Para empezar, incuba los huevos de gallina fertilizados en una incubadora humidificada a 38 grados centígrados. Luego, coloque un embrión de pollo de etapa 28 a 32 en una placa de Petri de 60 milímetros llena de HBSS. Después de diseccionar la piel y la cabeza del embrión dorsal, tire suavemente de las yemas de las extremidades para reposicionar el lado ventral del cuerpo hacia abajo.
Ahora, a lo largo de los dos lados del cuerpo del embrión, haga una incisión anterior a posterior. Agarre las yemas de las extremidades longitudinalmente con un par de pinzas para estabilizar el cuerpo. Use unas pinzas de relojero para pelar cuidadosamente la piel desde el cuello hasta la región de la cola.
Use tijeras afiladas para eliminar delicadamente los tejidos subcutáneos restantes que aún estén adheridos a la piel pelada y alise los bordes de la piel. A continuación, agregue dos mililitros de DMEM suplementado a cada pocillo de un plato de seis pocillos. Después de agregar antibióticos a los pocillos, coloque un inserto de cultivo de tejido estéril dentro del pocillo, asegurándose de que el medio rodee el exterior del inserto de cultivo.
A continuación, coloque la piel sobre una espátula mientras se sumerge en HBSS para evitar arrugas y pliegues. Una vez hecho esto, transfiera la piel extirpada a un plato que contenga HBSS. Deslice lentamente la piel de la espátula sobre el inserto de cultivo sin doblar.
Con una pipeta de 200 microlitros, elimine el exceso de HBSS del inserto. Finalmente, incubar los cultivos de explantes de piel a 37 grados centígrados con una mezcla de 5% de dióxido de carbono y 95% de aire. Reemplace el medio cada dos días.
Los primordios de las plumas se desarrollaron en yemas cortas después de dos días de cultivo. y se desarrollaron largos brotes de plumas después de cuatro días en cultivo. Las placodas dérmicas estaban más maduras en la línea media que en los lados.
