Para comenzar, encienda el sistema de medición basado en la óptica, la fuente de diodo emisor de luz del microscopio y la computadora. Inicie el programa en la computadora y abra un nuevo archivo haciendo clic en nuevo debajo del archivo en la parte superior izquierda de la pantalla. Haga clic en recopilar, elija experimentos y luego seleccione IPSC y mediciones de calcio.
A continuación, sustituya el medio de cultivo de cardiomiocitos IPSC humano por 0,5 mililitros por pocillo de la solución de Tyrode. En una placa de 24 pocillos. Vuelva a colocar la tapa de la placa con la tapa del control de clima y coloque la placa dentro del sistema de medición basado en la óptica en el dispositivo ajustado a una temperatura de 37 grados centígrados.
Haga clic en abrir buscador de celdas debajo de la barra de herramientas y espere a que aparezca una nueva pantalla. Seleccione el formato de la placa en el tipo de cámara y en la parte superior de la pantalla. Seleccione un pozo y elija un área dentro del pozo para observar la contracción y relajación sincronizadas.
Presione inicio en la parte inferior izquierda de la pantalla. A continuación, haga clic en agregar medida para medir el área. Mida aproximadamente 10 áreas por pocillo en una placa de 24 pocillos.
Solo para mediciones de línea de base, continúe la medición desde el siguiente pocillo. Para probar los compuestos, presione completar una vez que se midan las áreas dentro de un pozo. Abra el instrumento de medición basado en la óptica y agregue el factor estresante o compuesto deseado al pozo.
Después de incubar en el período de tiempo deseado, haga clic en medición automática para realizar mediciones emparejadas en las mismas áreas del pozo donde se realizaron las mediciones de referencia. Presione completar después de que se hayan realizado todas las mediciones. Elija el siguiente pocillo en la parte superior derecha de la pantalla y continúe con las mediciones de todos los pocillos necesarios.
Después de medir todos los pozos necesarios, haga clic en detener y guarde el archivo en la ubicación deseada.
