Este trabajo fue financiado por el Programa de la Comunidad Europea Séptimo Programa Marco (FP7/2007-2013) en virtud de acuerdo de subvención n º 201024 y n º 202213 (Red European Stroke). La financiación adicional fue dado por el Bundesministerium für Bildung und Forschung (Centro de Investigación de Carrera de Berlín), y la Deutsche Forschungsgemeinschaft (Exzellenzcluster NEUROCURE). Los autores desean agradecer a Mareike Thielke (Dep. de Neurología Experimental, Charité de Berlín) por el apoyo durante la operación y Elke Ludwig (Servicios Charité Video) para la producción de la animación.

Para garantizar una alta calidad y reproducibilidad, se recomienda el uso de procedimientos operativos estándar (SOP). En este video, publicado como SOP desarrollados y utilizados en nuestro laboratorio se aplican 1. 1. Oclusión de la Arteria Cerebral Media <ol><li> Los ratones se anestesiaron con un régimen adecuado de anestesia en consultar con el personal veterinario. (Ejemplo, la inducción con 1,5 - 2% isoflurano y el mantenimiento de 1,0 a 1,5% isoflurano en 2 / 3 de N2O y 1 / 3 O2 usando un vaporizador). <ol><li> La temperatura corporal de los ratones se mantiene en 36,5 ° C ± 0,5 ° C durante la cirugía con una placa calefactora. Una plataforma de información calentamiento controlado, que calienta de acuerdo a la temperatura rectal del ratón, es muy recomendable. </li><li> La desinfección de la piel y la piel circundante con un agente apropiado (por ejemplo, 70% de alcohol etílico) y secarlo después. </li></ol></li><li> Una incisión de línea media del cuello se realiza y los tejidos blandos se separan. </li><li> La arteria carótida común izquierda (ACCI) se diseca cuidadosamente libre de los nervios que rodean (sin dañar el nervio vago) y la ligadura se realiza mediante cadena de 6.0/7.0. Cadena de 5.0 también se puede utilizar. </li><li> La arteria carótida externa izquierda (LECA) se separa y un segundo nudo se hace. </li><li> A continuación, la arteria carótida interna izquierda (LICA) está aislado y un nudo se prepara con un filamento de 6,0. </li><li> Después de obtener la buena vista de la arteria carótida interna izquierda (LICA) y la arteria izquierda pterigopalatina (LPA), ambas arterias se recortan, con un clip microvascular. </li><li> Un pequeño agujero se corta en el LCCA antes de que se bifurca a la LECA y el LICA. Un monofilamento hecha de nylon recubierto de 8,0 con la mezcla de endurecedor de silicio (ver más abajo) se introduce en la LICA, hasta que se detenga en el clip. La atención tiene que ser pagado de no entrar en la arteria occipital. (Figura 1) </li><li> Las arterias cortadas se abren al mismo tiempo que el filamento se inserta en el LICA para ocluir el origen de las TCI en el polígono de Willis. </li><li> El tercer nudo en la LICA está cerrada para fijar el filamento en su posición. </li><li> Los ratones que reciben solución salina 0,5 ml por vía subcutánea como la reposición de volumen. Para aliviar el dolor, gel de lidocaína es de aplicación tópica en la herida. </li><li> Si la reperfusión se pretende, ratones estancia para 30 a 90 min de oclusión en una jaula climatizada, la herida puede ser cerrada con un clip de sutura pequeños. Después, un segundo se lleva a cabo la anestesia, el tercer nudo en el ICA es momentánea abre y retira el filamento. </li><li> Las suturas restantes se reducen y la piel se adapta con una sutura quirúrgica. </li><li> Todos los animales reciben una reposición segundo volumen como se describió anteriormente. </li><li> Los animales son puestos en una jaula climatizada durante dos horas para controlar la temperatura corporal. <ol><li> Los animales deberán ser controlados diariamente después de la cirugía para detectar signos de malestar. Los ratones pueden mostrar una pérdida de peso después de cirugía. Ellos reciben el puré en un plato de petri-colocado en el suelo para promover la alimentación. La comida se sustituye al día durante siete días. </li></ol></li></ol> 2. Sham Operación <ol><li> Para las operaciones de simulacro de los filamentos se inserta la oclusión del TC y se retira de inmediato para permitir la reperfusión inmediata (1,8). La siguiente operación es idéntica a la realizada en los animales sometidos a isquemia cerebral (1.9-1.14), incluyendo un segundo anestesia. </li></ol> 3. Preparación del filamento <ol><li> Esterilidad del filamento debe ser considerado. El uso de equipo esterilizado, así como un manejo adecuado de los filamentos después es un requisito previo para una intervención quirúrgica estéril. Desinfección del filamento es difícil, ya que muchos de los métodos de esterilización común puede empeorar la calidad de los filamentos. Sin embargo, los métodos tales como la radiación, por ejemplo, con la luz ultravioleta o los rayos γ, o la esterilización química, por ejemplo, con gases altamente reactivos, como el óxido de etileno, son aplicables. </li><li> 8,0 de filamento de nylon se corta en trozos de 11 mm bajo el microscopio </li><li> La punta del filamento se debe cubrir por completo y de manera uniforme sobre una longitud de 8 mm con una mezcla de endurecedor Xantopren M mucosa y activador de NF Optosil </li></ol> 4. Resultados representante Dependiendo de la duración de la restricción del flujo sanguíneo, motor diferente y el resultado déficits de comportamiento. Tanto a los 30 y 60 minutos de isquemia cerebral, los animales en la mayoría de los casos presentan una menor resistencia a empuje lateral y circular debido a la perturbación en la locomoción. Lesiones más leves se manifiestan como una posición flexor en la parte delantera limbs. Estos signos fácilmente observables se puede utilizar como un valor básico para el éxito de la operación 2. Morfológicamente la lesión puede ser evaluado utilizando la histología o la resonancia magnética (MRI). Sesenta minutos de oclusión de la arteria cerebral media produce pannecrosis tejido en un área que incluye tanto el cuerpo estriado y el neocórtex, mientras que 30 minutos de isquemia causar la muerte celular neuronal principalmente limitada en el cuerpo estriado. 3 (Figura 2) En términos de volumen del infarto, esperamos que una desviación estándar inferior al 30% en un conjunto de operaciones. La mortalidad depende del tiempo de la oclusión con alrededor del 5% después de 30 minutos de isquemia y 10 - 20% después de 60 min. Otra posibilidad de mínima invasión es el uso de la flujometría láser Doppler (LDF) durante la operación, lo que permite un control directo de su éxito. En un animal, la reducción de 10 a 20% de los valores preocclusion indica claramente la inducción exitosa de la isquemia cerebral focal 4 Sin embargo, LDF no se puede utilizar como un método para realizar comparaciones entre individuos, ya que LDF sólo pueden medir los cambios cuantitativos (en porcentajes) de la sangre. flujo dentro de un volumen de muestra de tejido pequeño y limitado. No da información sobre la extensión espacial de la reducción del flujo sanguíneo. 5 Existen varias pruebas para evaluar aspectos del comportamiento después del accidente cerebrovascular, incluyendo análisis de la marcha 6,7, rotarod 8, Polo prueba de 9,10, prueba de eliminación de adhesivos 11,12, 13,14 prueba de escalera, prueba de escalera de mano 15,16 y laberinto de Morris 17. En todas estas pruebas, los ratones sometidos a MCAO realizar con menos éxito que los animales control. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Esquema de la arquitectura del barco que irrigan el cerebro (que se muestra en el fondo) en el ratón. Las diferentes cepas pueden mostrar variaciones, por ejemplo, la arteria occipital a veces sale de la arteria carótida interna. <img src="/files/ftp_upload/2423/2423fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Representación esquemática de las lesiones cutáneas típicas después de diferentes tiempos de reperfusión en el próximo modelo de MCAO. En el centro, el curso típico de la actividad funcional y el flujo sanguíneo cerebral después de MCAO se muestran. (MCAO: la arteria cerebral media oclusión, LDF: láser de medición de flujo Doppler)

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R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Good+laboratory+practice:+preventing+introduction+of+bias+at+the+bench.">Good laboratory practice: preventing introduction of bias at the bench.</a> Stroke. 40, 50-52 (2009).</li><li>Group, S. T. A. I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+standards+regarding+preclinical+neuroprotective+and+restorative+drug+development.">Recommendations for standards regarding preclinical neuroprotective and restorative drug development.</a> Stroke. 30, 2752-2758 (1999).</li></ol>

Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, Berlín, Alemania.

El modelo de la transitoria, oclusión proximal MCA 18,19 presentados aquí imita uno de los tipos más comunes de accidente cerebrovascular isquémico en pacientes 20. Basado en tiempos de reperfusión variable, el modelo ofrece diferentes grados de daños que van desde un ataque isquémico transitorio (TIA) a las grandes infartos, incluidas las partes más importantes del hemisferio isquémico. Esto permite al investigador para estudiar los diferentes mecanismos fisiopatológicos después del accidente cerebrovascular 20,21. La cirugía se puede realizar en un corto período de tiempo y produce lesiones altamente reproducible. Sin embargo, esto requiere un control exhaustivo de los factores de confusión. 22 Las pequeñas diferencias en la técnica de la operación puede dar cuenta de diferentes efectos en el infarto. 23,24 Además, debido a las variaciones en la anatomía vascular cerebral, diferentes cepas de ratón muestran un resultado diferente. 25,26 Cuerpo la temperatura afecta el daño neurológico, con hipotermia conduce a lesiones más pequeñas 27 y la hipertermia a la más grave déficit. 28 En consecuencia, el control de la temperatura y el mantenimiento es muy relevante en este modelo. 29 Además, la presión arterial y los gases en sangre son factores de confusión importantes de los resultados y la necesidad de ser controlados 30,31. El uso de métodos invasivos rápido y un mínimo (la medición no invasiva la presión arterial, conveniente y fácil de sitios web accesibles de extracción de sangre) se recomienda. La elección de la anestesia también es muy importante, ya que algunos pueden tener efectos neuroprotectores, y / o ser vasodilatadores, como por ejemplo isoflurano. 32 Por consiguiente, la exposición a la anestesia debe ser lo más breve posible y estandarizados. Se excluyen los animales que han sido sometidos a cirugía por más de 15 min. El rasurado del área quirúrgica produce microabrasions y la inflamación y libera fragmentos de pelo. Esto puede aumentar la inflamación y promover la infección local, que puede repercutir en la fisiopatología accidente cerebrovascular. Las condiciones de vivienda, especialmente el uso de enriquecimiento, puede afectar el resultado tiempos y debe ser normalizada y se describe en los informes de investigación. 6,33,34 El uso de enriquecimiento ambiental y su efecto sobre la reproducibilidad es un tema de discusión. 35 Otro factor de confusión importante es la el riesgo de ictus inducido por la infección, especialmente después de largos tiempos de isquemia de 36 años, lo que lleva a la morbilidad adicional y aumento de la mortalidad 37,38. Como las infecciones se vuelven sintomáticos en alrededor de 3 a 5 días, esto tiene importantes consecuencias para el seguimiento a largo plazo en estos modelos. Para producir resultados relevantes para el desarrollo de nuevas estrategias de tratamiento para el accidente cerebrovascular, la normalización y control de calidad es muy importante en la investigación preclínica traslacional carrera 39 &quot;Buenas Prácticas de Laboratorio&quot; 40,41 mandatos.: <ol><li> una descripción adecuada y detallada de los animales utilizados; </li><li> Cálculo del tamaño muestral y la información sobre la magnitud del efecto esperado; </li><li> criterios de inclusión y exclusión, establecido antes del estudio; </li><li> aleatorización de la asignación a los grupos; </li><li> ocultamiento de la asignación con respecto a los investigadores; </li><li> informes animales excluidas del análisis; </li><li> evaluación cegada de los resultados; </li><li> informar los posibles conflictos de interés y financiamiento del estudio. </li></ol>

<table><tbody><tr><td>Surgical scissors (skin cut)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>2 Dumont forceps (Medical #5 straight tip)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>Spring scissors (according to Vannas)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Applying forceps for micro clamps</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>Micro vascular clamp (e.g. S&amp;amp;G B1-V)</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td>Also Serrefine possible</td></tr><tr><td>2 Hemostats according to Hartmann</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder (according Olsen-Hegar or other)</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>Standard anatomical forceps (for wound closure)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11000-12</td><td></td></tr><tr><td>5/0 sutures </td><td>Suprama</td><td></td><td>for vascular ligatures</td></tr><tr><td>6/0 sutures </td><td>Suprama</td><td></td><td>for skin suture, 5/0 also possible</td></tr><tr><td>Lidocaine (e.g. Xylocain Gel 2%)</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>or other local pain relief</td></tr><tr><td>Dissecting microscope (stereo microscope), magnification 6x to max. 40x</td><td>Leica Zeiss</td><td>MZ6 Stemi2000C</td><td></td></tr><tr><td>Cold light source</td><td>Leica Microsystems</td><td>KL1500</td><td></td></tr><tr><td>Temperature feedback controlled heating pad system</td><td>Fine Science Tools</td><td>21052-00</td><td>With mouse pad and small probe</td></tr><tr><td>Anaethesia system for isoflurane</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Veterinary Recovery Chamber</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td>Heated cage</td></tr><tr><td>8.0 nylon filament</td><td>Suprama</td><td>TEL181005</td><td>for coating</td></tr><tr><td>Scalpel</td><td></td><td></td><td>For cutting filament in pieces</td></tr><tr><td>Ruler</td><td></td><td></td><td>To cut correct length of filament</td></tr><tr><td>Xantopren M Mucosa</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Activator Universal Plus</td><td>Heraeus Instruments</td><td></td><td>Optosil - Xantopren</td></tr><tr><td>2 Dumont forceps (Medical #5 straight tip)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-20</td><td></td></tr><tr><td>A soft underlay for storing and grasping the uncoated filaments</td><td></td><td></td><td>e.g. swabs, foam, &amp;#8230;</td></tr><tr><td>Receptacle for new build filaments</td><td></td><td></td><td>e.g. petri dish, flexible foam,&amp;#8230;</td></tr></tbody></table>

modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model

El accidente cerebrovascular es una de las causas más frecuentes de muerte y discapacidad en los adultos, especialmente en los países altamente desarrollados. Sin embargo, las opciones de tratamiento hasta la fecha son muy limitados. Para satisfacer la necesidad de nuevos enfoques terapéuticos, la investigación el accidente cerebrovascular experimental emplea con frecuencia modelos de roedores de la isquemia cerebral focal. La mayoría de los investigadores utilizan la oclusión permanente o transitoria de la arteria cerebral media (ACM) en ratones o ratas. Oclusión proximal de la arteria cerebral media (ACM) a través de la técnica de sutura intraluminal (llamado filamento o modelo de sutura) es probablemente el modelo más utilizado en la investigación de accidente cerebrovascular experimental. El modelo intraluminal MCAO ofrece la ventaja de inducir isquemia transitoria o permanente reproducible del territorio de la ACM de una manera relativamente no invasiva. Enfoques intraluminal interrumpir el flujo de sangre de todo el territorio de esta arteria. Filamento por lo tanto la oclusión proximal de detención del flujo de las arterias lenticulo-estriados, que abastecen a los ganglios basales. Filamento de la oclusión de los resultados en las lesiones de MCA reproducible en la corteza y el cuerpo estriado y puede ser permanente o transitorio. Por el contrario, los modelos de inducción distal (a la ramificación de las arterias lenticulo-estriado) MCA oclusión suele repuesto el cuerpo estriado y consisten principalmente en la corteza cerebral. Además, estos modelos requieren craniectomía. En el modelo mostrado en este artículo, un filamento de silicio recubierto se introduce en la arteria carótida común y avanzado a lo largo de la arteria carótida interna en el Círculo de Willis, donde bloquea el origen de la arteria cerebral media. En los pacientes, las oclusiones de la arteria cerebral media se encuentran entre las causas más comunes de accidente cerebrovascular isquémico. Desde distintos intervalos de isquemia puede ser elegido libremente en este modelo en función del punto en el tiempo de la reperfusión, lesiones isquémicas, con diferentes grados de severidad se puede producir. Reperfusión mediante la eliminación de los filamentos de oclusión al menos parcialmente, los modelos de la restauración del flujo de sangre después de espontáneo o terapéutico (tPA) lisis de un coágulo de tromboembólicos en los seres humanos. En este video se presenta la técnica básica, así como los escollos más importantes y los factores de confusión que puede limitar el valor predictivo de este modelo.

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Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Oclusión filamentosa de la arteria cerebral media es un modelo común para el estudio de ACV isquémico en los ratones.

Modelado de accidente cerebrovascular en ratones - Oclusión arteria cerebral media con el modelo de filamento

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

91.5K vistas.  Center for Stroke Research Berlin, Charité Universitätsmedizin. Oclusión filamentosa de la arteria cerebral media es un modelo común para el estudio de ACV isquémico en los ratones.

Video: Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

Modelo de ratón de la oclusión arteria cerebral media

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Investigación

Medicina

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United States in 20091,2. The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was developed by Koizumi4 in 1986 to simulate this 
impactful human pathology in the rat. A modification of the MCAO method was later presented by Longa3. Both techniques have been widely used to identify 
molecular mechanisms of brain injury resulting from ischemic stroke and potential therapeutic modalities5. This relatively noninvasive method in rats has been 
extended to use in mice to take advantage of transgenic and knockout strains6,7. To model focal cerebral ischemia, an intraluminal suture is advanced via 
the internal carotid artery to occlude the base of the MCA. Retracting the suture after a specified period of time mimics spontaneous reperfusion, but the 
suture can also be permanently retained. This video will be demonstrating the two major approaches for performing intraluminal MCAO procedure in mice in a 
stepwise fashion, as well as providing insights for potential drawbacks and pitfalls. The ischemic brain tissue will subsequently be stained by 
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to evaluate the extent of cerebral infarction8.

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is the most frequent used model among experimental ischemic stroke models. Here we will demonstrate the entire model in detail with the guide of Laser Doppler flowmetry, and its representative results.

Intraluminal la arteria cerebral media de oclusión (MCAO) Modelo para el ictus isquémico con Orientación flujometría láser Doppler en ratones

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

Carrera Modelado en ratones: Coagulación permanente de la arteria cerebral media Distal

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ischemic in origin and occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA). Currently the only Food and Drug Administration (FDA) approved drug for the treatment of this devastating disease is tissue plasminogen activator (tPA). However, tPA has a small therapeutic window for administration (3 - 6 hr), and is only effective in 4% of the patients who actually receive it. Current research focuses on understanding the pathophysiology of stroke in order to find potential therapeutic targets. Thus, reliable models are crucial, and the MCA occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) is deemed to be the most clinically relevant surgical model of ischemic stroke, and is fairly non-invasive and easily reproducible. Typically the MCAo model is used with rodents, especially with mice due to all the genetic variations available for this species. Here we describe (and present in the video) how to successfully perform the MCAo model (with reperfusion) in mice to generate reliable and reproducible data.

In order to understand the pathophysiology of stroke, it is important to use reliable models. This paper will describe one of the most frequently used stroke models in mice, termed the middle cerebral artery occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) with reperfusion.

Técnica quirúrgica para la oclusión de la arteria cerebral media y la reperfusión del movimiento inducidos en ratones

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

Modelado del accidente cerebrovascular en ratones: oclusión transitoria de la arteria cerebral media a través de la arteria carótida externa

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

Neurociencias

Establecimiento de un modelo transcraneal de ratones de oclusión de la arteria cerebral media

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

Autor destacado: Técnicas innovadoras y direcciones futuras en la investigación del ictus 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

Un modelo de oclusión transcraneal modificado de la arteria cerebral media para estudiar los resultados del accidente cerebrovascular en ratones ancianos

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Modelo de isquemia cerebral transitoria por oclusión de la arteria cerebral media

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

Autor destacado: Evaluación del daño isquémico del accidente cerebrovascular a través del modelo de oclusión de la arteria cerebral media 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

Modelo de oclusión transitoria de la arteria cerebral media de accidente cerebrovascular

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

Modelado de accidente cerebrovascular en ratones - Oclusión arteria cerebral media con el modelo de filamento

Resumen

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Capítulos en este video

Modelo de ratón de la oclusión arteria cerebral media

Intraluminal la arteria cerebral media de oclusión (MCAO) Modelo para el ictus isquémico con Orientación flujometría láser Doppler en ratones

Carrera Modelado en ratones: Coagulación permanente de la arteria cerebral media Distal

Técnica quirúrgica para la oclusión de la arteria cerebral media y la reperfusión del movimiento inducidos en ratones

Modelado del accidente cerebrovascular en ratones: oclusión transitoria de la arteria cerebral media a través de la arteria carótida externa

Un modelo de oclusión transcraneal modificado de la arteria cerebral media para estudiar los resultados del accidente cerebrovascular en ratones ancianos

Un modelo de oclusión transcraneal modificado de la arteria cerebral media para estudiar los resultados del accidente cerebrovascular en ratones ancianos

Un modelo de oclusión transcraneal modificado de la arteria cerebral media para estudiar los resultados del accidente cerebrovascular en ratones ancianos

Modelo de oclusión transitoria de la arteria cerebral media de accidente cerebrovascular

Modelo de oclusión transitoria de la arteria cerebral media de accidente cerebrovascular