This study was supported by NIH grants HL091986 (JPD) and HL094692 (MTZ).

HINWEIS: Dieses Tier Protokoll wurde von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) an der Ohio State University zugelassen. Dieses Verfahren kann auf jede Maus, bei der der Innendurchmesser der Halsschlagader groß genug ist, den Katheter einzuführen ist verwendet werden. Verwenden Sie Mäusen, die über 16 g (älter als ~ 2 Monate) sind. 1. Vorbereiten Maus für Katheterisierung <ol><li> Dichten Sie alle chirurgischen Instrumente und Zubehör in einem Sterilisationsbeutel. Sterilisieren Sie den Beutel in einem Autoklaven Maschine. Halten Sie einen sterilen Bereich während des gesamten Verfahrens und tragen sterile Handschuhe. </li><li> Mäuse anästhesiert mit Ketamin (55 mg / kg) und Xylazin (15 mg / kg) durch intraperitoneale Injektion. HINWEIS: Das gesamte Verfahren Messung sowohl Druck / Volumen bei verschiedenen Herzfrequenzen und ESPRV dauert weniger als 20 Minuten. Wenn zusätzliche Zeit erforderlich ist, (dh mehr als 30 min), liefern einen zusätzlichen ¼ Dosis Narkose alle 30 min. </li><li> Entfernen Sie die Haare im vorderen region von Hals und Brust-Bereich mittels Haarentfernungscreme (zB Nair) und kleben Sie die Schenkel der Maus auf die Schaum Plattform. Bestätigen Sie einen Zustand tiefer Narkose durch eine Zehe Prise. </li><li> Legen Sie eine rektale Sonde, um die Körpertemperatur (37 ± 1 ° C) zu überwachen und zu warten mit einem temperaturgeregelten Heizkissen (zwischen dem Operationstuch und Plattform befinden). </li><li> Bereiten Sie eine Länge von 4-0 Nahtmaterial (~ 10 cm). Loop Naht um den oberen Schneidezähnen und Band auf Plattform. Dadurch wird der Hals gerade zu halten. </li><li> Sterilisieren Sie den OP-Bereich durch Tupfen Sie die Stelle mit Betadine und 75% Alkohol dreimal. </li></ol> 2. Katheterisierung <ol><li> Bereiten Sie den Katheter durch Vorweichen die Spitze in Kochsalzlösung oder destilliertem Wasser (37 ° C) für mindestens 30 Minuten vor der (nach Herstellerangaben) verwenden, um die Drucksensormembran für die Nass biologischen Umgebung zu akklimatisieren und zu Drucksignaldrift und negative zu vermeiden Druckmessungen. </li><li> Einen Längs 0.8 cm Einschnitt zwischen Unterkiefer und Brustbein im Frontzahnbereich des Halses. Mit den feinen Schere, trennen die Haut muskuläre Bindegewebe um die Luftröhre unter der stemohyoideus Muskel befindet aussetzen. </li><li> Trenne die Fett und Muskelgewebe an der rechten Seite der Luftröhre mit einer gebogenen Pinzette, um die rechte Arteria carotis freizulegen. HINWEIS: Die Halsschlagader ist die größte Arterie im Frontzahnbereich des Halses, enthält hellrotes Blut, und ist pulsatile. Nicht mit der Halsschlagader, die parallel zu der Halsschlagader läuft verwechseln. Die Halsschlagader ist dunkelrot und nicht-pulsatile. Darüber hinaus bei der Isolierung der Halsschlagader, sollte der Nutzer bewusst sein, die Vagus nicht zu beschädigen. </li><li> Entfernen des Fettes von der rechten Halsschlagader mit der gekrümmten Pinzette. Existiert Verzweigung des Schiffes, die diese Betriebstechnik behindern wird, schneiden Sie sie mit einer Bovie Kauter, um die Halsschlagader zu distanzieren.Trennen, wie viel von dem Gewebe wie möglich unter die Halsschlagader unter Verwendung einer gebogenen Pinzette. </li><li> Schneiden Sie zwei 5 cm 6-0 Seidenfäden. Übergeben Sie jede Seidenfaden unter der rechten Halsschlagader. </li><li> Position ein Faden in der Nähe des proximalen Teils und die andere in der Nähe des distalen Teils der Arterie. Einen festen Knoten auf das Gewinde am distalen Teil und einen losen Knoten auf das Gewinde am proximalen Teil. </li><li> Blockieren des Blutflusses durch Klemmen des proximalen Teils der Arterie unter Verwendung eines kleinen Gefäßklemme Gefäßklemme (setzen die Klemme unterhalb des proximalen Gewinde). Die abgedichteten Bereich der Arterie mit Blut macht es einfach, Schritt 2.8 durchführen gefüllt werden. </li><li> Stechen ein kleines Loch in der rechten Halsschlagader zwischen den beiden Gewinden (aber näher an dem distalen Gewinde) mit einem 26-G-Nadel. Stecken Sie den Katheter in die Halsschlagader. Die losen Knoten am proximalen Teil der Halsschlagader leicht anziehen auf den Katheter an Ort und Stelle zu halten. HINWEIS: Mit der Punktion wird bevorzugt im VergleichSchere Einschnitt. Indem sie einen festen Knoten in dem distalen Teil des ersten Arterie und dann Festklemmen des proximalen Teils, wird die Arterie vollständig mit Blut gefüllt werden. Dies macht es sehr einfach, durch das Blutgefäß stecken. Ferner ist die Größe der Nadel (26 G) durchsticht die Arterie mit einer Bohrung, die sich gut passt die Größe des Katheters. Bei Verwendung der Scherenschnittverfahren war es eher schwierig, die Größe des Einschnitts zu steuern. Allerdings sollte die gewählte Methode abhängig sei mit auf der man der Chirurg fühlt sich wohler mit. </li><li> Starten Sie die Aufnahme von Drucksignalen, wie in Schritt 3. </li><li> Lösen Sie die Gefäßklemme Klemme und weiterhin Einführen des Katheters nach vorne in die linke Herzkammer. Wenn einige Widerstand erlebt, wenn der Katheter, ziehen Sie sie vorsichtig hin und versuchen Sie es erneut voran. Für eine Maus mit einem Gewicht von ~ 18-25 g ist die geschätzte Länge des Katheters, der eingeführt ist 18 mm. HINWEIS: Die arterielle Drucksignal wird von 70 bis 120 mm Hg schwankt. Sobald ter Katheter in die linke Herzkammer die Form der Drucksignal ändert, und der Druck von 0 bis 120 mm Hg (in 1 gezeigt), schwanken. Herzfunktion wird innerhalb von 2-3 Minuten nach der Einführung des Katheters zu stabilisieren. </li><li> Kontinuierliche Überwachung der Körpertemperatur, Anästhesie Ebene und Atemfrequenz. </li></ol> 3. Datenerfassung <ol><li> Verwenden LabChartPro 7-Software (oder eine ähnliche Software). Verwenden Sie die Option des PV-Loop-LabChart Modul Workflow. Mit diesem Modul, wählen Sie den Druck und Volumen Loops Standardeinstellung. </li><li> Set-up drei Kanäle: ein Kanal für Druck, einen Kanal für die Lautstärke und einen Kanal für die Herzfrequenz. Stellen Skalenbereiche der obigen Parameter als 0-150 mm Hg, 0-100 ul und 0-800 Beat / min. </li><li> Drücken Sie Start-Taste für die Aufnahme. </li></ol> 4. Bowditch Effect <ol><li> Machen Sie eine 1 cm Inzision im precordium Bereich parallel zur Hammergriff. Schneiden Sie die Muskelschicht und expose der Zwischenrippenraum mit einer Schere. </li><li> Mit Hilfe eines Rechteckimpulses Stimulator, die folgenden Parameter: Spannung von 2 V, Laufzeit von 2 ms und ermöglichen Wiederholungsmodus. </li><li> Halten Sie die negative Elektrode mit einer Pinzette und setzen Sie sie durch die vierte Zwischenrippenraum an den apikalen Bereich des Herzens. Halten Sie die positive Elektrode mit einer Pinzette und setzen Sie sie durch den zweiten Zwischenrippenraum in den rechten Vorhof Bereich des Herzens. </li><li> Schalten Sie den Stimulator und ändern Sie die Frequenz, um das Herz von 4 Hz (240 Schläge / min) bis zu 10 Hz (600 Schläge / min) noch im Schneckentempo. Bei jedem neuen Herzfrequenz, stimulieren das Herz für 1 min vor der Datensammlung. </li></ol> 5. Generieren des ESPVR und PRSW <ol><li> Schneiden Sie die Haut und Muskelgewebe senkrecht zum Hammergriff im Bauchbereich mit einer Schere. Öffnen Sie die enterocoelia und setzen die Leber. </li><li> Ziehen Sie den arcus costarum in Richtung des Kopfes mit metallischen Traktion. </li><li> Schieben Sie die Leber nach unten mitein Wattestäbchen. Seien Sie vorsichtig, nicht zu viel zu drücken, um den Brustraum beeinflussen. Dies wird die Herzfunktion zu ändern. </li><li> Schneiden Sie das Ligamentum falciforme der Leber mit einer Schere, um die suprahepatischen untere Hohlvene (IVC) aussetzen. </li><li> Verwenden einer gebogenen Pinzette schnell drücken Sie den IVC für 5 Sekunden, um den Rückfluss des Blutes zum rechten Vorhof blockieren. Der linksventrikuläre Druck und das Volumen wird aufgrund des verringerten Zufluss zum Herzen zu fallen. Bei der Erzeugung dieser Werte, verwenden Sie keine Schleifen unter 60 mm Hg. Die 60 mm Hg in Bezug auf den systolischen Druck. HINWEIS: Dieser Wert wird bei 60 mm Hg eingestellt, da dies zu einer signifikanten Rückgang der Perfusionsdruck auf Koronarperfusion deutlich sinken und beeinflussen Kontraktilität. </li></ol> 6. Volume Calibration <ol><li> Heparinisierung die Maus mit 0,1 ml von 1: 5,000 Heparinlösung (normale Salzlösung) durch intraperitoneale Injektion. </li><li> Entfernen des Katheters aus der Halsschlagader. Wenn der Katheter herausgezogen from die Halsschlagader, heparinisiertes Blut wird aus dem Loch, wo der Katheter wurde eingeführt versickern. </li><li> Sammeln Sie diese Blut für Volumenkalibrierung mit einer 1-ml-Spritze. Füllen jeder Vertiefung in Kalibrierküvette. </li><li> Entfernen Herz, um die Maus über Ausbluten einschläfern. </li><li> Positionieren Sie den Katheter in jede Vertiefung und eine stetige relative Volumeneinheit (RVU) Wert. Generieren Sie eine Standardkurve unter Verwendung der verschiedenen Standardvolumina und RVU Werte aus jeder Vertiefung. </li><li> Konvertieren Sie die aufgezeichnete RVU auf &amp; mgr; l. </li></ol> 7. Datenverarbeitung <ol><li> Um die Bowditch Wirkung zu untersuchen, wählen stationären Druck / Volumen Spuren von jedem Herzfrequenz. Klicken Sie auf die Baseline-Analyse, um Daten zu erhalten. </li><li> Für ESPVR und PRSW Daten, wählen Sie die erste ~ 15 Druck / Volumen-Spuren, klicken Okklusion Analyse in der Software, um die ESPVR (Steigung der Druck durch die LV im enddiastolische Volumen entwickelt) und PRSW (die lineare Regression der Schlagarbeit generieren mit dem enddiastolischenVolumen) Pisten. </li><li> Geben die Aufmerksamkeit auf die Form der Schleifen. Stellen Sie sicher, die Schleife ohne Winkelpunkten oder Verdrehungen geschlossen. Dies ist ein Zeichen der unsachgemäßen Katheterplatzierung oder überschüssige Lärm. Während des Experiments in regelmäßigen Abständen überprüfen, um sicherzustellen, Schleifen richtigen Druck und Volumendaten generiert werden. </li></ol>

<ol>
	<li>Janssen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+contraction-relaxation+coupling.">Myocardial contraction-relaxation coupling.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 299, H1741-H1749 (2010).</li><li>Roman, M. J., Devereux, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+noninvasive+measures+of+contractility+in+dilated+cardiomyopathy.">Comparison of noninvasive measures of contractility in dilated cardiomyopathy.</a> Echocardiography. 8, 139-150 (1991).</li><li>Hamlin, R. L., del Rio, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=dP/dt(max)--a+measure+of+'baroinometry.">dP/dt(max)--a measure of 'baroinometry.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 66, 63-65 (2012).</li><li>Feneley, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+preload+recruitable+stroke+work,+end-systolic+pressure-volume+and+dP/dtmax-end-diastolic+volume+relations+as+indexes+of+left+ventricular+contractile+performance+in+patients+undergoing+routine+cardiac+catheterization.">Comparison of preload recruitable stroke work, end-systolic pressure-volume and dP/dtmax-end-diastolic volume relations as indexes of left ventricular contractile performance in patients undergoing routine cardiac catheterization.</a> J Am Coll Cardiol. 19, 1522-1530 (1992).</li><li>Kass, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+influence+of+load+versus+inotropic+states+on+indexes+of+ventricular+contractility:+experimental+and+theoretical+analysis+based+on+pressure-volume+relationships.">Comparative influence of load versus inotropic states on indexes of ventricular contractility: experimental and theoretical analysis based on pressure-volume relationships.</a> Circulation. 76, 1422-1436 (1987).</li><li>Nemoto, S., DeFreitas, G., Mann, D. L., Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+changes+in+left+ventricular+contractility+on+indexes+of+contractility+in+mice.">Effects of changes in left ventricular contractility on indexes of contractility in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283, H2504-H2510 (2002).</li><li>Ziolo, M. T., Kohr, M. J., Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+signaling+and+the+regulation+of+myocardial+function.">Nitric oxide signaling and the regulation of myocardial function.</a> J Mol Cell Cardiol. 45, 625-632 (2008).</li><li>Barouch, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+regulates+the+heart+by+spatial+confinement+of+nitric+oxide+synthase+isoforms.">Nitric oxide regulates the heart by spatial confinement of nitric oxide synthase isoforms.</a> Nature. 416, 337-339 (2002).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+nitric+oxide+synthase+signaling+within+cardiac+myocytes+targets+phospholamban.">Neuronal nitric oxide synthase signaling within cardiac myocytes targets phospholamban.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 294, C1566-C1575 (2008).</li><li>Georgakopoulos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+murine+left+ventricular+pressure-volume+relations+by+miniaturized+conductance+micromanometry.">In vivo murine left ventricular pressure-volume relations by miniaturized conductance micromanometry.</a> Am J Physiol. 274, H1416-H1422 (1998).</li></ol>

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Ein entscheidender Schritt für diese Technik, um ein zuverlässiges Maß für die Kontraktilität zu erhalten, ist die richtige Platzierung des Katheters in das LV. Wenn der Katheter nicht korrekt platziert, wenn die LV zieht die Wände können sich an den Katheter was sehr hoch ist, und nicht die physiologischen, Druckwerte verursacht unregelmäßig geformten PV-Loops. Falls erforderlich, kann der Katheter gedreht werden kann, um die korrekte Platzierung zu erreichen. Ein weiterer wichtiger Schritt für diese Technik ...

Der Zweck des Herzens ist, um Blut durch den Körper zu pumpen, um die metabolischen Anforderungen des Organismus erfüllen. Da diese Anforderungen ständig schwankenden (zB beim Sport), muss das Herz anzupassen (dh Erhöhung des Herzzeitvolumens). Das Herz hat zahlreiche Wege entwickelt, um diese Leistung zu vollbringen. Der Minister Weise das Herz erreicht dies durch eine Erhöhung der Herzfrequenz (dh Bowditch Effekt) 1. Das heißt, wie man die Herzfrequenz erhöht, führt dies zu einer Zunahme der Kontraktionsfähigkeit und ein Anstieg der Herzleistung. Somit ist die Herzfunktion überaus abhängig Herzfrequenz. Leider Herzerkrankung (zB Myokardinfarkt, Hypertrophie, etc.) führt zu einer schlechten Herzfunktion in dem das Herz folglich nicht in der Lage, um die metabolischen Anforderungen des Körpers zu erfüllen. Herzkrankheit ist die Hauptursache von Morbidität und Mortalität in der westlichen Gesellschaft. Tiermodelle, die viele Menschen cardiomy rekapitulierenopathies werden verwendet, um die molekularen Mechanismen zu untersuchen und mögliche Therapien zu testen. Diese Mechanismen zu unterscheiden und zu bestimmen, ob eine Therapie können lebensfähig zu sein, muss Ermittler Herzfunktion in vivo zu beurteilen. Es gibt mehrere Möglichkeiten, um die Herzfunktion in vivo zu beurteilen (z, Echokardiographie, MRI, etc.), die routinemässig gemessen Ejektionsfraktion fractional shortening, Herzzeitvolumen, usw. Jedoch sind diese Parameter in hohem Maße von der Nachlast, Vorspannung, und die Herzfrequenz zusätzlich zu Kontraktilität 2. Messen Kontraktilität ist unerlässlich, um die intrinsischen Eigenschaften des Herzens in ihrer natürlichen Umgebung zu erfassen. Die maximale (dP / dt max) Geschwindigkeit des Druck Entwicklung bringt uns einen Schritt näher an das Verständnis Kontraktilität. Leider ist dP / dt auch abhängig von der Herzfrequenz und Belastungsbedingungen 3. Techniken wurden deshalb entwickelt, um die Last (und Herzfrequenz zu messen, siehe below) unabhängige Indizes der myokardialen Kontraktilität (dh Ende systolischen Druck Volumen Beziehung (ESPVR) und Vorspannung rekrutierbar Schlagarbeit (PRSW)) 4-6. ESPVR beschreibt den maximalen Druck, der durch die Herzkammer zu einem gegebenen LV Volumen entwickelt werden kann. Die Steigung der ESPVR stellt die endsystolische Elastance (EBS). PRSW ist die lineare Regression der Schlagarbeit (Bereich von der PV-Schleife eingeschlossen) mit der enddiastolische Volumen. Diese Verfahren sind eine genaue und präzise Messung der Kontraktionskraft im Vergleich zum hämodynamische Parameter wie Ejektionsfraktion, Herzminutenvolumen und Schlagvolumen. ESPVR und PRSW kann über die vorübergehende Blockierung der unteren Vena cava (IVC) erhalten werden. Blockieren des IVC kann mit einer geschlossenen Brust durchgeführt werden, um die Wirkung der Änderung des intrapleuralen Druck auf die Herzfunktion zu vermeiden. Erhöhung der Herzfrequenz erhöht auch Kontraktion und Entspannung 1. So bei einem Vergleich die Herzfunktion zwischen ExperimentaL-Gruppen (beispielsweise ± dP / dt), müssen Herzraten ähnlich. Jedoch ähnliche Herzfrequenzen in der Regel nicht bei jedem Tier auftreten, aufgrund verschiedener Bedingungen (disease, Forschungseingriff, etc.). Es sollte beachtet werden, dass Anästhesie (injizierbare und inhalierten) senkt die Herzfrequenz werden. Als Herzfrequenz ist eine wichtige Determinante für die Kontraktilität wird Narkose erheblich beeinträchtigen Kontraktilität. Aus diesem Grund beschreiben wir unsere Vorgehensweise. Darüber hinaus ist ein Markenzeichen von vielen Kardiomyopathien eine verminderte Kontraktionsreserve (dh eine verringerte Bowditch-Effekt). Daher sollte der Herzfunktion über einen Bereich von Herzraten gemessen werden. Hier beschreiben wir, wie man einen Stimulator (mit geschlossenem Brustkorb) verwenden, um diese Effekte zu erzielen. Zusätzlich zu der Herzfrequenz, (NO) ist Stickstoffmonoxid auch ein wichtiger Modulator der Kontraktilität 7. NO wird durch Enzyme produzierte genannte NO-Synthase (NOS). Wir und andere haben gezeigt, dass Mäuse, die mit KO von neuronaler NOS (NOS1 gezeigt <sup&gt; - / -) haben abgestumpft myocyte Kontraktion und in vivo Hämodynamik 8,9. Diese Maus wird verwendet, um die Messung der linksventrikulären Kontraktilität über die bei verschiedenen Herzfrequenzen ausgeführt LV Druck / Volumen-Analyseverfahren nachzuweisen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="688">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:187px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Xlyzine 100mg/ml</td>
			<td style="width:187px;">Ana Sed</td>
			<td style="width:119px;">4821</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Katamin 50mg/ml</td>
			<td style="width:187px;">Ketalar</td>
			<td style="width:119px;">310006</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">Heparin</td>
			<td style="width:187px;">APP Pharmaceuticals</td>
			<td style="width:119px;">6003922</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">4-0 silk thread</td>
			<td style="width:187px;">Surgical specialties</td>
			<td style="width:119px;">SP102</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">6-0 silk thread</td>
			<td style="width:187px;">Surgical specialties</td>
			<td style="width:119px;">MBKF270</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Forceps</td>
			<td style="width:187px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11251-10</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:216px;">Curve forceps</td>
			<td style="width:187px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11274-20</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:187px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">14090-09</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Vascular clamp</td>
			<td style="width:187px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18555-03</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Microscope</td>
			<td style="width:187px;">World precision instruments</td>
			<td style="width:119px;">PZM-3</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Pressure catheter</td>
			<td style="width:187px;">Millar instruments</td>
			<td style="width:119px;">SPR-839</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Pressure and volume system</td>
			<td style="width:187px;">Millar instruments</td>
			<td style="width:119px;">MPVS-300</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">PowerLab4/35</td>
			<td style="width:187px;">AD instruments</td>
			<td style="width:119px;">N12128</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">LabchartPro 7</td>
			<td style="width:187px;">AD instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Temperature controller</td>
			<td style="width:187px;">CWE</td>
			<td style="width:119px;">TC-1000</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Stimulator</td>
			<td style="width:187px;">Grass</td>
			<td style="width:119px;">SD-5</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Sterile glove</td>
			<td style="width:187px;">Micro-Touch</td>
			<td style="width:119px;">1305018821</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Hair remover lotion</td>
			<td style="width:187px;">Nair</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Betadine surgical scrub</td>
			<td style="width:187px;">Veterinary</td>
			<td style="width:119px;">NDC 6761815401</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Acohol</td>
			<td style="width:187px;">Decon Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">2801</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Bovie cautery</td>
			<td style="width:187px;">Bovie</td>
			<td style="width:119px;">AA29</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">1ml Syringe(26G needle)</td>
			<td style="width:187px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">8017299</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: investigating the bowditch effect

Tiermodelle, die menschliche Herzerkrankungen nachahmen wurden geschaffen, um mögliche therapeutische Strategien zu testen. Eine Schlüsselkomponente zur Bewertung dieser Strategien ist es, ihre Auswirkungen auf die Herzfunktion zu untersuchen. Es gibt verschiedene Techniken, um in vivo Herzmechanik (zB Echokardiographie, Druck / Volumen-Verhältnisse, etc.) zu messen. Im Vergleich zur Echokardiographie, ist Echtzeit-linksventrikulären (LV) Druck / Volumen-Analyse über Katheterisierung präziser und aufschlussreich für die Beurteilung LV-Funktion. Zusätzlich stellt LV Druck / Volumen-Analyse die Möglichkeit, Änderungen bei Manipulationen der Kontraktilität (zB β-Rezeptorenstimulation) und pathologischen Beleidigungen (zB, Ischämie / Reperfusionsverletzung) augenblicklich zu erfassen. Zusätzlich zu dem Maximalwert (+ dP / dt) und minimalen (dP / dt) der Druckänderungsrate in der LV, eine genaue Beurteilung der Herzfunktion über mehrere lastunabhängigen Indizes (zB endsystolischen DruckVolumen-Verhältnis und Vorspannung rekrutierbar Schlagarbeit) erreicht werden kann. Puls hat eine signifikante Wirkung auf die Kontraktilität LV, daß eine Erhöhung der Herzfrequenz ist der primäre Mechanismus für das Herzminutenvolumen (dh Bowditch Effekt) zu erhöhen. Somit ist beim Vergleich Hämodynamik zwischen experimentellen Gruppen, ist es notwendig, ähnlich Herzraten haben. Darüber hinaus ist ein Markenzeichen von vielen Kardiomyopathie Modelle eine Abnahme der kontraktilen Reserve (dh verringerte Bowditch-Effekt). Folglich kann wichtige Informationen durch die Ermittlung der Wirkung Erhöhung der Herzfrequenz auf die Kontraktilität erhalten werden. Unsere und andere Daten hat gezeigt, dass die neuronale Stickstoffmonoxid-Synthase (NOS1) Knockout-Maus hat Kontraktilität verringert. Hier beschreiben wir das Verfahren zur Messung der LV Druck / Volumen mit zunehmender Herzfrequenz mit Hilfe der NOS1 Knockout-Maus-Modell.

Die korrekte Insertion des Katheters in den linken Ventrikel ist ein wichtiger Schritt, um entsprechende Druck- und Volumenwerte zu erreichen. Dargestellt in Figur 1, mit LabChart Pro 7 ist die Änderung der Druckwellenform (Form und Werte), wenn der Katheter aus der Arterie geht in den Ventrikel. Nach entsprechender Einführung des Katheters in den linken Ventrikel, der Druck (P) und Volumen (V) erhalten wird, dann verwendet werden, um die PV-Schleifen erzeugt Werte (in <st...

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Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

Herzkatheter in Mäuse, um den Druck Volumen Relationship Maßnahme: Untersuchung der Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

18.0K Aufrufe.  The Ohio State University. This article describes the measurement of murine left ventricular function via pressure/volume analysis at different heart rates.

Serie: Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and cardiac arrest. This elevation may result in further neurological injury, in the form of transtentorial herniation1,2,3,4, midbrain compression, neurological deficit or increased cerebral infarct2,4. Current therapies are often inadequate to control elevated ICP in the clinical setting5,6,7 . Thus there is a need for accurate methods of ICP measurement in animal models to further our understanding of the basic mechanisms and to develop new treatments for elevated ICP.
In both the clinical and experimental setting ICP cannot be estimated without direct measurement. Several methods of ICP catheter insertion currently exist. Of these the intraventricular catheter has become the clinical 'gold standard' of ICP measurement in humans8. This method involves the partial removal of skull and the instrumentation of the catheter through brain tissue. Consequently, intraventricular catheters have an infection rate of 6-11%9. For this reason, subdural and epidural cannulations have become the preferred methods in animal models of ischemic injury. 
Various ICP measurement techniques have been adapted for animal models, and of these, fluid-filled telemetry catheters10 and solid state catheters are the most frequently used11,12,13,14,15. The fluid-filled systems are prone to developing air bubbles in the line, resulting in false ICP readings. Solid state probes avoid this problem (Figure 1). An additional problem is fitting catheters under the skull or into the ventricles without causing any brain injury that might alter the experimental outcomes. Therefore, we have developed a method that places an ICP catheter contiguous with the epidural space, but avoids the need to insert it between skull and brain. 
An optic fibre pressure catheter (420LP, SAMBA Sensors, Sweden) was used to measure ICP at the epidural location because the location of the pressure sensor (at the very tip of the catheter) was found to produce a high fidelity ICP signal in this model. There are other manufacturers of similar optic fibre technologies13 that may be used with our methodology. Alternative solid state catheters, which have the pressure sensor located at the side of the catheter tip, would not be appropriate for this model as the signal would be dampened by the presence of the monitoring screw. 
Here, we present a relatively simple and accurate method to measure ICP. This method can be used across a wide range of ICP related animal models.

A novel technique to record the pressures within the skull is described. The minimally invasive method uses a fibre-optic pressure sensing system to accurately measure intracranial pressure (ICP) in anaesthetized rats without causing significant brain trauma. The technique may be used in a wide range of experimental models.

Epidurale Intrakranielle Druckmessung in Ratten mit einem LWL-Druckaufnehmer

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

Forschung

Medizin

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the arteries (&beta;2). When systemically administered, it increases cardiac demand. Thus, dobutamine unmasks abnormal rhythm or ischemic areas potentially at risk of infarction. 
Monitoring of heart function during a cardiac stress test can be performed by either ecocardiography or cardiac catheterization. The latter is an invasive but more accurate and informative technique that the former.
Cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization accomplished as described here allows, in a single experiment, the measurement of the following hemodynamic parameters: heart rate (HR), systolic pressure, diastolic pressure, end-diastolic pressure, maximal positive pressure development (dP/dtmax) and maximal negative pressure development (dP/dtmin), at baseline conditions and under increasing doses of dobutamine.
As expected, in normal mice we observed a dobutamine dose-related increase in HR, dP/dtmax and dP/dtmin. Moreover, at the highest dose tested (12 ng/g/min) the cardiac decompensation of high fat diet-induced obese mice was unmasked.

We describe the protocol to perform a cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in normal mice. Also we show its application to unmask subclinical cardiac disease in high fat diet-induced obese mice.

Cardiac Stress Test durch Dobutamin induziert und Überwacht durch Herzkatheter in Mäuse

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential phenotypic changes are best assessed by measurement of the changes in lung elasticity. To best understand specific mechanisms underlying such pathologies in mice, it is essential to make functional measurements that can reflect the developing pathology. Although there are many ways to measure elasticity, the classical method is that of the total lung pressure-volume (PV) curve done over the whole range of lung volumes. This measurement has been made on adult lungs from nearly all mammalian species dating back almost 100 years, and such PV curves also played a major role in the discovery and understanding of the function of pulmonary surfactant in fetal lung development. Unfortunately, such total PV curves have not been widely reported in the mouse, despite the fact that they can provide useful information on the macroscopic effects of structural changes in the lung. Although partial PV curves measuring just the changes in lung volume are sometimes reported, without a measure of absolute volume, the nonlinear nature of the total PV curve makes these partial ones very difficult to interpret. In the present study, we describe a standardized way to measure the total PV curve. We have then tested the ability of these curves to detect changes in mouse lung structure in two common lung pathologies, emphysema and fibrosis. Results showed significant changes in several variables consistent with expected structural changes with these pathologies. This measurement of the lung PV curve in mice thus provides a straightforward means to monitor the progression of the pathophysiologic changes over time and the potential effect of therapeutic procedures.

Here we present a protocol to simply and reliably measure the lung pressure-volume curve in mice, showing that it is sufficiently sensitive to detect phenotypic parenchymal changes in two common lung pathologies, pulmonary fibrosis and emphysema. This metric provides a means to quantify the lung&#8217;s structural changes with developing pathology.

Die Messung der Druck-Volumen-Kurve in der Mäuselunge

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. Despite the discovery of key regulators of uterine contractility, this process is still not fully understood. Transgenic mice provide an ideal model in which to study parturition. Previously, the only method to study uterine contractility in the mouse was ex vivo isometric tension recordings, which are suboptimal for several reasons. The uterus must be removed from its physiological environment, a limited time course of investigation is possible, and the mice must be sacrificed. The recent development of radiometric telemetry has allowed for longitudinal, real-time measurements of in vivo intrauterine pressure in mice. Here, the implantation of an intrauterine telemeter to measure pressure changes in the mouse uterus from mid-pregnancy until delivery is described. By comparing differences in pressures between wild type and transgenic mice, the physiological impact of a gene of interest can be elucidated. This technique should expedite the development of therapeutics used to treat myometrial disorders during pregnancy, including preterm labor.

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

Intrauterine Telemetrie zur Maus Kontraktionsdruck messen<em&gt; In-vivo-</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Ultrasound Based Assessment of Coronary Artery Flow and Coronary Flow Reserve Using the Pressure Overload Model in Mice

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow reserve (CFR) in humans. Reduced CFR is accompanied by marked intramyocardial and pericoronary fibrosis and is used as an indication of the severity of dysfunction. This study explores, step-by-step, the real-time changes measured in the coronary flow velocity, CFR and systolic to diastolic peak velocity (S/D) ratio in the setting of an aortic banding model in mice. By using a Doppler transthoracic imaging technique that yields reproducible and reliable data, the method assesses changes in flow in the septal coronary artery (SCA), for a period of over two weeks in mice, that previously either underwent aortic banding or thoracotomy. 
During imaging, hyperemia in all mice was induced by isoflurane, an anesthetic that increased coronary flow velocity when compared with resting flow. All images were acquired by a single imager. Two ratios, (1) CFR, the ratio between hyperemic and baseline flow velocities, and (2) systolic (S) to diastolic (D) flow were determined, using a proprietary software and by two independent observers. Importantly, the observed changes in coronary flow preceded LV dysfunction as evidenced by normal LV mass and fractional shortening (FS). 
The method was benchmarked against the current gold standard of coronary assessment, histopathology. The latter technique showed clear pathologic changes in the coronary artery in the form of peri-coronary fibrosis that correlated to the flow changes as assessed by echocardiography. 
The study underscores the value of using a non-invasive technique to monitor coronary circulation in mouse hearts. The method minimizes redundant use of research animals and demonstrates that advanced ultrasound-based indices, such as CFR and S/D ratios, can serve as viable diagnostic tools in a variety of investigational protocols including drug studies and the study of genetically modified strains.

Coronary flow reserve (CFR) is useful for assessment of myocardial oxygen demand and evaluation of cardiovascular risk. This study establishes a step-by-step transthoracic Doppler echocardiographic (TTDE) method for longitudinal monitoring of the changes in CFR, as measured from coronary artery in mice, under the experimental pressure overload of aortic banding.

Ultraschall Basierend Beurteilung der koronaren Herzfluss und koronare Flussreserve Mit der Drucküberlastung Modell an der Maus

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow ...

Cardiac Magnetic Resonance Imaging at 7 Tesla

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher magnetic field strengths and potentially provides improved signal contrast and spatial resolution. While promising results have been achieved, ultra-high field CMR is challenging due to energy deposition constraints and physical phenomena such as transmission field non-uniformities and magnetic field inhomogeneities. In addition, the magneto-hydrodynamic effect renders the synchronization of the data acquisition with the cardiac motion difficult. The challenges are currently addressed by explorations into novel magnetic resonance technology. If all impediments can be overcome, ultra-high field CMR may generate new opportunities for functional CMR, myocardial tissue characterization, microstructure imaging or metabolic imaging. Recognizing this potential, we show that multi-channel radio frequency (RF) coil technology tailored for CMR at 7 Tesla together with higher order B0 shimming and a backup signal for cardiac triggering facilitates high fidelity functional CMR. With the proposed setup, cardiac chamber quantification can be accomplished in examination times similar to those achieved at lower field strengths. To share this experience and to support the dissemination of this expertise, this work describes our setup and protocol tailored for functional CMR at 7 Tesla.

The sensitivity gain inherent to ultrahigh field magnetic resonance holds promise for high spatial resolution imaging of the heart. Here, we describe a protocol customized for functional cardiovascular magnetic resonance (CMR) at 7 Tesla using an advanced multi-channel radio-frequency coil, magnetic field shimming and a triggering concept.

Kardiale Magnetresonanztomographie bei 7 Tesla

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Echtzeit-Druck-Volumen-Analyse eines akuten Myokardinfarkts bei Mäusen

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Combining Volumetric Capnography And Barometric Plethysmography To Measure The Lung Structure-function Relationship

Tools to measure lung and airways volume are critical for pulmonary researchers interested in evaluating the impact of disease or novel therapies on the lung. Barometric plethysmography is a classic technique to evaluate the lung volume with a long history of clinical use. Volumetric capnography utilizes the profile of exhaled carbon dioxide to determine the volume of the conducting airways, or dead space, and provides an index of airways homogeneity. These techniques may be used independently, or in combination to evaluate the dependence of airways volume and homogeneity on lung volume. This paper provides detailed technical instructions to replicate these techniques and our representative data demonstrates that the airways volume and homogeneity are highly correlated to lung volume. We also provide a macro for the analysis of capnographic data, which can be modified or adapted to fit different experimental designs. The advantage of these measures is that their advantages and limitations are supported by decades of experimental data, and they can be made repeatedly in the same subject without expensive imaging equipment or technically advanced analysis algorithms. These methods may be particularly useful for investigators interested in perturbations that change both the functional residual capacity of the lung and airways volume.

Here, we describe two measures of pulmonary function &#8211; barometric plethysmography, which allows the measurement of lung volume, and volumetric capnography, a tool to measure the anatomic dead space and airways uniformity. These techniques may be used independently or combined to assess airways function at different lung volumes.

Kombination von volumetrischen Capnographie und barometrischen Plethysmographie der Lunge-Struktur-Funktions-Beziehung zu messen

Tools to measure lung and airways volume are critical for pulmonary researchers interested in evaluating the impact of disease or novel therapies on the ...

Biventricular Assessment of Cardiac Function and Pressure-Volume Loops by Closed-Chest Catheterization in Mice

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) generated by recording both pressure and volume during cardiac catheterization are vital when assessing both systolic and diastolic cardiac function. Left and right heart function are closely related, reflected in ventricular interdependence. Thus, recording biventricular function in the same animal is important to get a complete assessment of cardiac function. In this protocol, a closed chest approach to cardiac catheterization consistent with the way catheterization is performed in patients is adopted in mice. While challenging, the closed chest strategy is a more physiological approach, because opening the chest results in major changes in preload and afterload that create artifacts, most notably a fall in systemic blood pressure. While high-resolution echocardiography is used to assess rodents, cardiac catheterization is invaluable, particularly when assessing diastolic pressures in both ventricles.
Described here is a procedure to perform invasive, closed chest, sequential left and right ventricular pressure-volume (PV) loops in the same animal. PV loops are acquired using&#160;admittance technology with a mouse pressure-volume catheter and pressure-volume system acquisition. The procedure is described, beginning with the neck dissection, which is required to access the right jugular vein and the right carotid artery, to the insertion and positioning of the catheter, and finally the data acquisition. Then, the criteria required to ensure the acquisition of high-quality PV loops are discussed. Finally, the analysis of the left and right ventricular PV loops and the different hemodynamic parameters available to quantify systolic and diastolic ventricular function are briefly described.

Presented here is a protocol to assess biventricular heart function in mice by generating pressure-volume (PV) loops from the right and left ventricle in the same animal using closed chest catheterization. The focus is on the technical aspect of surgery and data acquisition.

Biventrikuläre Beurteilung der Herzfunktion und der Druck-Volumen-Schleifen durch Closed-Thorax-Katheterisierung bei Mäusen

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) ...

Cardiac Response to &#946;-Adrenergic Stimulation Determined by Pressure-Volume Loop Analysis

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of specific treatments on the heart. Due to the feasibility of genetic manipulations the mouse has become the most common mammalian animal model to study cardiac function and to search for new potential therapeutic targets. Here we describe a protocol to determine cardiac function&#160;in vivo using pressure-volume loop measurements and analysis during basal conditions and under &#946;-adrenergic stimulation by intravenous infusion of increasing concentrations of isoproterenol. We provide a refined protocol including ventilation support taking into account the positive end-expiratory pressure to ameliorate negative effects during open-chest measurements, and potent analgesia (Buprenorphine) to avoid uncontrollable myocardial stress evoked by pain during the procedure. All together the detailed description of the procedure and discussion about possible pitfalls enables highly standardized and reproducible pressure-volume loop analysis, reducing the exclusion of animals from the experimental cohort by preventing possible methodological bias.

Here we describe a cardiac pressure-volume loop analysis under increasing doses of intravenously infused isoproterenol to determine the intrinsic cardiac function and the &#946;-adrenergic reserve in mice. We use a modified open-chest approach for the pressure-volume loop measurements, in which we include ventilation with positive end-expiratory pressure.

Kardiale Reaktion auf β-adrenerge Stimulation durch Druck-Volumen-Schleifenanalyse bestimmt

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of ...