Comience por preparar dos titulares de retención. Use alicates de alambre liviano y un alambre australiano de 0.014 pulgadas para hacer un bucle helicoidal. Luego, prepare resortes de acero inoxidable personalizados y corte el resorte en una longitud adecuada.
También prepare un alambre australiano recto o un alambre de acero recto de siete milímetros de longitud y corte dos trozos de papel con diámetros de dos milímetros para usarlos como barreras. A continuación, coloque un ratón anestesiado en la mesa de operaciones y retire con cuidado el pelaje de la parte superior de la cabeza con crema depilatoria o una afeitadora. A continuación, desinfecte el cuero cabelludo del ratón utilizando rondas alternas de yodoformo y alcohol al 75%.
Coloque el mouse con la cabeza en la parte superior y use cintas quirúrgicas para fijar las extremidades en la mesa de operaciones. Ahora, use unas tijeras quirúrgicas para realizar un colgajo arqueado a lo largo del cuero cabelludo cerca del cuello del ratón, exponiendo completamente la sutura sagital y el cráneo circundante. A continuación, fije el colgajo del cuero cabelludo con una sutura 6-0 en la mesa de operaciones.
Secar el cráneo y grabarlo con ácido fosfórico al 37% durante 20 segundos. A continuación, utilice solución salina normal para limpiar el grabado ácido. Coloque los dos soportes a ambos lados de los huesos parietales, a tres milímetros de las suturas sagitales y péguelos con un adhesivo fotopolimerizable.
A continuación, vuelva a colocar el colgajo del cuero cabelludo. Etiquete la posición de los soportes y corte dos pequeños agujeros en el cuero cabelludo en las posiciones correspondientes. Restablezca el cuero cabelludo con colgajo pasando simultáneamente los pequeños bucles a través de los orificios para exponer la superficie de la piel.
Para instalar el resorte y el alambre guía, corte el resorte un milímetro más largo que la distancia entre los dos soportes. Comprima el resorte de presión y colóquelo entre las pequeñas bobinas a ambos lados. Pase el alambre de acero inoxidable a través de las pequeñas bobinas y el resorte y suelte el resorte para obtener un empuje inicial de aproximadamente 30 G.
A continuación, coloque dos trozos de papel entre el resorte y los soportes y péguelos con un adhesivo fotopolimerizable para colocar barreras en ambos extremos del resorte. Después de la expansión, se utilizó micro TC para visualizar los cambios en la sutura craneal. En comparación con los controles, la sutura craneal se expandió gradual y significativamente después de aplicar fuerza durante un día y aparecieron protuberancias óseas esponjosas en el borde óseo después del quinto día.
Además, la visualización de la mineralización mediante el método de doble etiquetado, mostró que la carga de fuerza activó significativamente la osteogénesis. Se observó hueso recién mineralizado después de siete días, lo que indica el proceso de remodelación ósea después de la expansión de la sutura.
