Fabricación de rejillas monocapa recubiertas de grafeno para criomicroscopía electrónica

En la actualidad, la conservación óptima de las muestras biológicas es un reto importante en la obtención de estructuras CryoEM de alta resolución. Durante el proceso de preparación de la muestra, las muestras se exponen a la interfaz hidrofóbica aire-agua, que tiene efectos desnaturalizantes en las muestras y puede hacer que las muestras estables adopten una orientación preferencial en el hielo, lo que impide la determinación de la estructura de alta resolución. El recubrimiento de las rejillas CryoEM con una fina capa de carbono similar al óxido de grafeno blando se ha utilizado comúnmente para abordar problemas relacionados con las interacciones con la interfaz aire-agua.

Sin embargo, estas capas a menudo aumentan el ruido de fondo en nuestras imágenes, lo que compromete las resoluciones de nuestra estructura. El recubrimiento de la rejilla con una monocapa de grafeno logra una protección similar sin introducir un ruido de fondo significativo. El uso de rejillas CryoEM recubiertas de grafeno puede ayudar a superar los problemas relacionados con las interacciones con la interfaz aire-agua, sin embargo, las rejillas de grafeno comerciales son costosas y muchos laboratorios consideran que las rejillas de grafeno son demasiado complicadas de preparar internamente.

Los investigadores en el campo de CryoEM ahora pueden usar este protocolo paso a paso para reproducir docenas de grafenos de alta calidad completamente producidos en un día.