Este trabajo fue financiado por el subsidio de 5 U24-DK059637-10 al Centro de ratón Vanderbilt fenotipo metabólico.

<ol>
	<li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Berglund, E. D., Li, C. Y., Poffenberger, G., Ayala, J. E., Fueger, P. T., Willis, S. E., Jewell, M. M., Powers, A. C., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+metabolism+in+vivo+in+four+commonly+used+inbred+mouse+strains.">Glucose metabolism in vivo in four commonly used inbred mouse strains.</a> Diabetes. 57, 1790-1799 (2008).</li><li>Niswender, K. D., Shiota, M., Postic, C., Cherrington, A. D., Magnuson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+glucokinase+gene+copy+number+on+glucose+homeostasis+and+hepatic+glucose+metabolism.">Effects of increased glucokinase gene copy number on glucose homeostasis and hepatic glucose metabolism.</a> J. Biol. Chem. 272, 22570-22575 (1997).</li><li>Kim, H. J., Higashimori, T., Park, S. Y., Choi, H., Dong, J., Kim, Y. J., Noh, H. L., Cho, Y. R., Cline, G., Kim, Y. B., Kim, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+interleukin-6+and+-10+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+action+in+vivo.">Differential effects of interleukin-6 and -10 on skeletal muscle and liver insulin action in vivo.</a> Diabetes. 53, 1060-1067 (2004).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Chen, Y., Yu, C., Moore, I. K., Pypaert, M., Lutz, E. P., Kako, Y., Velez-Carrasco, W., Goldberg, I. J., Breslow, J. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+overexpression+of+lipoprotein+lipase+causes+tissue-specific+insulin+resistance.">Tissue-specific overexpression of lipoprotein lipase causes tissue-specific insulin resistance.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 98, 7522-7527 (2001).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Gavrilova, O., Chao, L., Higashimori, T., Choi, H., Kim, H. J., Yu, C., Chen, Y., Qu, X., Haluzik, M., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+rosiglitazone+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Differential effects of rosiglitazone on skeletal muscle and liver insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> Diabetes. 52, 1311-1318 (2003).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Sunshine, M. J., Albrecht, B., Higashimori, T., Kim, D. W., Liu, Z. X., Soos, T. J., Cline, G. W., O'Brien, W. R., Littman, D. R., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKC-theta+knockout+mice+are+protected+from+fat-induced+insulin+resistance.">PKC-theta knockout mice are protected from fat-induced insulin resistance.</a> J. Clin. Invest. 114, 823-827 (2004).</li><li>Kim, J. K., Gavrilova, O., Chen, Y., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Mechanism of insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> J. Biol. Chem. 275, 8456-8460 (2000).</li><li>Kim, J. K., Gimeno, R. E., Higashimori, T., Kim, H. J., Choi, H., Punreddy, S., Mozell, R. L., Tan, G., Stricker-Krongrad, A., Hirsch, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+fatty+acid+transport+protein+1+prevents+fat-induced+insulin+resistance+in+skeletal+muscle.">Inactivation of fatty acid transport protein 1 prevents fat-induced insulin resistance in skeletal muscle.</a> J. Clin. Invest. 113, 756-763 (2004).</li><li>Kim, J. K., Kim, H. J., Park, S. Y., Cederberg, A., Westergren, R., Nilsson, D., Higashimori, T., Cho, Y. R., Liu, Z. X., Dong, J., Cline, G. W., Enerback, S., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte-specific+overexpression+of+FOXC2+prevents+diet-induced+increases+in+intramuscular+fatty+acyl+CoA+and+insulin+resistance.">Adipocyte-specific overexpression of FOXC2 prevents diet-induced increases in intramuscular fatty acyl CoA and insulin resistance.</a> Diabetes. 54, 1657-1663 (2005).</li><li>Kim, J. K., Kim, Y. J., Fillmore, J. J., Chen, Y., Moore, I., Lee, J., Yuan, M., Li, Z. W., Karin, M., Perret, P., Shoelson, S. E., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+fat-induced+insulin+resistance+by+salicylate.">Prevention of fat-induced insulin resistance by salicylate.</a> J. Clin. Invest. 108, 437-446 (2001).</li><li>Kim, J. K., Michael, P. r. e. v. i. s., Peroni, S. F., Mauvais-Jarvis, O. D., Neschen, F., Kahn, S., Kahn, B. B., R, C., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redistribution+of+substrates+to+adipose+tissue+promotes+obesity+in+mice+with+selective+insulin+resistance+in+muscle.">Redistribution of substrates to adipose tissue promotes obesity in mice with selective insulin resistance in muscle.</a> J. Clin. Invest. 105, 1791-1797 (2000).</li><li>Kim, J. K., Zisman, A., Fillmore, J. J., Peroni, O. D., Kotani, K., Perret, P., Zong, H., Dong, J., Kahn, C. R., Kahn, B. B., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+toxicity+and+the+development+of+diabetes+in+mice+with+muscle-specific+inactivation+of+GLUT4.">Glucose toxicity and the development of diabetes in mice with muscle-specific inactivation of GLUT4.</a> J. Clin. Invest. 108, 153-160 (2001).</li><li>Haluzik, M., Gavrilova, O., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+deficiency+does+not+alter+insulin+sensitivity+in+mice+maintained+on+regular+or+high-fat+diet:+hyperinsulinemic-euglycemic+clamp+studies.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha deficiency does not alter insulin sensitivity in mice maintained on regular or high-fat diet: hyperinsulinemic-euglycemic clamp studies.</a> Endocrinology. 145, 1662-1667 (2004).</li><li>Haluzik, M., Yakar, S., Gavrilova, O., Setser, J., Boisclair, Y., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+in+the+liver-specific+IGF-1+gene-deleted+mouse+is+abrogated+by+deletion+of+the+acid-labile+subunit+of+the+IGF-binding+protein-3+complex:+relative+roles+of+growth+hormone+and+IGF-1+in+insulin+resistance.">Insulin resistance in the liver-specific IGF-1 gene-deleted mouse is abrogated by deletion of the acid-labile subunit of the IGF-binding protein-3 complex: relative roles of growth hormone and IGF-1 in insulin resistance.</a> Diabetes. 52, 2483-2489 (2003).</li><li>Haluzik, M. M., Lacinova, Z., Dolinkova, M., Haluzikova, D., Housa, D., Horinek, A., Vernerova, Z., Kumstyrova, T., Haluzik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+insulin+sensitivity+after+peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+is+accompanied+by+paradoxical+increase+of+circulating+resistin+levels.">Improvement of insulin sensitivity after peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment is accompanied by paradoxical increase of circulating resistin levels.</a> Endocrinology. 147, 4517-4524 (2006).</li><li>Kim, H., Haluzik, M., Asghar, Z., Yau, D., Joseph, J. W., Fernandez, A. M., Reitman, M. L., Yakar, S., Stannard, B., Heron-Milhavet, L., Wheeler, M. B., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+in+a+transgenic+model+of+type+2+diabetes+reverses+the+lipotoxic+state+and+improves+glucose+homeostasis.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment in a transgenic model of type 2 diabetes reverses the lipotoxic state and improves glucose homeostasis.</a> Diabetes. 52, 1770-1778 (2003).</li><li>Deibert, D. C., DeFronzo, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epinephrine-induced+insulin+resistance+in+man.">Epinephrine-induced insulin resistance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 717-721 (1980).</li><li>Rizza, R. A., Cryer, P. E., Haymond, M. W., Gerich, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+mechanisms+for+the+effects+of+epinephrine+on+glucose+production+and+clearance+in+man.">Adrenergic mechanisms for the effects of epinephrine on glucose production and clearance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 682-689 (1980).</li><li>Nunemaker, C. S., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Sweet, I. R., Teague, J. C., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+secretion+in+the+conscious+mouse+is+biphasic+and+pulsatile.">Insulin secretion in the conscious mouse is biphasic and pulsatile.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 523-529 (2006).</li><li>Nunemaker, C. S., Zhang, M., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Powers, A. C., Bertram, R., Sherman, A., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+mice+can+be+distinguished+by+the+period+of+their+islet+calcium+oscillations:+is+there+an+intrinsic+islet+period+that+is+imprinted+in+vivo.">Individual mice can be distinguished by the period of their islet calcium oscillations: is there an intrinsic islet period that is imprinted in vivo.</a> Diabetes. 54, 3517-3522 (2005).</li><li>Halter, J. B., Beard, J. C., Jr, P. o. r. t. e., D, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+function+and+stress+hyperglycemia:+plasma+glucose+and+epinephrine+interaction.">Islet function and stress hyperglycemia: plasma glucose and epinephrine interaction.</a> Am. J. Physiol. 247, 47-52 (1984).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Counterregulatory+deficits+occur+within+24+h+of+a+single+hypoglycemic+episode+in+conscious,+unrestrained,+chronically+cannulated+mice.">Counterregulatory deficits occur within 24 h of a single hypoglycemic episode in conscious, unrestrained, chronically cannulated mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 678-684 (2006).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., Potts, J., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid-deficient+corticotropin-releasing+hormone+knockout+mice+maintain+glucose+requirements+but+not+autonomic+responses+during+repeated+hypoglycemia.">Glucocorticoid-deficient corticotropin-releasing hormone knockout mice maintain glucose requirements but not autonomic responses during repeated hypoglycemia.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 291, 15-22 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., James, F. D., Julien, B. M., Wasserman, D. H., Drucker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glucagon-like+peptide-1+receptor+regulates+endogenous+glucose+production+and+muscle+glucose+uptake+independent+of+its+incretin+action.">The glucagon-like peptide-1 receptor regulates endogenous glucose production and muscle glucose uptake independent of its incretin action.</a> Endocrinology. 150, 1155-1164 (2009).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Granner, D. K., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+overexpression+improves+exercise-stimulated+but+not+insulin-stimulated+muscle+glucose+uptake+in+high-fat-fed+C57BL/6J+mice.">Hexokinase II overexpression improves exercise-stimulated but not insulin-stimulated muscle glucose uptake in high-fat-fed C57BL/6J mice.</a> Diabetes. 53, 306-314 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distributed+control+of+glucose+uptake+by+working+muscles+of+conscious+mice:+roles+of+transport+and+phosphorylation.">Distributed control of glucose uptake by working muscles of conscious mice: roles of transport and phosphorylation.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 286, 77-84 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Heikkinen, S., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Laakso, M., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+partial+knockout+impairs+exercise-stimulated+glucose+uptake+in+oxidative+muscles+of+mice.">Hexokinase II partial knockout impairs exercise-stimulated glucose uptake in oxidative muscles of mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 285, 958-963 (2003).</li><li>Fueger, P. T., Hess, H. S., Posey, K. A., Bracy, D. P., Pencek, R. R., Charron, M. J., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+exercise-stimulated+muscle+glucose+uptake+by+GLUT4+is+dependent+on+glucose+phosphorylation+capacity+in+the+conscious+mouse.">Control of exercise-stimulated muscle glucose uptake by GLUT4 is dependent on glucose phosphorylation capacity in the conscious mouse.</a> J. Biol. Chem. , (2004).</li><li>Fueger, P. T., Li, C. Y., Ayala, J. E., Shearer, J., Bracy, D. P., Charron, M. J., Rottman, J. N., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+kinetics+and+exercise+tolerance+in+mice+lacking+the+GLUT4+glucose+transporter.">Glucose kinetics and exercise tolerance in mice lacking the GLUT4 glucose transporter.</a> J. Physiol. 582, 801-812 (2007).</li><li>Shearer, J., Coenen, K. R., Pencek, R. R., Swift, L. L., Wasserman, D. H., Rottman, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+chain+fatty+acid+uptake+in+vivo:+comparison+of+[125I]-BMIPP+and+[3H]-bromopalmitate.">Long chain fatty acid uptake in vivo: comparison of [125I]-BMIPP and [3H]-bromopalmitate.</a> Lipids. 43, 703-711 (2008).</li></ol>

No hay conflictos de interés declarado.

El clamp hiperinsulinémico euglucémico, o una pinza de insulina, es considerado el &quot;gold standard&quot; método de evaluación de acción de la insulina in vivo. Esta técnica se ha aplicado a varias especies incluyendo a los humanos, perros, ratas y ratones. Dado el creciente número de modelos de ratones transgénicos para los trastornos metabólicos, la miniaturización de la técnica para su uso en el ratón ha establecido avances significativos a la investigación del metabolismo. Mientras que los conceptos detrás de la abrazadera de insulina son sencillas, en la práctica existen diferentes enfoques para llevar a cabo experimentos de insulina abrazadera. Esto no es un punto trivial, ya que la forma en que se lleva a cabo el experimento afecta a los resultados obtenidos 1. Aquí presentamos el protocolo utilizado por el MMPC Vanderbilt. La diferencia fundamental entre el protocolo y la de otros es que el uso de un catéter arterial para la obtención de muestras de sangre. Esto está en contraste con el enfoque más ampliamente utilizado del TBOaining muestras de sangre por la ruptura de la punta de la cola de 4, 7, 11, 12, 14-17. La ventaja del muestreo de un catéter arterial es que el experimento se lleva a cabo en un ratón consciente y sin restricciones. Toma de muestras de la cola a menudo requiere moderación y aumenta los índices de estrés, cuando las grandes muestras de sangre se obtienen 1. Las hormonas del estrés estimulan la producción de glucosa endógena y poner en peligro la utilización de glucosa 18, 19, que puede dar la apariencia de un fenotipo de resistencia a la insulina. Toma de muestras de la cola cortada puede requerir un cuidado especial de Animales institucional y la aprobación del Comité uso debido a su naturaleza estresante. El procedimiento de cateterismo arterial fue desarrollado para evitar el estrés en el ratón de la corte de la cola. Un aspecto clave de la realización de las abrazaderas de insulina es la capacidad para mantener la euglucemia. No hay algoritmos que puede predecir correctamente cómo la RGI debe ser ajustado en base a las lecturas de glucosa en sangre. Al igual que la cirugía,personal de la realización de experimentos de insulina pinza ser competente en el mantenimiento de la euglucemia razonable sólo a través de la experiencia. Es importante señalar que debido a su mayor tasa metabólica de los datos obtenidos de los estudios del ratón será inherentemente ruidosos. Esto hace que la presentación completa de los datos, incluidos los cursos de tiempo de la glucosa y la RGI y los valores absolutos de la insulina plasmática, Endora, Rd y Rc crucial para la capacidad de cualquier lector a interpretar los resultados. Las tasas de flujo de glucosa en el ratón (aproximadamente 5 veces mayor que la tasa en los seres humanos) garantiza una alta frecuencia de muestreo de la glucosa. Mientras que el volumen de sangre del ratón se limita, con una frecuencia de muestreo mínima de una vez cada 10 minutos hay que estar seguro de que una pinza adecuada que se ha logrado. Como se muestra en la Figura 4, los niveles de insulina pinza puede ser diferente entre los grupos. Factores tales como intervenciones dietéticas, manipulaciones transgénicas o las diferencias en las cepas de fondo puede afectar a fasting los niveles de insulina, que posteriormente puede afectar los niveles de insulina pinza. Interpretación de los resultados cuando los niveles de insulina son diferentes pinza puede ser problemático. Esto puede ser abordado experimentalmente mediante la realización de experiencias piloto para seleccionar las tasas de infusión de insulina que se alcancen niveles equivalentes de insulina pinza entre los grupos. Por otra parte, la somatostatina puede ser utilizado para inhibir la secreción pancreática de la hormona, la insulina y el glucagón pueden ser reemplazados en las tasas de forma experimental controlado. Este último enfoque se hace más comúnmente en las abrazaderas de insulina en las ratas que los ratones. Si estos enfoques experimentales no se toman, la RGI en estado estacionario se puede normalizar con el nivel de insulina en pinza, o un índice de sensibilidad a la insulina (S I) se pueden derivar de los datos de pinza como I = S GIR / (G • ΔI), donde G es la concentración de glucosa en estado estable y ΔI es la diferencia entre el ayuno y las concentraciones de insulina pinza. Una de las hipótesis con uno u otro enfoque es que el nivel de insulina pinza se logradentro del rango donde es linealmente sensibilidad a la insulina relacionada con el nivel de insulina de acuerdo con el grupo estudiado. Este último supuesto no se puede aplicar cuando se comparan los resistentes a la insulina y los grupos sensibles a la insulina. Idealmente, una dosis de insulina curva de respuesta se debe generar para seleccionar la infusión de insulina adecuada. Sin embargo, debido a la necesidad de experimentos adicionales, esto se hace raramente. La versatilidad proporcionada por cateterismo arterial se extiende a los métodos experimentales más allá de las abrazaderas euglucémico. Por ejemplo, pinzas de hiperglucemia, en la que la glucosa es infundida a una velocidad variable para mantener la hiperglucemia en relación con la glucosa en ayunas, se puede utilizar para evaluar la función pancreática endógena en vivo 2, 20, 21. La medición de la secreción de insulina primera fase durante esta prueba requiere la adquisición frecuente de muestras de sangre (es decir, cada minuto 2-5), que no es viable en la obtención de muestras de la punta de la cola. Por otra parte,catecolaminas elevados derivados del muestreo cola puede afectar la secreción de insulina y mejorar la secreción de glucagón 22. El protocolo de clamp de insulina también puede ser modificado para permitir que los niveles de glucosa a caer a la hipoglucemia relativa para evaluar la contra-reguladoras de respuesta de 2, 23, 24. Cateterización arterial también puede ser utilizado para evaluar la dinámica del metabolismo de la glucosa durante el ejercicio 25-30. Esto es una ventaja significativa sobre los métodos convencionales a cabo en los puntos sola vez antes y después del ejercicio o en vivo aislado ex músculos. Las técnicas presentadas aquí también se puede utilizar para evaluar no sólo la glucosa, sino también el metabolismo de ácidos grasos 31.

hyperinsulinemic-euglycemic clamps in conscious, unrestrained mice

La diabetes tipo 2 se caracteriza por un defecto en la acción de la insulina. El clamp hiperinsulinémico euglucémico, o una pinza de insulina, es considerado el &quot;gold standard&quot; método de evaluación de acción de la insulina in vivo. Durante una pinza de la insulina, hiperinsulinemia se consigue mediante una infusión de insulina constante. Euglucemia se mantiene a través de una infusión de glucosa concomitante a una tasa variable. Esta tasa de infusión de glucosa variable (GIR) se determina mediante la medición de glucosa en la sangre a intervalos breves durante todo el experimento y el ajuste de la RGI en consecuencia. El GIR es un indicativo de acción de la insulina en todo el cuerpo, como los ratones con una mayor acción de la insulina requieren un mayor GIR. La pinza de la insulina puede incorporar la administración de dos isótopos [14 C] desoxiglucosa para evaluar los tejidos específicos de la captación de glucosa y [3 - 3 H] glucosa para evaluar la capacidad de la insulina para suprimir la tasa de aparición de glucosa endógena (Endora), un marcador de producción de glucosa hepática, y para estimular lavelocidad de desaparición de glucosa en todo el cuerpo (Rd). La miniaturización de la abrazadera de la insulina para su uso en modelos de ratón genéticos de las enfermedades metabólicas ha dado lugar a avances significativos en la investigación de la diabetes. Métodos para la realización de las abrazaderas de insulina varía entre laboratorios. Es importante señalar que la forma en que se lleva a cabo una pinza de insulina pueden afectar significativamente los resultados obtenidos. Hemos publicado una evaluación exhaustiva de los diferentes enfoques a la realización de las abrazaderas de insulina en ratones conscientes 1, así como una evaluación de la respuesta metabólica de las cuatro cepas de ratón común innato usando varias técnicas de pinza 2. Aquí se presenta un protocolo para la realización de las abrazaderas de insulina en ratones conscientes, sin restricciones desarrollada por la Vanderbilt ratón fenotipo metabólico Center (MMPC; URL: www.mc.vanderbilt.edu / MMPC). Esto incluye una descripción del método para la implantación de catéteres utilizados durante el clamp de insulina. El protocolo empleado por laVanderbilt MMPC utiliza un diseño único de dos catéter 3 del sistema. Un catéter se inserta en la vena yugular para infusiones. Un segundo catéter se inserta en la arteria carótida, lo que permite tomar muestras de sangre sin la necesidad de restringir o manejar el ratón. Esta técnica proporciona una ventaja significativa para el método más común para la obtención de muestras de sangre durante las abrazaderas de insulina, que es muestra de la punta de la cola cortada. A diferencia de este último método, el muestreo de un catéter arterial no es estresante para el ratón 1. También se describen métodos para el uso de infusiones isotópica de seguimiento para evaluar los tejidos específicos de acción de la insulina. También se proporcionan directrices para la presentación adecuada de los resultados obtenidos a partir de las abrazaderas de insulina.

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Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

El clamp hiperinsulinémico euglucémico, o una pinza de insulina, es el estándar de oro para evaluar la acción de la insulina<em&gt; En vivo</em&gt;. Un método para la realización de las abrazaderas de insulina en ratones se ha descrito. Esto incluye un método para la cateterización arterial, que permite los experimentos que se realizaron en ratones conscientes, sin trabas, con un mínimo de estrés.

Hiperinsulinémico euglucémico abrazaderas en ratones conscientes, sin freno

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

93.7K vistas.  Sanford-Burnham Medical Research Institute at Lake Nona. El clamp hiperinsulinémico euglucémico, o una pinza de insulina, es el estándar de oro para evaluar la acción de la insulina En vivo. Un método para la realización de las abrazaderas de insulina en ratones se ha descrito. Esto incluye un método para la cateterización arterial, que permite los experimentos que se realizaron en ratones conscientes, sin trabas, con un mínimo de estrés.