Formación de crestas neurales a partir de células madre pluripotentes humanas para la investigación del sistema nervioso entérico

Para inducir la formación de la cresta neural, reemplace el medio de mantenimiento del cultivo de células madre pluripotentes humanas con 200 microlitros de medio A por centímetro cuadrado de la superficie del pocillo. Incubar el cultivo bajo un 5% de suplementación de dióxido de carbono a 37 grados centígrados durante dos días. Aspire suavemente el medio de las células de confluencia del 100% que contienen pocillo y luego pipetee unos 200 microlitros de medio B por centímetro cuadrado de la superficie del pocillo.

Al cuarto día, alimente las células con 200 microlitros de B medio por centímetro cuadrado de la superficie del pozo. Incube las células durante dos días más, luego reemplace el medio B con 400 microlitros por centímetro cuadrado de medio C.