Este modelo de insuficiencia cardíaca porcina, inducido por la obstrucción de la arteria circunfleja izquierda y el ritmo rápido, se puede utilizar para evaluar los efectos de la inyección directa de células madre intramiocardiales en la regeneración cardíaca. Nuestro modelo de insuficiencia cardíaca de colonia porcina es bastante estable. El nuevo tamaño de infarto de este modelo es de alrededor del 16% del infarto de inyección de ventrículo izquierdo y ventrículo izquierdo reducido en al menos un 40% desde el inicio.
Con el cerdo experimental fijado en la posición supina, localice la arteria carótida derecha y la vena mala rórica en el triángulo carótido, y utilice fórceps hemostáticos y técnica aséptica para aislar la arteria carótida derecha y la vena yugular. Ligar el extremo distal de la arteria carótida derecha y la vena malaíta y usar una angiocata para cannular la vena malaíta derecha. Después de insertar un plomo marcapasos en el ventrículo derecho bajo guía de rayos X, utilice fórceps para aislar los músculos esternocleidomastoideos y de escala anterior y conectar el marcapasos al plomo.
Luego implanta un marcapasos entre los dos músculos. A continuación, cierre los dos músculos con 2-0 de seda. Para evaluar los cambios en la función del ventrículo izquierdo, aísle la arteria femoral derecha y la vena femoral en el triángulo femoral y calcule la arteria femoral derecha con una angiocat.
Coloque un cable guía en la vena femoral a través de la angiocath y extraiga la angiocata. Cannula una vaina francesa de 12 en la vena femoral bajo la guía del cable guía y retire el cable guía. Cannula la arteria femoral derecha con una vaina francesa nueve como se acaba de demostrar.
E inserte un catéter de globo a través de la vaina francesa 12 en la vena cava interior bajo guía de rayos X. Calibre un catéter de volumen de presión francés de siete versiones francesas en solución salina isotónica con un procesador de señal de volumen de presión e inserte el catéter en el ápice del ventrículo izquierdo a través de la nueve fundas francesas bajo guía de rayos X. Suspenda la ventilación y utilice el procesador de señal de volumen de presión para medir el derivado de presión máxima y negativa del ventrículo izquierdo, y la presión sistólica y las presiones diastólicas finales.
A continuación, reinicie la ventilación. Para la inducción de infarto de miocardio, administre cinco miligramos por kilogramo de amiodarona y 1,5 miligramos por kilogramo de bolo de lidocaína por vía intravenosa durante una hora para prevenir arritmias ventriculares antes de calcular la arteria carótida correcta con una vaina francesa ocho como se ha demostrado. Realice la angiografía coronaria a través de una funda de seis franceses sobre el alambre guíando el catéter guía a través de la vaina colocada guiada por la fluoroscopia estándar del brazo C.
Ocluir a la arteria coronaria del circunflejo izquierdo distal a la primera rama marginal obtusa con inflación percutánea del catéter de dilatación de la dilatación de la angioplastia transluminal bajo guía por rayos X. Cargue un mililitro de microesferas de esponja de 700 micrómetros mezclados con siete mililitros de iohexol en una jeringa de 10 mililitros e inyecte la mezcla a través del catéter de globo para bloquear la arteria coronaria circunfleja izquierda. Luego desinfla el globo y realiza una angiografía para confirmar la oclusión.
Ocho semanas después de la carga de inducción por infarto dos veces 10 a la octava célula madre pluripotente inducida por el hombre células madre derivadas de células madre en dos mililitros de solución salina normal en una jeringa de cinco mililitros y esterilizar 10 centímetros alrededor de la zona de latido del ápice del animal experimental anestesiado. Utilice un retractor para realizar una toracotomía izquierda en el espacio intercostal de cuatro o cinco y realizar una pericardiotomía para exponer la pared lateral infarto. Cuando las áreas infartos visibles, realizar de cinco a ocho inyecciones intra miocárdica de aproximadamente 300 microlitros de células por inyección antes de cerrar el espacio intercostal con alambre de hierro y cerrar la capa muscular con 2-0 suturas de seda y los tejidos subcutáneos y capas de piel con 2-0 suturas de vicril.
Para evaluar la inducibilidad de la taquiarritmia ventricular después del tratamiento celular, inserte un catéter electrofisiológico francés en el ápice ventricular derecho a través de la vena femoral y muestre las grabaciones intracardiacas con el electrocardiograma de superficie leas I, II y III en el sistema de registro electrofisiológico a una velocidad de 200 milímetros por segundo. Utilice un estimulador para entregar un ancho de pulso de dos milisegundos a dos veces el umbral diastólico y entregar un tren de ritmo de ocho estímulos a uno de 200 milisegundos y una longitud de ciclo de conducción de 300 milisegundos seguido de uno o dos estímulos adicionales prematuros. Luego acortó secuencialmente los intervalos de acoplamiento hasta que se induce el período refractario efectivo ventricular de arritmia, teniendo en cuenta la presencia de una taquiarritmia ventricular sostenida inducible.
En este experimento representativo, el examen ecocardiográfico en serie mostró que la fracción de eyección del ventrículo izquierdo disminuyó significativamente desde el inicio, mientras que la dimensión diastólica final del ventrículo izquierdo y la dimensión sistólica final aumentaron significativamente a las ocho semanas después de la inducción del infarto de miocardio. Por el contrario, la fracción de eyección del ventrículo izquierdo aumentó significativamente y la dimensión sistólica final disminuyó notablemente en el grupo de trasplante celular ocho semanas después de la administración. La relación del volumen de presión sistólica final y derivado de la presión negativa disminuyó significativamente desde el inicio a las ocho semanas después de la inducción del infarto de miocardio, mientras que la administración intramiocardial de células madre mesenquimales dio lugar a un aumento de estas funciones.
La medición del espesor de la pared del infarto del ventrículo izquierdo en secciones de cinco a siete centímetros de espesor de cada animal reveló un porcentaje de infarto de ventrículo izquierdo de aproximadamente 16%No hubo supervivencia celular alrededor del lugar de inyección en el área del infarto ocho semanas después del trasplante. Pero un pequeño número de las células madre inyectadas sobrevivientes eran visibles en el área de periinfarto. Los incidentes de taquiarritmias ventriculares sostenidas inducibles podrían aumentar fácilmente en animales con insuficiencia cardíaca.
Cabe destacar que el trasplante de células madre no modificó significativamente el sustrato miocárdico subyacente para reducir la susceptibilidad a la taquiarritmia ventricular. Como la obstrucción de la arteria coronaria circunfleja izquierda puede inducir arritmia. Asegúrese de controlar el ECG y utilizar inmediatamente el desfibrilador bifásico externo para restablecer los senos para los senos para restablecer los senos paranasales según sea necesario.
Este método proporciona un modelo animal grande estable y reproducible clínicamente relevante de insuficiencia cardíaca para probar la eficacia de las terapias basadas en células madre.
