Comience por preparar alícuotas de células tumorales KPC singénicas a la concentración requerida. Guarde esta suspensión celular en una jeringa de insulina con hielo. A continuación, transfiera un ratón anestesiado a una campana quirúrgica estéril y colóquelo en una posición de decúbito lateral derecho parcial.
Asegure las extremidades con cinta adhesiva. Esteriliza el abdomen del ratón con un antiséptico. Use fórceps y tijeras castroviejas para hacer una incisión en la piel subcostal izquierda de 10 a 15 milímetros de largo.
Controle la hemostasia según sea necesario mediante el uso de hisopos de algodón. Use una pluma de cauterización para cauterizar los vasos. A continuación, divida el músculo subyacente para entrar en el peritoneo.
Exteriorice el páncreas y el bazo con hisopos de algodón estériles para evitar daños en los tejidos. Extienda el páncreas hacia afuera para evitar que se pliegue. Identificar el punto de inyección del tumor en el cuerpo o en la cola del páncreas.
Después de colocar cuidadosamente el páncreas, sostenga el tejido con pinzas e inserte la punta de la jeringa de insulina unos cuatro o cinco milímetros con el lado biselado hacia arriba. Luego, inyecte la solución de células tumorales lentamente. Una inyección exitosa será evidente por la formación de una pequeña burbuja.
Concluya el procedimiento devolviendo con cuidado el páncreas al abdomen, asegurándose de no alterar la burbuja. Después de cerrar el sitio de la incisión, regrese al ratón a una jaula limpia colocada debajo de una lámpara de calentamiento. Administre antibióticos en el agua potable para prevenir cualquier infección.
Deje que el tumor se desarrolle durante un período de 10 a 14 días hasta que sea palpable a través de la pared abdominal.