Para comenzar, tome un calibrador electrónico Vernier, coloque su mandíbula exterior en el punto medio del borde exterior de la oreja y extiéndala hacia el canal auditivo. Mida y registre el grosor en dos tercios y un punto medio a lo largo de la línea. Luego, inclina la cabeza de la rata hacia un lado, orientando la oreja hacia arriba.
Aplique 50 microlitros de ácido oleico de manera uniforme en los lados ventral y dorsal de la oreja, una vez al día, durante 25 días. Con una jeringa de un mililitro equipada con una aguja de calibre 34 o 36, inyecte 50 microlitros de suspensión de cutibacterium acnes por vía intradérmica en la superficie ventral del oído. El día 25, mida y registre el grosor de las orejas.
Después de cortar las orejas de la rata sacrificada, perfora agujeros de tamaño fijo en las orejas con un taladro de anillo de ocho milímetros. Después de preparar y teñir las secciones de la oreja, obsérvelas bajo un microscopio óptico. Registre los cambios patológicos para la evaluación de seguimiento por parte de un patólogo y asigne puntuaciones a estos cambios de acuerdo con la tabla que se muestra aquí.
Las orejas en los grupos de ácido oleico y ácido oleico con cutibacterium acnes mostraron engrosamiento, induración, eritema, escamas y comedones con sangrado ocasional por rascado. El análisis histopatológico reveló paraqueratosis, hiperqueratosis e hipertrofia en los grupos ácido oleico y ácido oleico con cutibacterium acnes. La puntuación patológica indicó un aumento de la gravedad en estos grupos en comparación con el grupo control.
La inmunohistoquímica mostró mayor expresión de TNF alfa en la dermis de los grupos cutibacterium acnes, y de ácido oleico con cutibacterium acnes.
