Dieses Protokoll ist eine auf offener Brustchirurgie basierende hämodynamische Bewertung und es ist nützlich für die rechte ventrikuläre und pulmonale Arteriendruckbewertung bei Kleintieren wie Mäusen. Der Vorteil dieses Verfahrens ist, dass es sowohl VP- als auch PAP-Parameter gleichzeitig generieren kann. Daher ist es für DieAuswertungen von PAH-Modellen vorzuziehen.
Beginnen Sie mit der Einrichtung der Ausrüstung für die Chirurgie. Den Druckmessumformerkatheter mindestens 30 Minuten vor dem hämodynamischen Experiment in 0,9% Kochatin bei Raumtemperatur einweichen. Schließen Sie dann den Katheter an ein Druckvolumensystem an.
Kalibrieren Sie den Druckaufnehmer, indem Sie den Kalibrierknopf auf Null und 25 Millimeter Quecksilber drehen, um ein Verifikationsdrucksignal an die Datenerfassungssoftware zu senden, und konfigurieren Sie dann die Kalibrierungseinstellung. Drehen Sie den Knopf auf den Messumformer, und stellen Sie das Ausgleichsventil auf Null Basislinie ein. Richten Sie ein Standard-Stereomikroskop, einen temperaturgeregelten Operationstisch für Kleintiere und ein Lichtbeleuchtungssystem für die Mikrochirurgie ein.
Sobald die Maus richtig anästhesisiert ist, entfernen Sie die Brust und HalsFell mit einem Rasierer und Haarentfernung Lotion. Sichern Sie die Maus in der Supine-Position auf dem temperaturgeregelten OP-Tisch. Nachdem Sie sichergestellt haben, dass die Anästhesie wirksam ist, machen Sie einen Mittellinienschnitt auf der Halshaut.
Sezieren Sie den Skelettmuskel mit gekrümmten Zangen und belichten Sie die Luftröhre. Führen Sie eine Intubation durch den Mund mit einem 22 Gauge intravenösen Mantelkatheter durch, der bestätigt, dass sich der Schlauch in der Luftröhre mit Zangen befindet. Schließen Sie die Schläuche an ein kleines Tierbeatmungsgerät an und sichern Sie ihn zur Belüftung mit Klebeband.
Dann machen Sie einen Mittellinienschnitt auf der Brusthaut und sezieren Sie vorsichtig den Brustmuskel mit einem Kauteriewerkzeug. Schneiden Sie das Brustbein mit einer Schere über die Mitte, und setzen Sie die Brusthöhle aus. Achten Sie darauf, Blutungen mit dem Kauteriewerkzeug zu verhindern.
Setzen Sie den rechten Ventrikel mit Retraktoren aus, und legen Sie dann den mit Kochlinie getränkten Druckwandlerkatheter durch einen kleinen Tunnel ein, der mit einer 25-Spur-Nadel in den rechten Ventrikel erstellt wurde, um den rechten Venendruck (RVP) zu messen. Halten Sie das Katheterkabel und kreuzen Sie die Lungenklappe koaxial mit der Lungenarterie. Beobachten Sie die Druckwellenform und erhalten Sie einen stabilen Lungenarteriendruck oder PAP-Signal.
Zeichnen Sie als Nächstes die hämodynamischen Daten mithilfe der Datenerfassungssoftware auf. Entfernen Sie den Katheter vorsichtig aus dem rechten Herzsystem und legen Sie ihn in eine Ein-Milliliter-Spritze mit 1%Verdauungsenzymlösung. Dieses Protokoll wurde erfolgreich verwendet, um RVP- und PAP-Wellenformen bei Mäusen zu erhalten, indem ein Druckwandlerkatheter in den rechten Ventrikel und die Lungenarterie eingesetzt wurde.
Um die Erzeugung künstlicher Daten zu vermeiden, wurden Segmente mit Rauschen von der Datenanalyse ausgeschlossen und Korrekturen vorgenommen, wenn der Nullgehalt des Katheters abgedriftet war. RVP und PAP wurden an Mäusen mit induzierter chronischer Hypoxie gemessen, und die Ergebnisse wurden mit denen einer Kontrollgruppe verglichen. Systolischer PAP, diastolischer PAP, mittlerer PAP und rechtsventrikulärer systolischer Druck waren in der chronischen Hypoxiegruppe signifikant erhöht.
Das Wichtigste, was Sie sich merken sollten, ist, den Druckwandlerkatheter sorgfältig in den rechten Ventrikel einzufügen, um schäden am Katheter zu vermeiden und zu bestätigen, dass die glatte RVP-Wellenform auf dem Bildschirm erscheint.
