Cultivo hidropónico de plántulas de Arabidopsis thaliana para inoculaciones bacterianas

Para preparar el medio de cultivo para las plántulas de Arabidopsis Thaliana, mezcle medio Murashige y Skoog o MS de concentración media con 2% de sacarosa y 0,9% de agar. Después de la esterilización, vierta el medio en una placa de Petri cuadrada asegurándose de evitar el secado al aire para mantener la humedad. Sumerja las semillas de Arabidopsis en un tubo de microcentrífuga de dos mililitros que contenga un mililitro de agua estéril a cuatro grados centígrados durante más de 12 horas.

A continuación, esterilizar las semillas con un mililitro de solución de hipoclorito de sodio al 2% durante dos minutos. Lave bien las semillas seis veces con agua estéril para eliminar la solución de hipoclorito de sodio. Con una punta estéril de un mililitro, siembre las semillas en la placa de agar MS.

Selle la placa de Petri con cinta médica transpirable y colóquela verticalmente en una incubadora ligera durante una semana a 28 grados centígrados con una humedad entre el 40 y el 60%Haga agujeros de cinco milímetros en un colador de células de tamaño de poro de 40 micras y esterilícelo a 115 grados centígrados durante 30 minutos. Después de dibujar, trasplante tres plantas de A thaliana de siete días de edad a través de los orificios de un colador de células y colóquelas en una placa de seis pocillos que contenga tres mililitros de medio MS de concentración media con 0.5% de sacarosa.