Transfiera las rejillas limpias con el lado de la película fenestrada hacia arriba sobre el papel secante húmedo. Sumerja las rejillas hidrofóbicas verticalmente en el agua para evitar que se doblen debido a la tensión del agua. Organice las cuadrículas sumergidas en una matriz cuadrada, manteniéndolas cerca pero no superpuestas.
Llene el canal de recubrimiento de la rejilla con más agua desionizada, asegurándose de que la superficie del agua esté al menos cinco milímetros por encima de las rejillas. Para sacar la película de grafeno MMA del plato, baje lentamente el cubreobjetos en el plato en ángulo, a cierta distancia de la película de grafeno. Coloque el cubreobjetos debajo de la lámina de grafeno MMA y alinee sus bordes paralelos con la lámina.
A continuación, levante la funda verticalmente del agua, llevando consigo la película de grafeno MMA. Transfiera la película de grafeno MMA al comedero bajando el cubreobjetos en el agua en un ángulo de 45 grados para que la película se desprenda del cubreobjetos y flote en la superficie del agua. Coloque la película de grafeno MMA sobre las rejillas antes de que el nivel del agua disminuya.
Con una pipeta Pasteur cuya punta se ha derretido y se ha cerrado, manipule con cuidado la posición de la película de grafeno MMA. Con una jeringa, baje lentamente el nivel del agua de modo que la película de grafeno MMA aterrice perfectamente en las rejillas y cubra completamente sus superficies. Con un par de pinzas limpias y secas, levante el papel secante que sujeta las rejillas a una placa de Petri limpia y sin polvo.
Coloque la base del bloque portarejillas TEM de sujeción en la parte inferior de la primera placa de cristalización que contiene 200 mililitros de acetona fresca. Individualmente, transfiera cada rejilla con el lado de MMA hacia arriba desde el papel secante a un hueco en el bloque portarejillas. Cubra el plato con papel de aluminio y agite suavemente en una coctelera orbital durante 30 minutos.
Asegure las rejillas colocando la tapa metálica en el bloque de soporte de rejilla. Luego, con un tenedor doblado o unas pinzas largas, levante con cuidado el bloque del plato y colóquelo en el fondo del segundo plato que contiene 200 mililitros de acetona fresca. Después de quitar la tapa del bloque, agítelo suavemente en un agitador orbital durante 30 minutos.
Vuelva a colocar la tapa en el bloque portarejillas y transfiérala al plato que contiene 200 mililitros de alcohol isopropílico. Retire la tapa antes de agitar suavemente durante 20 minutos. Transfiera las rejillas a una pequeña placa de Petri de vidrio cubierta con papel secante y seque al aire las rejillas durante 10 minutos.
En los modos de difracción TEM, las rejillas EM cubiertas con una monocapa de grafeno muestran picos de Bragg correspondientes a la red hexagonal del grafeno. Las rejillas de grafeno tienen un efecto concentrador en una muestra, como se observa al comparar la apoferritina aplicada a rejillas de oro sagrado con y sin el soporte de grafeno. Una transformada rápida de Fourier de la micrografía crioEM de apoferritina en rejillas de oro cubiertas de grafeno también mostró picos de Bragg correspondientes a la red hexagonal de grafeno.
