Para empezar, recoge las muestras e invuélvalas durante 30 a 60 minutos a temperatura ambiente para que se licúen por completo. Luego, mezcle la muestra y cargue siete microlitros en una cámara de recuento de espermatozoides precalentada a 37 grados centígrados. Coloque la cámara en una platina precalentada de un microscopio de luz directa.
A continuación, abra el software de análisis de espermatozoides computarizado y haga clic en mot para ingresar al módulo de motilidad y concentración. Seleccione la configuración que corresponda a las condiciones de los espermatozoides humanos. Analice aleatoriamente 10 campos diferentes por cámara haciendo clic en el botón Analizar.
A continuación, haga clic en Resultados para obtener la concentración y la motilidad de la muestra. Para preparar las células para la respirometría de alta resolución, primero centrifugue las muestras a 400 a 500 G durante 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se extrae el plasma seminal y se resuspenden los espermatozoides en dos mililitros de medio adecuado.
Repita la evaluación de espermatozoides con un software de análisis de espermatozoides asistido por computadora para estudios de concentración de espermatozoides.