 3" /> Abbildung 3. Representative fache Änderung des Tumorwachstums nach Mikroblasen Schalluntersuchung mit den fünf-Burst erweitert pulsierende Protokoll. <img src="/files/ftp_upload/2145/2145fig4.jpg" alt="Abbildung 4" /> Abbildung 4. B-Mode (A, C) und kontrastverstärkten Sonographie (B, D) Bilder einer subkutanen C6 Gliom Tumor in einer Maus. In der ersten Vorbehandlung Bild (A) die Grenze von meist echoarmen Tumor in blau verfolgt worden. Zeitlich mittlere Enhancement nach intravenöser Injektion eines Kontrastmittels in (B) Vorbehandlung gezeigt. Nachbehandlung, vor Kontrastmittelinjektion ist die Tumor wieder meist echoarm (D). Nach Kontrastmittelinjektion, gibt es deutlich weniger Verbesserung in den Tumor.

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Kritische Schritte Kanülierung der Maus Schwanzvene: Die intravenöse Injektion in die Maus Schwanzvene kann eine schwierige Prozedur sein. Allerdings kann eine Schwanzvene Katheter verbessern die Wahrscheinlichkeit einer erfolgreichen Injektion. Um den Katheter mehrmals hin und her biegen einem 25-Gauge-Nadel, bis es von der Nabe bricht. Legen Sie das stumpfe Ende in das Ende des PE 20 Rohre und dichten die Verbindung mit Silikonkleber. Zur Vorbereitung des Katheter...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>ApoptTag kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Intergen Co.</td>
<td>S7110</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>un-capped 85:15 poly(lactic-co-glycolic acid) (PLAGA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Lakeshore Biomaterials</td>
<td>Custom</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vivo Tag 680</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VisEn Medical</td>
<td>10120</td>
<td>Used to Tag BSA</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly(vinyl alcohol)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>363136</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MicroTip Sonicator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Misonix</td>
<td>S-4000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sequoia</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Simons Medical</td>
<td>P.O.A</td>
<td>Equipped with CPS </td>
</tr>
<tr>
<td>FreeZone 2.5</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Labconco</td>
<td>7670020</td>
<td>Equipped with Nitrogen Trap</td>
</tr>
<tr>
<td>Methylene chloride (CH2Cl2)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>D37-500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FMT 250</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VisEn Medical</td>
<td>P.O.A</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>F-12K Nutrient Mixture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>21127-022</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>polyethyleneglycol-40 stearate </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma Chemical </td>
<td>9004-99-3</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>distearoyl phosphatidylcholine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Avanti Polar Lipids</td>
<td>770365</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multisizer Coulter Counter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Beckman Coulter </td>
<td>P.O.A</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Waveform Generator </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tektronix, Inc.</td>
<td>AFG-310</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>water-based ultrasound gel </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Parker Laboratories</td>
<td>Aquasonic 100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Infusion pump </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>Harvard Apparatus PHD 2000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide (EDC) </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pierce Biotechnology</td>
<td>25952-53-8</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N-hydroxysulfosuccinimide (Sulfo-NHS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pierce Biotechnology</td>
<td>106627-54-7</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Succinic anhydride</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>603902</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Power Amplifier </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Electronic Navigation Industries</td>
<td>ENI 3100LA</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Thermocouple Probe </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Omega</td>
<td>HYP1-30-1/2-T-G-60-SMPW-M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BioGel (P100, medium)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad</td>
<td>150-4170</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>.75&#x2019;&#x2019; diameter 1 MHz unfocused transducer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Panametrics</td>
<td>A314S </td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

contrast ultrasound targeted treatment of gliomas in mice via drug-bearing nanoparticle delivery and microvascular ablation

Wir entwickeln minimal-invasive Kontrastmittel Mikroblasen basierte therapeutische Ansätze, in denen die Permeabilisierung und / oder Abtragung der Mikrovaskulatur durch Variation Ultraschall pulsierende Parameter gesteuert werden. Insbesondere sind wir testen, ob solche Ansätze verwendet werden, um bösartigen Hirntumoren durch Drug-Delivery-und mikrovaskuläre Ablation behandeln. Vorläufige Studien wurden durchgeführt, um festzustellen, ob gezielte Wirkstoff-tragenden Nanopartikel Lieferung durch den Ultraschall-vermittelte Zerstörung von &quot;Verbundwerkstoff&quot;-Zusteller von 100nm Poly (Lactid-co-Glycolid) (PLAGA) Nanopartikel, die an Albumin geschält Mikrobläschen eingehalten werden zusammen erleichtert werden kann . Wir bezeichnen diese Mittel als Mikroblasen-Nanopartikel-Composite-Agenten (MNCAs). Wenn zur subkutanen C6 Gliome mit Ultraschall gezielt beobachteten wir eine sofortige 4,6-fache Erhöhung der Nanopartikel-Lieferung in MNCA behandelten Tumoren über Tumoren mit Mikrobläschen mit Nanopartikeln und einer 8,5 fachen Erhöhung gegenüber nicht behandelten Tumoren verabreicht behandelt. Darüber hinaus in vielen Krebs-Anwendungen, glauben wir, kann es wünschenswert sein, um gezielten Verabreichung von Medikamenten in Verbindung mit Ablation des Tumors Mikrozirkulation, die an Tumor Hypoxie und Apoptose führen durchzuführen. Zu diesem Zweck haben wir die Wirksamkeit von nicht-theramal durch Kavitation mikrovaskuläre Ablation getestet und zeigt, dass dieser Ansatz Tumorperfusion Reduktion, Apoptose, signifikante Wachstumshemmung und Nekrose hervorruft. Zusammengenommen zeigen diese Ergebnisse, dass unsere Ultraschall-gezielten Ansatz das Potenzial für therapeutische Effizienz, indem Tumor-Nekrose durch mikrovaskuläre Ablation und / oder gleichzeitig die Verbesserung der Droge Nutzlast in Gliomen zu erhöhen ist.

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Contrast Ultrasound Targeted Treatment of Gliomas in Mice via Drug-Bearing Nanoparticle Delivery and Microvascular Ablation

Schalluntersuchung von Mikrobläschen ist eine vielversprechende Strategie für die Tumor Ablation bei reduziertem Zeit-gemittelten akustischen Kräfte, sowie für die gezielte Verabreichung von Therapeutika. Das Ziel der vorliegenden Studie ist es, niedrige Einschaltdauer Ultraschall pulsierende Strategien und Nanocarriern zu nicht-thermischen Ablation mikrovaskuläre und Nutzlast Lieferung an subkutanen C6 Gliomen zu maximieren.

Contrast Ultrasound gezielte Behandlung von Gliomen in Mäusen über Drug-Bearing Nanopartikel Liefer-und mikrovaskuläre Ablation

We are developing minimally-invasive contrast agent microbubble based therapeutic approaches in which the permeabilization and/or ablation of the ...

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Bioengineering

15.8K Aufrufe.  University of Virginia. Schalluntersuchung von Mikrobläschen ist eine vielversprechende Strategie für die Tumor Ablation bei reduziertem Zeit-gemittelten akustischen Kräfte, sowie für die gezielte Verabreichung von Therapeutika. Das Ziel der vorliegenden Studie ist es, niedrige Einschaltdauer Ultraschall pulsierende Strategien und Nanocarriern zu nicht-thermischen Ablation mikrovaskuläre und Nutzlast Lieferung an subkutanen C6 Gliomen zu maximieren.