왼쪽 경피 동맥 막힘과 급속한 속도에 의해 유도된 이 돼지 심부전 모델은 심장 재생에 대한 직접적인 내트라미카르디줄기 줄기 세포 주입의 효과를 평가하는 데 사용될 수 있다. 우리의 돼지 식민지 심부전 모델은 매우 안정적입니다. 이 모델의 새로운 경색 크기는 좌심실의 약 16%이며 좌심실 주입 경색은 기준선에서 적어도 40% 감소합니다.
실험돼지가 척추 위치에 고정되어 있어 경동맥삼각형에 오른쪽 경동맥과 저글러 정맥을 찾아, 혈전성 집게와 무균 기술을 사용하여 올바른 경동맥과 경정맥을 분리한다. 오른쪽 경동맥과 저글러 정맥의 말단 끝을 리게이트하고 오른쪽 저글러 정맥을 수선하는 앙고카를 사용합니다. 엑스레이 지침에서 오른쪽 심실로 심박동기 리드를 삽입한 후 집계를 사용하여 흉골균증 및 전방 스케일렌 근육을 분리하고 심박조율기를 리드에 연결합니다.
그런 다음 두 근육 사이에 맥박 조정기를 이식합니다. 그런 다음 2-0 실크로 두 근육을 닫습니다. 좌심실 기능의 변화를 평가하기 위해, 대퇴 삼각형에서 오른쪽 대퇴동맥과 대퇴정맥을 분리하고, 앙고카와 오른쪽 대퇴동맥을 계산한다.
앙고카를 통해 대퇴 정맥에 가이드 와이어를 넣고 안미차제거합니다. 가이드 와이어의 지도하에 대퇴 정맥에 12 개의 프랑스 칼집을 칸테레이트와 가이드 와이어를 제거하십시오. 방금 입증 된 바와 같이 아홉 프랑스 칼집으로 오른쪽 대퇴 동맥을 수있습니다.
그리고 X 선 지침에 따라 내부 베나 카바에 12 프랑스어 칼집을 통해 풍선 카테터를 삽입합니다. 압력 볼륨 신호 프로세서로 동위 원소식용염으로 7개의 프랑스 압력 볼륨 카테터를 보정하고 x-ray 지침하에 9개의 프렌치 칼집을 통해 카테터를 왼쪽 심실 정점에 삽입합니다. 환기를 중단하고 압력 볼륨 신호 프로세서를 사용하여 좌심실 최대 및 음압 유도체, 수축기 압력 및 엔드 확장기 압력을 측정합니다.
그런 다음 환기를 다시 시작합니다. 심근 경색 유도의 경우, 킬로그램 아미오다론 당 5 밀리그램과 킬로그램 당 1.5 밀리그램의 리도카인 볼루스를 정맥 내 1시간 동안 투여하여 8개의 프렌치 칼집으로 올바른 경동맥을 계산하기 전에 정맥 내 부정맥을 예방합니다. 표준 C 암 형광술에 의해 유도 배치 된 칼집을 통해 여섯 프랑스 칼집 오버 더 와이어 안내 카테터를 통해 관상 동맥 혈관 조영술을 수행합니다.
왼쪽 할례 관상 동맥에 폐색은 경피 성 원형 관상 동맥 혈관 성형술 팽창 풍선 팽창 팽창 x 선 지침에서 첫 번째 obtuse 한계 지점에 탈구. 700 마이크로미터 스폰지 마이크로스피어의 1밀리리터를 10밀리리터 주사기에 7밀리리터의 요오헥솔과 혼합하고 풍선 카테터를 통해 혼합물을 주입하여 왼쪽 서쿰플렉스 관상 동맥을 차단합니다. 그런 다음 풍선을 수축시키고 혈관 검사를 수행하여 폐색을 확인합니다.
경색 유도 부하 후 8주 후 8번 인간 유도만능 줄기 세포 유래 중간엽 줄기 세포는 정상 식염수 2밀리리터에서 5밀리리터 주사기로 살균하고 마취된 실험 동물의 정점 주위 10cm를 살균한다. 리트랙터를 사용하여 4개 또는 5개의 늑간 간 공간에서 왼쪽 흉부 절제술을 수행하고 심근을 수행하여 경각선 측벽을 노출시합니다. 경색 부위가 보이면, 철철선으로 늑간 공간을 닫고 2-0 비릴 봉합사를 가진 피하 조직 및 피부 층으로 근육 층을 닫기 전에 주입 당 약 300 마이크로 리터의 5 - 8 내 심근 주사를 수행하십시오.
세포 치료 후 심실 타키야르 리듬의 유도성을 평가하기 위해, 대퇴 정맥을 통해 오른쪽 심실 정점에 6 개의 프랑스 전기 생리학적 카테터를 삽입하고 표면 심전도 leas I, II 및 III를 초당 200 밀리미터의 속도로 전기 생리 적 기록 시스템에 표시하십시오. 자극기를 사용하여 확장기 임계값의 2배에 달하는 2밀리초 펄스 폭을 전달하고 120밀리초와 300밀리초 구동 사이클 길이 1~2회 조기 자극으로 8개의 자극의 속도 열차를 제공합니다. 이어서 부정맥의 심실 유효 난치성 기간이 유도될 때까지 커플링 간격을 순차적으로 단축하여 유도할 수 없는 지속적인 심실 타키야스맥심피아의 존재를 지적한다.
본 대표적인 실험에서, 직렬 심초음파 검사는 좌심실 종횡확장기치와 종단 수축기 치수가 심근 경색 유도 후 8주에서 크게 증가하는 동안 기준선에서 좌심실 배출 분수가 현저히 감소하는 것으로 나타났다. 대조적으로, 좌심실 배출 분수는 현저하게 증가하고 투여 후 8주 후에 세포 이식 군에서 종자 수축기 치수가 현저하게 감소하였다. 음압 유도체 및 종단 수축기 압력 부피 관계는 심근 경색의 유도 후 8주에서 기준선에서 현저히 감소하면서 중간엽 줄기 세포의 심근 투여는 이러한 기능의 증가를 초래하였다.
각 동물로부터 5~7개의 직렬 1센티미터 두께의 좌심실 경색을 측정한 결과, 이식 후 8주 동안 광원 부위 주변에 세포 생존이 없었다. 그러나 살아남은 주입 된 줄기 세포의 적은 수는 periinfarct 지역에서 볼 수 있었다. 유도 가능한 지속적인 심실 타키야르 리듬의 사건은 심부전을 가진 동물에서 쉽게 증가할 수 있었습니다.
참고로, 줄기 세포 이식은 심실 타키야르 리듬에 대한 감수성을 줄이기 위해 근본적인 심근 기판을 크게 수정하지 않았다. 좌측 정관동맥 막힘으로 부정맥을 유발할 수 있다. ECG를 모니터링하고 즉시 외부 쌍면 제세동기를 사용하여 필요에 따라 부비동을 다시 설정해야 합니다.
이 방법은 줄기 세포 기반 치료의 효능을 테스트하기 위한 심부전의 안정적이고 재현 가능한 임상 관련 대형 동물 모델을 제공합니다.
