Wir möchten unsere Dankbarkeit an Linköping Mitarbeiter von der schwedischen Verteidigung (FOI) und das Zentrum für Katastrophenmedizin und Traumatologie (KMC) für die freundliche Unterstützung zu verlängern.

Die hier beschriebenen Studie der lokalen Ethik-Richtlinien befolgt und wurde von der regionalen ethische Review Board in Linköping (Genehmigung Nr. 2015/99-31) genehmigt.
1. Einwilligung und Screening
<ol><li>Das Thema Einwilligung einholen.</li>
	<li>Bildschirm nach Kriterien der Inklusion/Exklusion. Hinweis: Einschlusskriterien waren: (i) gesunden Erwachsenen > 18 Jahre alt, (Ii) in der Lage zu verstehen, schriftlichen und mündlichen Informationen und (Iii) bietet mündlichen und schriftlichen Einwilligung. Ausschlusskriterien waren: (i) nicht in der Lage oder nicht Willens, bieten informierte Zustimmung, (Ii) laufende Hauterkrankungen, (Iii) Herz-und Kreislauferkrankungen, (iv) Medikamente, die Gefäßfunktion beeinträchtigen kann. Orale Kontrazeptiva sind erlaubt. Wenn das Thema orale Kontrazeptiva verwendet sollte darauf hingewiesen auf das Thema Protokolldatei, (V) Narbe frei und nicht gequetscht Haut der Stirn, (vi) keine Einnahme von Koffein oder Tabak 2 h vor Beginn der Prüfung und (Vii) keine anstrengenden körperlichen Aktivität mindestens 2 h Pr IOR zu Beginn des Tests.</li>
</ol>(2) Akklimatisierung und Geräte-Setup
<ol><li>Lassen Sie die Testperson für mindestens 20 min in Rückenlage vor Beginn des Tests zu akklimatisieren. Hinweis: Korrekte Positionierung des Motivs und Ausrüstung ist in ergänzenden Abbildung 1 gezeigt.</li>
	<li>
Richten Sie die Kamera-Aufnahme der Rekapillarisierungszeit Tests unter Verwendung der dafür vorgesehenen Software und Digitalkamera (siehe Tabelle der Materialien).
	<ol>
<li>Schließen Sie das USB-Kabel an die Kamera und den Computer und Einstellungen Sie der Kamera auf video-Modus.</li>
		<li>Schalten Sie die Kamera und stellen Sie sicher, dass es an den Computer anschließt.</li>
		<li>Die ferngesteuerte Kamerasoftware starten (siehe Tabelle der Materialien).</li>
		<li>Schalten Sie Umgebungslicht und den Computer-Bildschirm weg von den Messbereich.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Datenerfassung
<ol><li>Klicken Sie auf die "Lebens-Ansicht" (Sic) gedrückt und drücken Sie "Start".</li>
	<li>Schalter zwischen "video" und "TiVi" Modus durch Anklicken des Radio-Buttons (Dies wirkt sich nicht nur die Aufnahme der on-Screen-Präsentation). Sicherstellen Sie, dass ein live-Videostream von der Stirn des Subjekts auf dem Display der Kamera und auf dem Bildschirm sichtbar ist.</li>
	<li>Stellen Sie die Kamera bis zu einer Höhe von ca. 15 cm direkt über das Thema Stirn.</li>
	<li>Stellen Sie sicher, dass der Fokus der Kamera auf "AF" (Autofokus) festgelegt ist.</li>
	<li>Fragen Sie zum Thema, seinen/ihren Kopf noch für die Dauer des Tests zu halten und im Gespräch zu unterlassen. Informieren Sie das Thema, das es OK ist, seine/ihre Augen geschlossen während des Tests mit den Worten: "Bitte legen Sie Ihren Kopf auf das Kissen und halten Sie Ihren Kopf nach wie vor für die Dauer des Tests. Bitte reden Sie nicht während der 20 Sekunden, die der Test dauert. Sie können halten Sie die Augen geschlossen für die ganze Zeit, wenn Sie, das Licht finden zu hell ".</li>
	<li>Bewegen Sie die Kamera während der Aufnahme nicht.</li>
	<li>In das Fenster "Leben" zu finden und klicken Sie auf "HD aufzeichnen" starten eine kontinuierliche Aufzeichnung für 20 S. Hinweis, der die Dauer der Aufnahme (Sekunden), auf dem Kameradisplay; gesehen werden kann die ersten 5 s der Aufnahme ist die normale Kapillarblut Konzentration der Stirn zu erwerben.</li>
	<li>Am Ende der 5 s der Grundlinie aufnehmen, gelten eine Firma blanchieren Druck auf den Messbereich 5 S. Verwendung der Zeigefinger mit einem Kunststoff Teelöffel zwischen die Finger und die Stirn für Druck-Entzerrung und Temperatur-Isolierung.</li>
	<li>Lassen Sie den Druck und zurückziehen Sie schnell des Prüfers Finger und Kunststoff Teelöffel aus dem Messbereich.</li>
	<li>Aufnahme für weitere 10 fortsetzen s, die nachfolgende Schleimhauthyperämie Antwort zu erfassen.</li>
	<li>Beenden Sie durch Klicken auf "Stop" in das Fenster "Leben" Aufzeichnung.</li>
	<li>Sobald die Aufnahme beendet, öffnet ein Fenster zum Speichern und benennen die Datei (im MOV-Format); Wählen Sie einen Ordner und einen Namen für das Video. Trennen Sie die Kamera nicht aus dem Computer, während das Video in den festgelegten Ordner auf dem Computer heruntergeladen wird.</li>
</ol>(4) Datenanalyse
<ol><li>Fahren Sie mit der Durchführung von Analysen und Kurve Bildkonstruktion mit einer speziellen Analysesoftware (siehe Tabelle der Materialien).</li>
	<li>Starten Sie die Analysesoftware durch Doppelklick auf das Desktop-Symbol.</li>
	<li>Sobald die Software, auf dem Hauptbildschirm gestartet wurde wählen Sie "Filmseite."</li>
	<li>Klicken Sie im Fenster "Filmseite" auf "Load Film." Warten Sie, bis die Software zum Hochladen und den Film zu analysieren. Dies kann ein paar Minuten abhängig von der Größe der Videodatei dauern.</li>
	<li>Sobald der Upload und die Analyse des Films beendet ist, klicken Sie auf "Speichern als Bilder" und warten Sie auf die Software, um das Video zu analysieren. Hinweis: Dies erstellt automatisch einen neuen Ordner auf dem Computer mit der Videosequenz, aufgeteilt in einzelne JPEG-Bilder.</li>
	<li>Nach Abschluss die Einteilung des Videos der einzelnen JPEG-Bilder zu finden Sie und wählen Sie "Ernte-Bilder-Seite" im Fenster "Hauptbildschirm".</li>
	<li>Klicken Sie in der "Ernte Bilder Page" auf "Erste Foto" und navigieren Sie zu dem Ordner mit JPEG-Fotos aus dem Video und wählen Sie das erste Foto analysiert werden; die Software wählt automatisch die folgenden Fotos von diesem Batch.</li>
	<li>Klicken Sie im Menü "Bearbeiten" und wählen Sie zwischen runden oder rechteckigen Marker für die Region von Interesse.</li>
	<li>Finden Sie im Fenster "Fotos auswählen" die "tatsächliche Fotobox" und geben Sie den Namen das erste Foto im Stapel, wo der Prüfer Finger aus dem Messbereich vollständig eingezogen ist. Um dieses Foto zu finden, schauen Sie durch die Ordner mit den einzelnen Fotos aus dem Video.</li>
	<li>Wählen Sie eine Region des Interesses durch Klicken und halten die linke Maustaste gedrückt und ziehen Sie einen Kreis oder ein Rechteck im Fenster Foto, das innerhalb der Grenzen des Bereichs blanchiert. Die ausgewählte Region des Interesses wird automatisch auf alle Fotos des Stapels angewendet.</li>
	<li>Klicken Sie im Menü "Datei" und wählen Sie "ROI speichern", um den Speicherort der ausgewählten Region von Interesse für die Zukunft zu retten.</li>
	<li>Klicken Sie auf "Kurve Tracker" und warten Sie, die Software zu analysieren, die Region von Interesse.</li>
	<li>Sobald die Kurve-Tracker-Fenster geöffnet wird, ist die Veränderung der roten Blutkörperchen Konzentration für die ausgewählte Region von Interesse für die Dauer des Tests als Kurve angezeigt. Die On-Screen-Präsentation durch Klicken auf die verschiedenen Radio-Buttons geändert werden kann. Dies beeinflusst nicht die raw-Daten.</li>
	<li>Klicken Sie auf "Daten exportieren" und speichern Sie das Protokoll raw-Daten zur weiteren Analyse.</li>
	<li>Navigieren Sie in der raw-Daten-Niederschrift zu der Spalte mit dem Namen "Intensität TiVi Werte bedeuten." Erzeugen Sie drei neue Spalten neben dieser Spalte für "Bild-Nummer", "total Time" und "Rekapillarisierungszeit Time" ab 1 s, 0 s und 0 s und mit einem addressierte von 1 s, 0,02 s und 0,02 s, beziehungsweise. Hinweis: "Kapillare Nachfüllen Zeitrechnung" korreliert mit der Zeit die anschließende Reaktion auf die Veröffentlichung der erbleichen Druck und startet bei der Mittelwert, der das erste Foto darstellt, wo die Ermittler Finger aus dem Messbereich vollständig eingezogen ist.</li>
	<li>Löschen Sie die Werte zwischen Grundlinie und Rekapillarisierungszeit Zeit, da diese nur Lärm erzeugt durch der Ermittler Zeigefinger und Kunststoff Teelöffel während das blanchieren Manöver enthalten.</li>
	<li>Berechnen Sie einen Mittelwert für die Basismessung (erste 5 s der Aufnahme).</li>
	<li>Den ersten Wert, der entspricht oder übertrifft die berechneten mittleren Ausgangswert und beachten Sie die Zeit in der Spalte "Kapillare Nachfüllen Zeit" zu finden. Diesem Zeitpunkt stellt die "Time to Baseline 1 zurück."</li>
	<li>Die höchste Intensität Mittelwert der Werte nach Druckentlastung erzeugt und beachten Sie den Zeitpunkt in der Spalte "Kapillare Refill Zeit" zu finden. Diesem Zeitpunkt stellt die "Zeit zum Gipfel."</li>
	<li>Finden Sie der zweiten Wert ist kleiner oder gleich der berechneten Mittelwert für die Basismessung und beachten Sie den Zeitpunkt in der Spalte "Kapillare Refill Zeit". Diesem Zeitpunkt stellt die "Zeit Basislinie 2 zurückzukehren."</li>
</ol>

<ol>
	<li>Strehlow, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+identification+of+shock+in+critically+ill+patients.">Early identification of shock in critically ill patients.</a> Emerg Med Clin North Am. 28 (1), 57-66 (2010).</li><li>Advanced Life Support, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Acute Medical Emergencies. , 67-84 (2010).</li><li>Brasel, K. J., Guse, C., Gentilello, L. M., Nirula, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rate:+is+it+truly+a+vital+sign?.">Heart rate: is it truly a vital sign?.</a> J Trauma. 62 (4), 812-817 (2007).</li><li>De Backer, D., Ortiz, J. A., Salgado, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coupling+microcirculation+to+systemic+hemodynamics.">Coupling microcirculation to systemic hemodynamics.</a> Curr Opin Crit Care. 16 (3), 250-254 (2010).</li><li>Mrgan, M., Rytter, D., Brabrand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time+is+a+predictor+of+short-term+mortality+for+adult+patients+admitted+to+a+medical+department:+an+observational+cohort+study.">Capillary refill time is a predictor of short-term mortality for adult patients admitted to a medical department: an observational cohort study.</a> Emerg Med J. 31 (12), 954-958 (2014).</li><li>Advanced Life Support, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Acute Medical Emergencies. , 55-65 (2010).</li><li>Lewin, J., Maconochie, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time+in+adults.">Capillary refill time in adults.</a> Emerg Med J. 25 (6), 325-326 (2008).</li><li>Lobos, A. 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J., Kring, E., Schwarz-Warner, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refill+time+in+the+hands+and+feet+of+normal+newborn+infants.">Capillary refill time in the hands and feet of normal newborn infants.</a> Clin Pediatr (Phila). 38 (3), 139-144 (1999).</li><li>Klupp, N. L., Keenan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+the+reliability+and+validity+of+capillary+refill+time+test.">An evaluation of the reliability and validity of capillary refill time test.</a> The Foot. 17, 15-20 (2007).</li><li>Gorelick, M. H., Shaw, K. N., Baker, M. 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Is it time to fill the gaps?.</a> Med J Armed Forces India. 69 (1), 97-98 (2013).</li><li>Strozik, K. S., Pieper, C. H., Roller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+refilling+time+in+newborn+babies:+normal+values.">Capillary refilling time in newborn babies: normal values.</a> Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 76 (3), F193-F196 (1997).</li><li>Doherty, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sub-epidermal+imaging+using+polarized+light+spectroscopy+for+assessment+of+skin+microcirculation.">Sub-epidermal imaging using polarized light spectroscopy for assessment of skin microcirculation.</a> Skin Res Technol. 13 (4), 472-484 (2007).</li><li>Noguchi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+caffeine+contained+in+a+cup+of+coffee+on+microvascular+function+in+healthy+subjects.">Effect of caffeine contained in a cup of coffee on microvascular function in healthy subjects.</a> J Pharmacol Sci. 127 (2), 217-222 (2015).</li><li>Reus, W. F., Robson, M. C., Zachary, L., Heggers, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+effects+of+tobacco+smoking+on+blood+flow+in+the+cutaneous+micro-circulation.">Acute effects of tobacco smoking on blood flow in the cutaneous micro-circulation.</a> Br J Plast Surg. 37 (2), 213-215 (1984).</li><li>Lenasi, H., Strucl, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+regular+physical+training+on+cutaneous+microvascular+reactivity.">Effect of regular physical training on cutaneous microvascular reactivity.</a> Med Sci Sports Exerc. 36 (4), 606-612 (2004).</li><li>Anderson, B., Kelly, A. M., Kerr, D., Clooney, M., Jolley, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+patient+and+environmental+factors+on+capillary+refill+time+in+adults.">Impact of patient and environmental factors on capillary refill time in adults.</a> Am J Emerg Med. 26 (1), 62-65 (2008).</li><li>John, R. T., Henricson, J., Nilsson, G. E., Wilhelms, D., Anderson, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflectance+spectroscopy:+to+shed+new+light+on+the+capillary+refill+test.">Reflectance spectroscopy: to shed new light on the capillary refill test.</a> J Biophotonics. , (2017).</li><li>Blaxter, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+quasi-continuous+capillary+refill+timing+device.">An automated quasi-continuous capillary refill timing device.</a> Physiological measurement. 37, 83-99 (2016).</li><li>Bordoley, A., Irwin, R., Kalyani, V., MacDonald, C., Standish, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> D1GIT: Automated, temperature-calibrated measurement of capillary refill time. , (2012).</li><li>Kviesis-Kipge, E., Curkste, E., Spigulis, J., Eihvalde, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+analysis+of+skin+capillary-refill+processes+using+blue+LED.">Real-time analysis of skin capillary-refill processes using blue LED.</a> Proc. of SPIE. 771523, (2010).</li><li>Shavit, I., Brant, R., Nijssen-Jordan, C., Galbraith, R., Johnson, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+imaging+technique+to+measure+capillary-refill+time:+improving+diagnostic+accuracy+for+dehydration+in+young+children+with+gastroenteritis.">A novel imaging technique to measure capillary-refill time: improving diagnostic accuracy for dehydration in young children with gastroenteritis.</a> Pediatrics. 118 (6), 2402-2408 (2006).</li><li>Cohen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitor+to+Measure+Dermal+Blood+Flow+in+Critically+Ill+Patients:+Study.">Monitor to Measure Dermal Blood Flow in Critically Ill Patients: Study.</a> International Scholarly Research Notices. 578316, e578316 (2013).</li></ol>

Keine finanzieller Unterstützung von WheelsBridge AB war der Durchführung der Studie beteiligt. Der Autor JH ist von Östergötland County Council beschäftigt aber hat eine Lizenzgebühren Vereinbarung mit WheelsBridge AB. Der senior-Autor CDA hat eine akademische Festanstellung, aber auch eingeschränkte Beteiligung in WheelsBridge AB.

Um die besten Ergebnisse mit dem System zu erhalten, muss durch Umweltfaktoren bedingten Variabilität gesteuert werden. Alle Umgebungslicht muss ausgeschaltet sein. Die Kamera muss in vertikale Ausrichtung mit den Messbereich positioniert werden. Zur Sicherstellung einer konstanten Messbereich Themen nicht bewegen oder sprechen während der Messung. Aus dem gleichen Grund ist die Kamera auf einem Stativ, um Bewegung zu vermeiden und einen konstanten Abstand zum Bereich Messung zu erhalten vorzugsweise montiert. Probande...

Bewertung und Triage der kritisch kranken Patienten Zentren für klassische Vitalzeichen Blutdruck (BP), Herzfrequenz (HF), Atemfrequenz (RR), Sauerstoffsättigung und Körper Temperatur1. Änderungen dieser Parameter erscheinen relativ spät im Zuge der Kreislauf Verschlechterung. Beispielsweise wird eine Abnahme der BP in Blutung, nicht auftreten, bis Blutverlust moderate bis schwere2 wirdund HR-Anstieg auch eine unempfindliche und unspezifische Marker3 kann.
Rekapillarisierungszeit Test (CR-Test) kann einen früheren Hinweis auf beginnende Kreislaufkollaps anbieten, wie das Nachfüllen Zeitrechnung geglaubt wird, um vor der Vitalfunktionen sowie klinische Erscheinungsbild von kalt, Klamm und fleckige Haut1,4 ändern , 5. die Rekapillarisierungszeit Prüfung erfolgt in der Regel durch Anwendung und lassen Sie dann von einem festen blanchieren Druck auf die Haut mit Anzeigedauer (in Sekunden) von der Rückkehr des Bluts zum Bereich blanchiert. Nach den Richtlinien sollte innerhalb von 2 Sekunden nach Veröffentlichung von 5 Sekunden von festem Druck (z.B.durch den Arzt Finger) in die normale gesunde Rückenlage Patienten6Refill auftreten. Die Gründe für den Test ist, dass ein langsamer Nachfüllen Zeitrechnung schlechte Hautdurchblutung, möglich von einem der eine Reihe von kritischen Ereignissen wie Sepsis, Blutverlust, akute Herzinsuffizienz oder Unterkühlung verursacht hinweisen.
Derzeit gibt es keinen Konsens über ein State-Of-The-Art-Verfahren zur Durchführung der CR Test6,7,8,9,10. Streitpunkte sind fehlende Standardisierung der tatsächlichen erbleichen Manöver und die Abhängigkeit von subjektiven (d.h. mit bloßem Auge) Bewertungen von Refill Endpunkt7,9,11. Darüber hinaus gibt es Hinweise darauf, dass Geschlecht CR Zeit12,13 beeinflusst. Die Temperatur, ambient und Haut, ist bekannt, die Rekapillarisierungszeit Zeit beeinflussen, aber inwieweit ist nicht klar. Schließlich ist die Verwendung von verschiedenen Messstellen, peripheren oder zentralen, wahrscheinlich eine weitere Ursache der Variabilität der Ergebnisse mit nur wenige Studien in diesem Bereich14,15.
In der vorliegenden Arbeit werden wir eine optische Bioengineering-System den Verlauf der Rückkehr des Blutes und die anschließende Schleimhauthyperämie Antwort gesehen während des CR-Tests aufgezeichnet. Das System nutzt diffuse Polarisation Spektroskopie zu quantifizieren und zu beschreiben, genauer als mit dem bloßen Auge, der Zeit und natürlich der Rekapillarisierungszeit. Das System besteht aus einer standard-Digitalkamera, ausgestattet mit einem externen Leuchtring mit 92 weiße LEDs und eine eigens entwickelte Software. Das Objektiv und die zwei Polarisationsfilter, orthogonal vor die LEDs angeschlossen blockieren Licht, das direkt von der Hautoberfläche, so dass nur Licht, das in das Gewebe um die Kamera zu erreichen depolarisiert werden hat eingeflossen ist. Dies erzeugt ein "Sub-epidermalen" Image des Gewebes bis zu einer Tiefe von ca. 0,5 mm. Das Bild gliedert sich in die Farbflächen und die rote und grüne Inhalte für jedes Pixel errechnet, erzeugen einen Wert, der die Gewebe-Konzentration der roten Blutkörperchen16entspricht. Im video-Modus, ist die zeitliche Auflösung des Systems 0,02 s.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>TiVi701 Camera</td>
			<td>WheelsBridge AB</td>
			<td>TiVi701 Camera, version 1.5.1</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiVi700</td>
			<td>WheelsBridge AB</td>
			<td>TiVi700 Analysis, version 1.2.9</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Canon EOS 700D</td>
			<td>Canon U.S.A., inc.</td>
			<td>Canon EOS 700D</td>
			<td>Digital SLR Camera</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera stand</td>
			<td>Manfrotto</td>
			<td>681B</td>
			<td>Modified camera stand to hold the digital camera in position</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera stand</td>
			<td>Disa Denmark</td>
			<td>9020B</td>
			<td>Modified camera stand to hold the digital camera in position</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diffuse reflectance spectroscopy: getting the capillary refill test under one's thumb

Die Rekapillarisierungszeit Test wurde im Jahr 1947 Kreislauf Status bei kritisch kranken Patienten schätzen eingeführt. Allgemeinen Leitlinien dieser Mine treten innerhalb von 2 s nach der Veröffentlichung von 5 s von festem Druck (z.B.durch den Arzt Finger) in den normalen gesunden Rückenlage Patienten. Ein langsamer Nachfüllen Zeitrechnung zeigt schlechte Hautdurchblutung, hervorgerufen durch Bedingungen einschließlich Sepsis, Blutverlust, Hypoperfusion und Unterkühlung. Seit ihrer Einführung ist die klinische Nützlichkeit des Tests debattiert worden. Befürworter weisen darauf hin seine Machbarkeit und Einfachheit und behaupten, dass es Veränderungen im vaskulären Status früher als Veränderungen der Vitalparameter wie Herzfrequenz anzeigen kann. Kritiker betonen auf der anderen Seite, dass die mangelnde Standardisierung in wie der Test durchgeführt wird und der höchst subjektiven Beurteilung mit bloßem Auge als auch den Test Anfälligkeit für ambient Faktoren, den klinischen Wert deutlich senkt. Das Ziel der vorliegenden Arbeit ist, den Verlauf der Refill-Veranstaltung im Detail zu beschreiben und potenziell objektiver vorzuschlagen und genauen Endpunkt Werte für die Kapillare Nachfüllen Test mit diffusen Polarisation Spektroskopie.

Dreharbeiten zu den Verlauf der Kapillare Nachfüllen erzeugt Unmengen an Daten nicht möglich, mit bloßem Auge Bewertung zu erhalten. Wir empfehlen hier neue Endpunkte um die Nutzbarkeit des CR-Tests als ein Frühindikator für Verschlechterung im Kreislauf Status weiter zu verbessern. Wir nennen diese Endpunkte: "Baseline", "Null-Blut" (oder "BZ"), "Baseline 1" (oder "tRtB1"), "Time to Peak" oder "Mailen" zurück Der "Baseline"-Wert ergibt sich durch die Berechnung eines Mittelwert al...

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Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

Dieses Protokoll beschreibt, wie die Verwendung von diffusen Polarisation Spektroskopie den klinische Nutzen der Rekapillarisierungszeit Test verbessern kann. Wir empfehlen eine genauere Analyse des Studiengangs Rekapillarisierungszeit bei gesunden Probanden mit diffusen Reflexion Spektroskopie Videos und neuen informatischen Endpunkte.

Diffuse Reflexion Spektroskopie: Immer des Rekapillarisierungszeit Tests unter der Fuchtel

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

diffuse-reflectance-spectroscopy-getting-capillary-refill-test-under

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Medical-Surgical Nursing

Neuroscience

Unit 1

An Overview of the Cardiovascular System: Anatomy, Physiology, Assessment, and Abnormalities

SCIENTISTS IN ACTION

9.0K Aufrufe.  Region Östergötland. Dieses Protokoll beschreibt, wie die Verwendung von diffusen Polarisation Spektroskopie den klinische Nutzen der Rekapillarisierungszeit Test verbessern kann. Wir empfehlen eine genauere Analyse des Studiengangs Rekapillarisierungszeit bei gesunden Probanden mit diffusen Reflexion Spektroskopie Videos und neuen informatischen Endpunkte.

Serie: Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

Imaging Odor-Evoked Activities in the Mouse Olfactory Bulb using Optical Reflectance and Autofluorescence Signals

In the brain, sensory stimulation activates distributed populations of neurons among functional modules which participate to the coding of the stimulus. Functional optical imaging techniques are advantageous to visualize the activation of these modules in sensory cortices with high spatial resolution. In this context, endogenous optical signals that arise from molecular mechanisms linked to neuroenergetics are valuable sources of contrast to record spatial maps of sensory stimuli over wide fields in the rodent brain.
Here, we present two techniques based on changes of endogenous optical properties of the brain tissue during activation. First the intrinsic optical signals (IOS) are produced by a local alteration in red light reflectance due to: (i) absorption by changes in blood oxygenation level and blood volume (ii) photon scattering. The use of in vivo IOS to record spatial maps started in the mid 1980's with the observation of optical maps of whisker barrels in the rat and the orientation columns in the cat visual cortex1. IOS imaging of the surface of the rodent main olfactory bulb (OB) in response to odorants was later demonstrated by Larry Katz's group2. The second approach relies on flavoprotein autofluorescence signals (FAS) due to changes in the redox state of these mitochondrial metabolic intermediates. More precisely, the technique is based on the green fluorescence due to oxidized state of flavoproteins when the tissue is excited with blue light. Although such signals were probably among the first fluorescent molecules recorded for the study of brain activity by the pioneer studies of Britton Chances and colleagues3, it was not until recently that they have been used for mapping of brain activation in vivo. FAS imaging was first applied to the somatosensory cortex in rodents in response to hindpaw stimulation by Katsuei Shibuki's group4.
The olfactory system is of central importance for the survival of the vast majority of living species because it allows efficient detection and identification of chemical substances in the environment (food, predators). The OB is the first relay of olfactory information processing in the brain. It receives afferent projections from the olfactory primary sensory neurons that detect volatile odorant molecules. Each sensory neuron expresses only one type of odorant receptor and neurons carrying the same type of receptor send their nerve processes to the same well-defined microregions of &tilde;100&mu;m3 constituted of discrete neuropil, the olfactory glomerulus (Fig. 1). In the last decade, IOS imaging has fostered the functional exploration of the OB5, 6, 7 which has become one of the most studied sensory structures. The mapping of OB activity with FAS imaging has not been performed yet.
Here, we show the successive steps of an efficient protocol for IOS and FAS imaging to map odor-evoked activities in the mouse OB.

This article presents the protocols of intrinsic optical signals and flavoproteins autofluorescence signals imaging to map odor-evoked activities at the surface of the olfactory bulb in mice.

Imaging Gerüche hervorgerufene Aktivitäten in der Maus Riechhirn mit Optical Reflexions-und Autofluoreszenzsignale

In the brain, sensory stimulation activates distributed populations of neurons among functional modules which participate to the coding of the stimulus. ...

Forschung

Neurowissenschaften

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

Die Maus Forced Swim-Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Tail Suspension Test

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that are expected to affect depression related behaviors. Mice are suspended by their tails with tape, in such a position that it cannot escape or hold on to nearby surfaces. During this test, typically six minutes in duration, the resulting escape oriented behaviors are quantified. The tail-suspension test is a valuable tool in drug discovery for high-throughput screening of prospective antidepressant compounds. Here, we describe the details required for implementation of this test with additional emphasis on potential problems that may occur and how to avoid them. We also offer a solution to the tail climbing behavior, a common problem that renders this test useless in some mouse strains, such as the widely used C57BL/6. Specifically, we prevent tail climbing behaviors by passing mouse tails through a small plastic cylinder prior to suspension. Finally, we detail how to manually score the behaviors that are manifested in this test.

The tail-suspension test is validated as an experimental procedure to assess antidepressant efficacy of drug treatments in mice. Mice are suspended by their tails for six minutes and escape-related behaviors are assessed. We describe procedures used in conducting the tail suspension test.

The Tail Suspension Test-

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to understand the mechanism that promotes neuronal regeneration, an in-depth analysis of the neuronal types that can remodel after injury is needed. Several studies showed that damaged climbing fibers are capable of regrowing also in adult animals1,2. The investigation of the time-lapse dynamics of degeneration and regeneration of these axons within their complex environment can be performed by time-lapse two-photon fluorescence (TPF) imaging in vivo3,4. This technique is here combined with laser surgery, which proved to be a highly selective tool to disrupt fluorescent structures in the intact mouse cortex5-9.
This protocol describes how to perform TPF time-lapse imaging and laser nanosurgery of single axonal branches in the cerebellum in vivo. Olivocerebellar neurons are labeled by anterograde tracing with a dextran-conjugated dye and then monitored by TPF imaging through a cranial window. The terminal portion of their axons are then dissected by irradiation with a Ti:Sapphire laser at high power. The degeneration and potential regrowth of the damaged neuron are monitored by TPF in vivo imaging during the days following the injury.

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Two-photon imaging, coupled to laser nanodissection, are useful tools to study degenerative and regenerative processes in the central nervous system with subcellular resolution. This protocol shows how to label, image, and dissect single climbing fibers in the cerebellar cortex in vivo.

Laser-Nanochirurgie der Kleinhirn-Axone<em&gt; In Vivo</em

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to ...

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of the right type and quantity of food therefore has a major influence on quality of life. Research on feeding behavior focuses on the underlying processes that ensure actual feeding and unravels the role of factors regulating internal energy homeostasis and the neuronal bases of decision-making. The model organism Drosophila melanogaster, with its great variety of genetically traceable tools for labeling and manipulating single neurons, allows mapping of neuronal networks and identification of molecular signaling cascades involved in the regulation of food intake. This report demonstrates the CApillary FEeder assay (CAFE) and shows how to measure food intake in a group of flies for time spans ranging from hours to days. This easy-to-use assay consists of glass capillaries filled with liquid food that flies can freely access and feed on. Food consumption in the assay is accurately determined using simple measurement tools. Herein we describe step-by-step the method from setup to successful execution of the CAFE assay, and provide practical examples to analyze the food intake of a group of flies under controlled conditions. The reader is guided through possible limitations of the assay, and advantages and disadvantages of the method compared to other feeding assays in D. melanogaster are evaluated.

The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster

The CApillary FEeder (CAFE) assay is a simple, budget-friendly, highly reliable method for investigating mechanisms underlying food intake. Used with the highly versatile genetic model organism Drosophila melanogaster, it provides a powerful means of gaining new insights into regulatory mechanisms of food intake.

Die kapillare feeder Assay misst die Nahrungsaufnahme in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

For most animals, feeding is an essential behavior for securing survival, and it influences development, locomotion, health and reproduction. Ingestion of ...

Simultaneous Evaluation of Cerebral Hemodynamics and Light Scattering Properties of the In Vivo Rat Brain Using Multispectral Diffuse Reflectance Imaging

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional multispectral diffuse reflectance imaging system. This system is constructed from a broadband white light source, a motorized filter wheel with a set of narrowband interference filters, a light guide, a collecting lens, a video zoom lens, and a monochromatic charged-coupled device (CCD) camera. An ellipsoidal cranial window is made in the skull bone of a rat under isoflurane anesthesia to capture in vivo multispectral diffuse reflectance images of the cortical surface. Regulation of the fraction of inspired oxygen using a gas mixture device enables the induction of different respiratory states such as normoxia, hyperoxia, and anoxia. A Monte Carlo simulation-based multiple regression analysis for the measured multispectral diffuse reflectance images at nine wavelengths (500, 520, 540, 560, 570, 580, 600, 730, and 760 nm) is then performed to visualize the two-dimensional maps of hemodynamics and the light scattering properties of the in vivo rat brain.

Simultaneous Evaluation of Cerebral Hemodynamics and Light Scattering Properties of the In Vivo Rat Brain Using Multispectral Diffuse Reflectance Imaging

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional multispectral diffuse reflectance imaging system.

Die gleichzeitige Auswertung der zerebralen Hämodynamik und Lichtstreuungseigenschaften der<em&gt; In Vivo</em&gt; Rattenhirn Mit Multispektral Diffuse Reflectance Imaging

The simultaneous evaluation of cerebral hemodynamics and the light scattering properties of in vivo rat brain tissue is demonstrated using a conventional ...

Functional Magnetic Resonance Spectroscopy at 7 T in the Rat Barrel Cortex During Whisker Activation

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy offers the opportunity to measure cerebral metabolite contents in vivo and noninvasively. Thanks to technological developments over the last decade and the increase in magnetic field strength, it is now possible to obtain good resolution spectra in vivo in the rat brain. Neuroenergetics (i.e., the study of brain metabolism) and, especially, metabolic interactions between the different cell types have attracted more and more interest in recent years. Among these metabolic interactions, the existence of a lactate shuttle between neurons and astrocytes is still debated. It is, thus, of great interest to perform functional proton magnetic resonance spectroscopy (1H-MRS) in a rat model of brain activation and monitor lactate. However, the methyl lactate peak overlaps lipid resonance peaks and is difficult to quantify. The protocol described below allows metabolic and lactate fluctuations to be monitored in an activated brain area. Cerebral activation is obtained by whisker stimulation and 1H-MRS is performed in the corresponding activated barrel cortex, whose area is detected using blood-oxygen-level-dependent functional magnetic resonance imaging (BOLD fMRI). All steps are fully described: the choice of anesthetics, coils, and sequences, achieving efficient whisker stimulation directly in the magnet, and data processing.

After checking by blood-oxygen-level-dependent functional magnetic resonance imaging (BOLD fMRI) that the corresponding somatosensory barrel field cortex area (called S1BF) is correctly activated, the main goal of this study is to quantify lactate content fluctuations in the activated rat brains by localized proton magnetic resonance spectroscopy (1H-MRS) at 7 T.

Funktionelle Magnet-Resonanz-Spektroskopie bei 7 T in der Ratte Barrel Cortex während der Whisker-Aktivierung

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy offers the opportunity to measure cerebral metabolite contents in vivo and noninvasively. Thanks to ...

Ex Vivo Pressurized Hippocampal Capillary-Parenchymal Arteriole Preparation for Functional Study

From subtle behavioral alterations to late-stage dementia, vascular cognitive impairment typically develops following cerebral ischemia. Stroke and cardiac arrest are remarkably sexually dimorphic diseases, and both induce cerebral ischemia. However, progress in understanding the vascular cognitive impairment, and then developing sex-specific treatments, has been partly limited by challenges in investigating the brain microcirculation from mouse models in functional studies. Here, we present an approach to examine the capillary-to-arteriole signaling in an ex vivo hippocampal capillary-parenchymal arteriole (HiCaPA) preparation from mouse brain. We describe how to isolate, cannulate, and pressurize the microcirculation to measure arteriolar diameter in response to capillary stimulation. We show which appropriate functional controls can be used to validate the HiCaPA preparation integrity and display typical results, including testing potassium as a neurovascular coupling agent and the effect of the recently characterized inhibitor of the Kir2 inward rectifying potassium channel family, ML133. Further, we compare the responses in preparations obtained from male and female mice. While these data reflect functional investigations, our approach can also be used in molecular biology, immunochemistry, and electrophysiology studies.

The present manuscript details how to isolate hippocampal arterioles and capillaries from the mouse brain and how to pressurize them for pressure myography, immunofluorescence, biochemistry, and molecular studies.

Ex Vivo Druck hippocampal Kapillare-Parenchymale Arteriole Vorbereitung für die funktionelle Studie

From subtle behavioral alterations to late-stage dementia, vascular cognitive impairment typically develops following cerebral ischemia. Stroke and ...

Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large percentage of TBI patients requiring hospitalization. DAI involves widespread axonal damage from shaking, rotation or blast injury, leading to rapid axonal stretch injury and secondary axonal changes that are associated with a long-lasting impact on functional recovery. Historically, experimental models of DAI without focal injury have been difficult to design. Here we validate a simple, reproducible and reliable rodent model of DAI that causes widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

This protocol validates a reliable, easy-to-perform and reproducible rodent model of brain diffuse axonal injury (DAI) that induces widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

Induktion von diffusen axonalen Hirnverletzungen bei Ratten basierend auf Rotationsbeschleunigung

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large ...

Culture of Brain Capillary Pericytes for Cytosolic Calcium Measurements and Calcium Imaging Studies

Pericytes are associated with endothelial cells and astrocytic endfeet in a structure known as the neurovascular unit (NVU). Brain capillary pericyte function is not fully known. Pericytes have been suggested to be involved in capillary development, regulation of endothelial barrier tightness and trancytosis activity, regulation of capillary tone and to play crucial roles in certain brain pathologies.
Pericytes are challenging to investigate in the intact brain due to the difficulties in visualizing processes in the brain parenchyma, as well as the close proximity to the other cells of the NVU. The present protocol describes a method for isolation and culture of primary bovine brain capillary pericytes and their following usage in calcium imaging studies, where effects of agonists involved in brain signaling and pathologies can be investigated. Cortical capillary fragments are allowed to attach to the bottom of culture flasks and, after 6 days, endothelial cells and pericytes have grown out from the capillary fragments. The endothelial cells are removed by gentle trypsinization and pericytes are cultured for 5 additional days before passaging.
Isolated pericytes are seeded in 96-well culture plates and loaded with the calcium indicator dye (Fura-2 acetoxymethyl (AM)) to allow for measurements of intracellular calcium levels in a plate reader setup. Alternatively, pericytes are seeded on coverslips and mounted in cell chambers. Following loading with the calcium indicator (Cal-520 AM), calcium live-imaging can be performed using confocal microscopy at an excitation wavelength of 488 nm and emission wavelength of 510-520 nm.
The method described here has been used to obtain the first intracellular calcium measurements from primary brain capillary pericytes, demonstrating that pericytes are stimulated via ATP and are able to contract in vitro.

Brain capillary pericytes are essential players in the regulation of blood-brain barrier properties and blood flow. This protocol describes how brain capillary pericytes can be isolated, cultured, characterized with respect to cell type and applied for investigations of intracellular calcium signaling with fluorescent probes.

Kultur der Hirnkapillarpericyten für zytosolische Kalziummessungen und Calcium-Imaging-Studien

Pericytes are associated with endothelial cells and astrocytic endfeet in a structure known as the neurovascular unit (NVU). Brain capillary pericyte ...