El análisis por inmunotransferencia

Resumen

Inmunotransferencia (Western Blot) es un ensayo rápido y sensible para la detección y caracterización de proteínas que funciona mediante la explotación de la especificidad inherente en el reconocimiento antígeno-anticuerpo. Este video ofrece protocolos de separación de proteínas, las proteínas en las membranas de secante, immunoprobing y visualización utilizando sustratos cromogénicos o quimioluminiscencia.

Resumen

Inmunotransferencia (Western Blot) es un ensayo rápido y sensible para la detección y caracterización de proteínas que funciona mediante la explotación de la especificidad inherente en el reconocimiento antígeno-anticuerpo. Se trata de la solubilización y separación electroforética de las proteínas, glicoproteínas, o lipopolisacáridos por electroforesis en gel, seguido de la transferencia cuantitativa y unión irreversible a nitrocelulosa, PVDF, o de nylon. La técnica de inmunotransferencia ha sido útil en la identificación de antígenos específicos reconocidos por los anticuerpos policlonales o monoclonales y es altamente sensible (1 ng de antígeno puede ser detectado). Esta unidad dispone de protocolos para la separación de proteínas, las proteínas en las membranas de secante, immunoprobing y visualización utilizando sustratos cromogénicos o quimioluminiscencia.

Protocolo

El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en Current Protocols in Molecular Biology