Este método es muy importante para responder a preguntas clave en las áreas de Oncología, Neuro-Biología, Cardiología y Desarrollo Fetal, y por supuesto también es importante en el área de la investigación reproductiva. Las principales ventajas de esta técnica son que no es invasiva, indolora, fácil, rápida y permite el seguimiento de fetos en puntos de tiempo gestacional relevantes a lo largo del embarazo. Al menos media hora antes del procedimiento de diagnóstico por imágenes, encienda el sistema de ultrasonido, la plataforma calentada y el calentador de gel.
Abra un nuevo estudio o una nueva serie en un estudio existente en el navegador. Introduzca toda la información necesaria en la ventana de información del estudio. Haga clic en Aceptar y confirme que aparece la ventana de imágenes en modo B.
Cuando la ecografía esté lista, confirme la falta de respuesta al pellizco del dedo del dedo delfín en un ratón anestesiado, y aplique un ung ón en los ojos del animal. Coloque una gota de electro gel en cada una de las 4 secciones de cobre de la plataforma calentada y fije las patas a las secciones recubiertas de electro gel de la plataforma. Retire el cabello del abdomen del animal con crema depilatoria y un hisopo de algodón, lavando la crema de la piel depilada después de un minuto con una compresa empapada en agua.
A continuación, aplique gel de ultrasonido precalentó sobre el área expuesta. Una razón para la baja intensidad de la señal puede ser la baja cantidad de gel colocado entre el ratón y el haz de ultrasonido. En nuestra experiencia, una cantidad bastante grande de gel es necesaria para una buena calidad de la señal.
Cuando el animal esté listo, coloque el transductor sobre la vejiga para su uso como punto de referencia, y mueva la mesa de la plataforma calefactora a los lados izquierdo y derecho del abdomen para trazar las implantaciones fetales en modo B 2D, ajustando el transductor o plataforma según sea necesario hasta que la primera implantación sea visible en la pantalla, en su tamaño más grande. Seleccione Etiqueta de imagen e introduzca un nombre para el archivo de imagen. Ajuste la posición de la imagen, hasta que el flujo sanguíneo dentro de la arteria umbilicalis de la placenta esté a la vista, y almacene un solo marco o cineloop para mediciones placentarias.
Para colorear las imágenes Doppler para determinar la dirección del flujo sanguíneo, presione el botón Color y utilice el trackball para mover el cuadro de color a la posición adecuada, haciendo clic en Actualizar para ajustar el tamaño de la caja según sea necesario. Cuando el cuadro tenga el tamaño correcto, haga clic en Seleccionar y almacene la imagen según sea experimentalmente adecuado. Para la cuantificación Doppler de onda pulsada del flujo sanguíneo a través de los vasos, localice la región de interés en el modo de adquisición Doppler de color y haga clic en Onda de pulso.
Aparecerá una línea discontinua. Mueva la línea al vaso sanguíneo de interés y utilice la perilla de ángulo Doppler para ajustar el ángulo de la línea para alinearse con el flujo sanguíneo. Para las mediciones Doppler de onda pulsada, es importante observar el ángulo entre la dirección del flujo sanguíneo y el haz de ultrasonido.
Los ángulos demasiado altos o los diferentes ángulos entre los animales en el mismo experimento pueden conducir a mediciones de velocidad inexactas. A continuación, haga clic en Actualizar y almacene cineloop de las líneas Doppler que aparecen en la ventana de adquisición Doppler de onda pulsada. Para revisar los datos, haga clic en Gestión de estudios, desplácese hasta la imagen en miniatura de interés y haga doble clic en Actualizar, haga clic de nuevo en Gestión de estudios y haga clic en Cerrar para cerrar la ventana del explorador para finalizar la adquisición de datos y guardar una serie grabada.
Para exportar los datos, conecte un disco duro, haga clic en Exportar a, para marcar una o varias series de datos y seleccione el espacio de almacenamiento para copiar los datos en el disco duro. Aquí, se muestran imágenes de ultrasonido representativas adquiridas en el modo B en los días gestacionales 5, 8, 10 y 12, y se muestran sus correspondientes resultados de medición del área de implantación, revelando una reducción significativa en el área de implantación en ratones tratados con deficiencia de células de mástil tratados con anti-CD122 desde el día gestacional 10 en adelante. La imagen en modo B facilita la toma de imágenes y la medición de partes individuales de una implantación.
Por ejemplo, los animales con deficiencia de células de mástil tratados con anti-CD122 demuestran una reducción significativa en el área de la placenta, el grosor y el diámetro en comparación con los ratones no tratados en los días gestacionales 10 y 12. Por el contrario, el área placentaria y el diámetro son similares entre los grupos en el día gestacional 14, y el grosor de la placenta, un aumento significativo en los animales transgénicos tratados contra-CD122 en comparación con los ratones no tratados en el día gestacional 14. Las imágenes Doppler de onda pulsada de la arteria uterina para la medición de la velocidad sistólica máxima y la velocidad diastólica, y el índice de resistencia calculado, revelan valores similares entre los animales tratados y no tratados.
El índice de resistencia de la arteria umbilicalis en animales con deficiencia de células de mástil tratados con anti-CD122, sin embargo, aumenta significativamente en comparación con los ratones no tratados. Al intentar este procedimiento, es importante tener en cuenta, que usted debe hacer esto cada dos días en lugar de todos los días, para evitar el estrés, y el riesgo de narcotización repetitiva de los animales. Después de este procedimiento, se pueden realizar otras mediciones, como la medición 3D, la visualización y cuantificación del movimiento del tejido a lo largo del tiempo, las mediciones de la presión arterial y también las inyecciones guiadas por ultrasonido.
Después de su desarrollo, este método allanó el camino para médicos e investigadores en el área de la atención obstétrica y prenatal, porque es posible hacer un seguimiento del desarrollo fetal y reconocer posibles anomalías durante el embarazo.
