Diese Methode ist sehr wichtig, um Schlüsselfragen in den Bereichen Onkologie, Neurobiologie, Kardiologie und Fetalentwicklung zu beantworten, und natürlich ist sie auch im Bereich der Reproduktionsforschung wichtig. Die Hauptvorteile dieser Technik sind, dass sie nicht-invasiv, schmerzlos, einfach, schnell ist und die Nachbeobachtung von Föten an relevanten Gestationszeitpunkten während der Schwangerschaft ermöglicht. Schalten Sie mindestens eine halbe Stunde vor dem Bildgebungsverfahren das Ultraschallsystem, die beheizte Plattform und den Gelwärmer ein.
Öffnen Sie eine neue Studie oder eine neue Serie in einer vorhandenen Studie im Browser. Geben Sie alle erforderlichen Informationen in das Studieninfofenster ein. Klicken Sie auf OK, und bestätigen Sie, dass das Bildgebungsfenster im B-Modus angezeigt wird.
Wenn der Ultraschall bereit ist, bestätigen Sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenkneifen in einer anästhesierten Maus, und tragen Salbe auf die Augen des Tieres. Legen Sie einen Tropfen Elektrogel auf jeden der 4 Kupferabschnitte der beheizten Plattform und befestige die Pfoten an den elektrogelbeschichteten Abschnitten der Plattform. Entfernen Sie das Haar aus dem Bauch des Tieres mit Enthaarungscreme und einem Wattestäbchen, waschen Sie die Creme nach einer Minute mit einer wassergetränkten Kompresse von der enthaarten Haut.
Dann vorgewärmtes Ultraschallgel auf den exponierten Bereich auftragen. Ein Grund für die geringe Signalintensität kann die geringe Menge an Gel zwischen der Maus und dem Ultraschallstrahl sein. Für eine gute Signalqualität ist unserer Erfahrung nach eine recht große Gelmenge notwendig.
Wenn das Tier bereit ist, legen Sie den Messumformer über die Blase für den Einsatz als Bezugspunkt, und bewegen Sie den Heizplattformtisch nach links und rechts des Bauches, um die fetalen Implantationen im 2D-B-Modus zu verfolgen, indem Sie den Messumformer oder die Plattform nach Bedarf anpassen, bis die erste Implantation auf dem Bildschirm in seiner größten Größe sichtbar ist. Wählen Sie Bildbeschriftung aus, und geben Sie einen Namen für die Bilddatei ein. Passen Sie die Position des Bildes an, bis der Blutfluss innerhalb der Arteria umbilicalis der Plazenta sichtbar ist, und speichern Sie einen einzelnen Rahmen oder Cineloop für Plazentamessungen.
Für Farb-Doppler-Bildgebung, um die Richtung des Blutflusses zu bestimmen, drücken Sie die Farbe-Taste, und verwenden Sie den Trackball, um das Farbfeld an die entsprechende Position zu verschieben, indem Sie auf Aktualisieren klicken, um die Größe des Feldes bei Bedarf anzupassen. Wenn das Feld die richtige Größe hat, klicken Sie auf Auswählen, und speichern Sie das Bild als experimentell geeignet. Für gepulste Welle Doppler Quantifizierung des Blutflusses durch die Gefäße, lokalisieren Sie den Bereich des Interesses in der Farbe Doppler Erfassungsmodus und klicken Sie auf Pulswelle.
Es wird eine gestrichelte Linie angezeigt. Bewegen Sie die Linie auf das Blutgefäß von Interesse und verwenden Sie den Doppler Winkelknopf, um den Winkel der Linie anzupassen, um mit dem Blutfluss auszurichten. Bei gepulsten Wellen-Doppler-Messungen ist es wichtig, den Winkel zwischen der Richtung des Blutflusses und dem Ultraschallstrahl zu beobachten.
Zu hohe Winkel oder unterschiedliche Winkel zwischen Tieren im selben Experiment können zu ungenauen Geschwindigkeitsmessungen führen. Klicken Sie dann auf Aktualisieren und speichern Sie cineloop der angezeigten Doppler-Linien im gepulsten Wave-Doppler-Erfassungsfenster. Um die Daten zu überprüfen, klicken Sie auf Studienverwaltung, scrollen Sie zum von Interesse interessierten Miniaturbild, doppelklicken Sie auf Aktualisieren, klicken Sie dann erneut auf Studienverwaltung, und klicken Sie auf Schließen, um das Browserfenster zu schließen, um die Datenerfassung abzuschließen und eine aufgezeichnete Serie zu speichern.
Um die Daten zu exportieren, verbinden Sie eine Festplatte, klicken Sie auf Exportieren nach, um eine oder mehrere Datenreihen zu markieren, und wählen Sie den Speicherplatz für das Kopieren der Daten auf die Festplatte aus. Hier werden repräsentative Ultraschallbilder gezeigt, die im B-Modus an den Gestationstagen 5, 8, 10 und 12 aufgenommen wurden, und die entsprechenden Implantationsflächenmessergebnisse, die eine signifikante Reduktion des Implantationsbereichs bei anti-CD122 behandelten Mastzell-defizienten Mäusen ab dem 10. Tag der Schwangerschaft zeigen. Die B-Modus-Bildgebung erleichtert die Abbildung und Messung einzelner Teile einer Implantation.
Beispielsweise weisen anti-CD122 behandelte Mastzell-Mangeltiere eine signifikante Verringerung der Plazentafläche, Dicke und des Durchmessers im Vergleich zu unbehandelten Mäusen an den Gestationstagen 10 und 12 auf. Im Gegensatz dazu sind die Plazentafläche und der Durchmesser zwischen den Gruppen am 14. Schwangerschaftstag und der Plazentadicke ähnlich, was eine signifikante Zunahme der anti-CD122 behandelten transgenen Tiere im Vergleich zu unbehandelten Mäusen am 14. Tag der Schwangerschaft darstellt. Die pulsierte Wellen-Doppler-Bildgebung der Arteria uterina zur Messung der systolischen Spitzengeschwindigkeit und der diastolischen Geschwindigkeit sowie der berechnete Widerstandsindex zeigen ähnliche Werte zwischen den behandelten und unbehandelten Tieren.
Der Resistenzindex der Arteria umbilicalis bei anti-CD122 behandelten Mastzellmangeltieren ist jedoch im Vergleich zu unbehandelten Mäusen signifikant erhöht. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig zu bedenken, dass Sie dies jeden zweiten Tag statt jeden Tag tun sollten, um den Stress und das Risiko einer wiederholten Narkotisierung der Tiere zu vermeiden. Im Anschluss an dieses Verfahren können weitere Messungen wie 3D-Messung, Visualisierung und Quantifizierung der Gewebebewegung im Zeitverlauf, Blutdruckmessungen und auch Ultraschall-geführte Injektionen durchgeführt werden.
Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Methode den Weg für Ärzte und Forscher im Bereich der Geburtshilfe und vorgeburtlichen Versorgung, weil es möglich ist, die fetale Entwicklung zu verfolgen und mögliche Anomalien während der Schwangerschaft zu erkennen.
